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一种蔗糖异构酶突变体及其高效合成异麦芽酮糖制造技术

技术编号:40949414 阅读:20 留言:0更新日期:2024-04-18 20:23
本发明专利技术公开了一种蔗糖异构酶突变体及其高效合成异麦芽酮糖,属于基因工程、酶工程技术领域。本发明专利技术的突变体M282S/M441F/A470E在30℃和pH 6.0时,比酶活可到达871.3U/mg,较野生型提高1.33倍,且稳定性提高,在45℃下半衰期约为120min。将该重组蔗糖异构酶突变体应用于异麦芽酮糖生产中,产量和转化率提高,利用发酵液上清作为粗酶液添加入反应体系中,当蔗糖浓度为650g/L时,产率为98.7%,产量为641.6g,能够高效合成异麦芽酮糖并获得高产量。本发明专利技术为异麦芽酮糖的生物催化合成提供了优质蔗糖异构酶突变体,制备异麦芽酮糖产量达到国内外公开报道最高水平。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种蔗糖异构酶突变体及其高效合成异麦芽酮糖,属于基因工程、酶工程。


技术介绍

1、异麦芽酮糖(isomaltulose),即6-o-吡喃葡糖基-d-果糖,又称为帕拉金糖,是蔗糖的同分异构体。异麦芽酮糖的甜度只有蔗糖的一半,且无任何异味,甜味稳定。异麦芽酮糖食用后不会在口腔和胃中被分解,能够预防龋齿,有效减少口腔疾病的发生,且唾液中可变链球菌的数量明显减少;进入小肠后异麦芽酮糖会被蔗糖酶和异麦芽糖酶缓慢水解吸收,体内胰岛素和血糖水平不会迅速变化,可有效预防糖尿病、提神抗疲劳、不致腹泻、加速脂肪代谢等。

2、天然的异麦芽酮糖少量存在于甜菜和蜂蜜等食物中,但由于含量低、提取困难,难以满足市场需求。目前异麦芽酮糖的制备方法有化学法和生物转化,化学法成本高、污染大,微生物转化分离提取较困难、生产强度弱,酶法能有效避免这些问题,目前蔗糖异构酶是生物酶法工业化生产异麦芽酮糖最有效的酶。

3、蔗糖异构酶(sucrose isomerase,siase,ec 5.4.99.11),能够将蔗糖异构化形成异麦芽酮糖和海藻酮糖,异构化产物受温本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种蔗糖异构酶突变体,其特征在于,所述突变体为,将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蔗糖异构酶的第282位的甲硫氨酸突变为丝氨酸得到的;

2.编码权利要求1所述突变体的基因。

3.携带权利要求2所述基因的载体。

4.表达权利要求1所述的蔗糖异构酶突变体,或携带权利要求2所述基因,或含有权利要求3所述载体的重组细胞;优选的,所述重组细胞是以真菌或细菌为表达宿主。

5.一种酶制剂,其特征在于,所述酶制剂中含有权利要求1所述的蔗糖异构酶突变体,或所述蔗糖异构酶突变体酶与酶保护剂的混合物。

6.一种提高蔗糖异构酶酶活和/或稳定...

【技术特征摘要】

1.一种蔗糖异构酶突变体,其特征在于,所述突变体为,将氨基酸序列如seq id no.1所示的蔗糖异构酶的第282位的甲硫氨酸突变为丝氨酸得到的;

2.编码权利要求1所述突变体的基因。

3.携带权利要求2所述基因的载体。

4.表达权利要求1所述的蔗糖异构酶突变体,或携带权利要求2所述基因,或含有权利要求3所述载体的重组细胞;优选的,所述重组细胞是以真菌或细菌为表达宿主。

5.一种酶制剂,其特征在于,所述酶制剂中含有权利要求1所述的蔗糖异构酶突变体,或所述蔗糖异构酶突变体酶与酶保护剂的混合物。

6.一种提高蔗糖异构酶酶活和/或稳定性的方法,其特征在于,所述方法为,将氨基酸序列如seq id no.1所示的蔗糖异构酶的第282位的甲硫氨酸突变为丝氨酸;

7.一种可溶性表达蔗糖异构酶的方法,...

【专利技术属性】
技术研发人员:张荣珍黄润仪
申请(专利权)人:江南大学
类型:发明
国别省市:

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