一种生产反式3-甲氧基-4-羟基肉桂酸的方法技术

本发明专利技术公开了一种生产反式3‑甲氧基‑4‑羟基肉桂酸的方法，该方法是通过构建能够表达酪氨酸酚裂解酶和酪氨酸解氨酶的基因工程菌，再经过全细胞转化，催化愈创木酚、丙酮酸及氨生成反式3‑甲氧基‑4‑羟基肉桂酸。本发明专利技术中选择的底物来源广、制备过程简单，且价格低廉，是理想的底物；同时本发明专利技术选择的酶具有活性高、光学专一性强等优势，因此，利用本发明专利技术的重组菌转化生产反式3‑甲氧基‑4‑羟基肉桂酸，其生产效率高、绿色环保且成本低，具有良好的工业化应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，具体而言，涉及一种生产反式3-甲氧基-4-羟基肉桂酸的方法。

技术介绍

1、3-甲氧基-4-羟基肉桂酸，又称为阿魏酸，属于肉桂酸的衍生物，在植物体内普遍存在，尤其在阿魏、川芎、当归等中药材中含量较高。3-甲氧基-4-羟基肉桂酸分为顺式及反式两种类型，其中反式3-甲氧基-4-羟基肉桂酸能清除自由基，并抑制酪氨酸酶活性，调节人体生理功能，广泛应用于医药、农药、保健品、化妆品原料及食品添加剂中，具有较高的经济价值。

2、反式3-甲氧基-4-羟基肉桂酸的制备方法主要有提取法、化学合成法及生物转化法。提取法主要以米糠油来源的谷维素为原料，经处理提取获得反式3-甲氧基-4-羟基肉桂酸，但是，提取步骤复杂、成本高，限制了这种方法的工业化应用。化学合成法主要以香兰素为基本原料，合成过程中会产生较多的副产物，收率低且分离纯化成本高，阻碍了其大规模应用。

3、目前中国专利cn104818300中公开的反式3-甲氧基-4-羟基肉桂酸的生物法制备路线为：通过咖啡酸-o甲基转移酶将s-腺苷甲硫氨酸的甲基转移至咖啡酸，从而获得反式3-甲氧基本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种生产反式3-甲氧基-4-羟基肉桂酸的工程菌，其特征在于，所述工程菌包含酪氨酸酚裂解酶和酪氨酸解氨酶的编码基因。

2.根据权利要求1所述的工程菌，其特征在于，所述酪氨酸酚裂解酶的编码基因来源于成团泛菌(Pantoea agglomerans)、多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)或摩氏摩根菌(Morganella morganii)；所述酪氨酸解氨酶的编码基因来源于豚鼠耳炎诺卡菌(Nocardia otitidiscaviarum)、西宫皮肤球菌(Dermacoccus nishinomiyaensis)或Cupriavidus pampae。<...

【技术特征摘要】

1.一种生产反式3-甲氧基-4-羟基肉桂酸的工程菌，其特征在于，所述工程菌包含酪氨酸酚裂解酶和酪氨酸解氨酶的编码基因。

2.根据权利要求1所述的工程菌，其特征在于，所述酪氨酸酚裂解酶的编码基因来源于成团泛菌(pantoea agglomerans)、多杀性巴氏杆菌(pasteurella multocida)或摩氏摩根菌(morganella morganii)；所述酪氨酸解氨酶的编码基因来源于豚鼠耳炎诺卡菌(nocardia otitidiscaviarum)、西宫皮肤球菌(dermacoccus nishinomiyaensis)或cupriavidus pampae。

3.根据权利要求2所述的工程菌，其特征在于，所述酪氨酸酚裂解酶的氨基酸序列如seq id no.1-seq id no.3所示；

4.根据权利要求3所述的工程菌，其特征在于，所述酪氨酸解氨酶的氨基酸序列如seqid no.7-seq id no.9所示；

5.根据权利要求4所述的工程菌，其特征在于，所述工程菌的出发菌株包括escherichia coli ...

【专利技术属性】
技术研发人员：秦勇，杨波，张炜，
申请(专利权)人：杭州唯铂莱生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：