【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及分离膜材料的制备及其应用领域，特别涉及一种用于微生物培养生长计数的混合纤维素微滤膜及制备方法，在微生物检测行业具备较好的应用价值。
技术介绍
1、薄膜过滤法进行微生物检测的主要原理是：将适当孔径的滤膜放入滤器过滤样品，由于滤膜的作用可使得微生物保留在膜的表面上，且样品中微生物生长抑制剂可在过滤后用无菌水冲洗滤器而除去，随后将滤膜放在培养基上通过滤膜的微孔交换微生物的营养物和代谢物进行实现对微生物的培养，在滤膜表面上培养出的菌落可以计数，并和样品量相关。
2、薄膜过滤法进行微生物检测已经是一种国际公认的微生物标准检验方法，广泛应用于环境监测、食品及饮料工业、化妆品、制药工业品质控制和电子工业等领域。我国也将薄膜过滤法收载作为微生物无菌及限度检查法中的检验方法之一，由于利用微孔滤膜(滤膜的孔径应≤0.45μm)阻截细菌的方式可以过滤样品中的可溶性成分，从而使样品中污染的杂菌得以检出的薄膜过滤法具有简便、快速、准确的特点，其已经被广泛应用于各种微生物检测中。
3、膜的化学性质、孔径大小、生长介质类型以及培养温度都会直接影响每种微生物的回收率，在诸多微滤膜中，混合纤维素微滤膜具备孔径均匀，孔隙率高，无介质脱落，质地薄，阻力小，滤速快，成本低等特点而在微生物检测行业被广泛应用，但是目前混合纤维素微滤膜在微生物检测场景的应用中也存在着微生物的培养、生长以及计数受到混合纤维素微滤膜表面的褶皱的影响，具体表现如下：
4、与生产中的无菌过滤应用不同，微生物需要来自培养基的营养物质，故薄膜过滤法进行
技术实现思路
1、本方案提供了一种用于微生物培养生长计数的混合纤维素微滤膜及制备方法，通过提供一种亲水性良好、孔径均匀、孔隙率高且具有抗皱性能的混合纤维素滤膜，使得混合纤维素微滤膜在微生物的过滤过程中不产生任何褶皱现象，进而特别适用于微生物的培养、生长及计数。
2、第一方面，本方案提供了一种用于微生物培养生长计数的混合纤维素微滤膜的制备方法，包括以下步骤：
3、(1)制备混合纤维素铸膜液：将合计质量浓度为7～15％的硝酸纤维素与醋酸纤维素、质量浓度为10～40％的非溶剂、质量浓度为1～5％的亲水添加剂和质量浓度为40～80％的溶剂混溶制备得到混合溶液，在混合溶液中加入质量浓度为0.1～5％的抗皱剂后搅拌均匀得到混合纤维素铸膜液，其中抗皱剂插入纤维素分子链之间削弱分子链之间的作用力；
4、(2)制备混合纤维素微滤膜：将混合纤维素铸膜液在成膜空间内置于设定成膜条件下涂覆成膜得到混合纤维素微滤膜；
5、(3)后处理混合纤维素微滤膜：对混合纤维素微滤膜进行热处理得到用于微生物培养生长计数的混合纤维素微滤膜。
6、关于本方案的用于微生物培养生长计数的混合纤维素微滤膜的制备方法的原理如下：混合纤维微滤膜中的纤维素高分子链构象中具备结晶区和无定型区(非结晶区)，结晶区比无定型区稳定故自由空间更小，当结晶区吸水膨胀后更容易使尺寸变大，通过引入一定的抗皱剂削弱纤维素分子链的分子间力并破坏结晶区，进而使得结晶区的尺寸保持相对的稳定状态。具体的，抗皱剂分子插入到纤维素分子链之间削弱了分子链间的作用力，进而增加了纤维素分子链的移动性，使其相互缠结在一起，从而柔性增加，因此，混合纤维素微滤膜具备更加柔顺的分子链，纤维大分子吸水后不产生褶皱现象。
7、优选的，在“制备混合纤维素铸膜液”步骤中，所述的硝酸纤维素与醋酸纤维素质量比值为6～11，所述的溶剂为乙酸乙酯、乙酸甲酯、丙酮的一种或以上组合；所述的非溶剂为甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇的一种或以上组合，所述的亲水添加剂为丙二醇、丁二醇、丙三醇、木糖醇、山梨糖醇的一种或以上组合。
8、优选的，在“制备混合纤维素铸膜液”步骤中，抗皱剂包括：一缩二乙二醇苯甲酸酯、三乙酸甘油酯、三丙酸甘油酯、三丁酸甘油酯、聚乙二醇、偏苯三酸三(2-乙基已)酯、偏苯三酸三异辛酯、均苯四酸四辛酯、邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二丁酯的一种或以上组合。
9、优选的，在“制备混合纤维素微滤膜”步骤中，使用自动涂膜机将混合纤维素铸膜液在300～700μm的刮刀间隙下涂覆成膜，并置于充满恒温、恒湿空气的成膜空间内设定成膜条件以控制混合纤维素铸膜液的相转化过程，混合纤维素铸膜液固化干燥成型后得到制备混合纤维素微滤膜。
10、优选的，在“制备混合纤维素微滤膜”步骤中，成膜条件为：成膜温度控制在15～30℃范围内，成膜湿度控制在60～95％rh范围内，成膜时间控制在2～4h。
11、优选的，在“后处理混合纤维素微滤膜”步骤中，由于引入了抗皱剂进而导致混合纤维素微滤膜在初期成膜的过程存在大量的内应力，故本方案对混合纤维素微滤膜进行热处理，以消除纤维素大分子间的内应力，以使得混合纤维素微滤膜的尺寸保持在相对稳定状态，以得到具有抗皱性能的混合纤维素微滤膜。
12、优选的，在“后处理混合纤维素微滤膜”步骤中，控制后处理的温度控制在：40～50℃范围内；湿度控制在20～40％rh范围内；后处理时间控制在48～72h范围内。
13、第二方面，本方案提供了一种根据上述方法制备得到的混合纤维素微滤膜，亲水性良好、孔径均匀、孔隙率高且具有抗皱性能。
14、优选的，本方案提供的混合纤维素微滤膜的表面及内部具有均匀的海绵状孔结构分布。
15、第三方面，本方案提供了一种上述混合纤维素微滤膜的应用方法，用于微生物检测环节行业。
16、优选的，本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种用于微生物培养生长计数的混合纤维素微滤膜的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的用于微生物培养生长计数的混合纤维素微滤膜的制备方法，其特征在于，在“制备混合纤维素铸膜液”步骤中，抗皱剂包括：一缩二乙二醇苯甲酸酯、三乙酸甘油酯、三丙酸甘油酯、三丁酸甘油酯、聚乙二醇、偏苯三酸三(2-乙基已)酯、偏苯三酸三异辛酯、均苯四酸四辛酯、邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二丁酯的一种或以上组合。
3.根据权利要求1所述的用于微生物培养生长计数的混合纤维素微滤膜的制备方法，其特征在于，在“制备混合纤维素铸膜液”步骤中，所述的硝酸纤维素与醋酸纤维素质量比值为6～11，所述的溶剂为乙酸乙酯、乙酸甲酯、丙酮的一种或以上组合；所述的非溶剂为甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇的一种或以上组合，所述的亲水添加剂为丙二醇、丁二醇、丙三醇、木糖醇、山梨糖醇的一种或以上组合。
4.根据权利要求1所述的用于微生物培养生长计数的混合纤维素微滤膜的制备方法，其特征在于，在“制备混合纤维素微滤膜”步骤中，成膜条件为：成膜温度控制在15
5.根据权利要求1所述的用于微生物培养生长计数的混合纤维素微滤膜的制备方法，其特征在于，在“后处理混合纤维素微滤膜”步骤中，控制后处理的温度控制在：40～50℃范围内；湿度控制在20～40％RH范围内；后处理时间控制在48～72h范围内。
6.根据权利要求1所述的用于微生物培养生长计数的混合纤维素微滤膜的制备方法，其特征在于，在“制备混合纤维素微滤膜”步骤中，使用自动涂膜机将混合纤维素铸膜液在300～700μm的刮刀间隙下涂覆成膜，并置于充满恒温、恒湿空气的成膜空间内设定成膜条件以控制混合纤维素铸膜液的相转化过程，混合纤维素铸膜液固化干燥成型后得到制备混合纤维素微滤膜。
7.一种用于微生物培养生长计数的混合纤维素微滤膜，其特征在于，根据权利要求1到6任一所述的用于微生物培养生长计数的混合纤维素微滤膜的制备方法制备得到。
8.根据权利要求7所述的用于微生物培养生长计数的混合纤维素微滤膜，其特征在于，混合纤维素微滤膜的表面及内部具有均匀的海绵状孔结构分布。
9.一种根据权利要求7所述的用于微生物培养生长计数的混合纤维素微滤膜的应用方法，其特征在于，用于薄膜过滤法过滤微生物。
10.根据权利要求9所述的用于微生物培养生长计数的混合纤维素微滤膜的应用方法，其特征在于，用于薄膜过滤法过滤微生物，并进行微生物的培养、生长和计数。
...【技术特征摘要】
1.一种用于微生物培养生长计数的混合纤维素微滤膜的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的用于微生物培养生长计数的混合纤维素微滤膜的制备方法，其特征在于，在“制备混合纤维素铸膜液”步骤中，抗皱剂包括：一缩二乙二醇苯甲酸酯、三乙酸甘油酯、三丙酸甘油酯、三丁酸甘油酯、聚乙二醇、偏苯三酸三(2-乙基已)酯、偏苯三酸三异辛酯、均苯四酸四辛酯、邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二丁酯的一种或以上组合。
3.根据权利要求1所述的用于微生物培养生长计数的混合纤维素微滤膜的制备方法，其特征在于，在“制备混合纤维素铸膜液”步骤中，所述的硝酸纤维素与醋酸纤维素质量比值为6～11，所述的溶剂为乙酸乙酯、乙酸甲酯、丙酮的一种或以上组合；所述的非溶剂为甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇的一种或以上组合，所述的亲水添加剂为丙二醇、丁二醇、丙三醇、木糖醇、山梨糖醇的一种或以上组合。
4.根据权利要求1所述的用于微生物培养生长计数的混合纤维素微滤膜的制备方法，其特征在于，在“制备混合纤维素微滤膜”步骤中，成膜条件为：成膜温度控制在15～30℃范围内，成膜湿度控制在60～95％rh范围内，成膜时间控制在2～4h。
5.根据权利要求1所述的用于微生物培养生长计数的混合纤...
【专利技术属性】
技术研发人员：张龙辉，邹凯伦，倪小璐，沈志林，
申请(专利权)人：浙江泰林生命科学有限公司，
类型：发明
国别省市：
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