神经特异性敲除9130024F11Rik基因突变小鼠动物模型及其构建方法、应用技术

本发明专利技术提供一种神经特异性敲除9130024F11Rik基因突变小鼠动物模型及其构建方法、应用，该方法包括：利用CRISPR/Cas9技术，针对目的基因的基因结构寻找靶序列，并根据靶序列信息设计针对9130024F11Rik的guide‑RNA；经活性检测后，将具有活性的guide‑RNA和Cas9体外转录；最后将guide‑RNA、Cas9mRNA以及含有loxP位点的donor DNA片段注射到受精卵中，从后代中筛选获得目的阳性小鼠。本发明专利技术基于CRISPR/Cas9基因敲除技术设计神经特异性敲除9130024F11Rik基因突变小鼠动物模型的特异性靶向RNA，首次构建了神经特异性9130024F11Rik基因的小鼠敲除模型，该模型在神经干细胞以及组细胞分化机理研究方面具有较高的应用价值，可作为研究脑发育的分子机理、探究神经和精神系统疾病的病因的动物模型。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及动物模型，且特别涉及一种神经特异性敲除9130024f11rik基因突变小鼠动物模型及其构建方法、应用。

技术介绍

1、satb2(special at-rich sequence-binding protein 2)属于satb家族，位于小鼠1号染色体，位于人类2号染色体，二者高度同源。satb2蛋白作为与核基质附着区(mar)结合的转录因子，其具有5个转录本，可以激活多个基因的转录。同时，satb2也是几个基因调控网络的高级调控者，在多个发育过程中具有关键作用。近年来的研究表明了satb2在大脑皮层干细胞、祖细胞的分化和增殖过程中起重要的调控作用。神经系统发育过程中，satb2蛋白可以使轴突延伸至胼胝体，确保大脑半球间神经冲动信号得以协同传递；同时，satb2蛋白也影响味觉形成以及长期记忆形成过程，故而研究其调控途径十分重要。

2、9130024f11rik(riken cdna 9130024f11 gene，简称9130024f11rik)位于小鼠的1号染色体，处于satb2反方向上游的位置。9130024f11rik在中本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种构建神经特异性敲除9130024F11Rik基因突变小鼠动物模型的特异性靶标RNA，其特征在于，所述特异性靶向RNA包括guide-RNA 1、guide-RNA 2、guide-RNA 3、guide-RNA4、guide-RNA 5、guide-RNA 6、guide-RNA 7和guide-RNA 8，所述guide-RNA 1的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述guide-RNA 2的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示，所述guide-RNA 3的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示，所述guide-RNA 4的核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示，所述...

【技术特征摘要】

1.一种构建神经特异性敲除9130024f11rik基因突变小鼠动物模型的特异性靶标rna，其特征在于，所述特异性靶向rna包括guide-rna 1、guide-rna 2、guide-rna 3、guide-rna4、guide-rna 5、guide-rna 6、guide-rna 7和guide-rna 8，所述guide-rna 1的核苷酸序列如seq id no：1所示，所述guide-rna 2的核苷酸序列如seq id no：2所示，所述guide-rna 3的核苷酸序列如seq id no：3所示，所述guide-rna 4的核苷酸序列如seq id no：4所示，所述guide-rna 5的核苷酸序列如seq id no：5所示，所述guide-rna 6的核苷酸序列如seq id no：6所示，所述guide-rna 7的核苷酸序列如seq id no：7所示，所述guide-rna 8的核苷酸序列如seq id no：8所示，其中，所述guide-rna 1和所述guide-rna 2作用于9130024f11rik基因的intron 1靶序列，所述guide-rna 3和所述guide-rna 4作用于所述9130024f11rik基因的intron 2靶序列，所述guide-rna 5和所述guide-rna 6作用于9130024f11rik基因的intron 3靶序列，所述guide-rna 7和所述guide-rna 8作用于所述9130024f11rik基因的intron 4靶序列，所述intron 1靶序列如seq id no：9所示，所述intron 2靶序列如seq id no：10所示，所述intron 3靶序列如seq id no：11所示，所述intron 4靶序列如seq id no：12所示。

2.一种神经特异性敲除9130024f11rik基因突变小鼠动物模型的构建方法，...

【专利技术属性】
技术研发人员：苗楠，潘贤，孙涛，
申请(专利权)人：华侨大学，
类型：发明
国别省市：