【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于活性肽制备，具体涉及一种血管紧张素i转换酶抑制肽及其应用。
技术介绍
1、肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system，ras)和激肽释放酶-激肽系统(kallikrein-kinin system，kks)是人体调节血压、血管张力和心血管功能的主要机制，而血管紧张素转化酶(angiotensin i-converting enzyme，ace)又是这两个血压调节系统中的关键作用酶。ace通过催化血管紧张素i转化为血管紧张素ii并引发一系列反应，以及灭活缓激素起到调节血压作用，这表明抑制ace活性可能是体内阻断血压升高的有效途径。虽然大部分化学合成的ace抑制剂(卡托普利、依那普利、赖诺普利和贝那普利等)具有较好的临床治疗效果，但它们会对人体产生肾功能损伤、干咳、皮疹等毒副作用，这些不良影响不应被低估。因此，开发新的低副作用ace抑制剂成为研究热点。目前，已经从真菌、细菌、植物、动物中分离了大量生物活性肽。迄今为止，在biopep数据库中有超过900种生物活性肽被报道为ace抑制剂，其中大多数来源于海洋生物、乳源、谷物、豆类。
2、茶是一种流行于全球的非酒精类饮料，而中国是世界上最大的茶叶种植国。长期以来，茶叶的研究大多集中在它的水溶性活性成分，且随着茶饮料工业的迅速发展，全球茶渣产量出现了剧增。产生的茶渣被用作饲料、土壤肥料和重金属吸附剂，而大多数茶渣未经任何利用就被丢弃，造成了极大的资源浪费。茶渣中的蛋白质约占干物质的21％～28％，是优质植物蛋白质，具有进一步纯化和利用的
技术实现思路
1、为了克服现有技术的不足和缺点，本专利技术的首要目的在于提供一种血管紧张素i转换酶抑制肽，该抑制肽(aaaspgggm或gihettyns)与ace活性口袋的关键残基以及zn2+活性位点通过氢键和金属离子相互作用进行结合，还通过大量疏水相互作用表现出与卡托普利相似的ace抑制活性机制。同时，aaaspgggm和gihettyns在ea.hy926细胞模型中，可通过促进no生成和抑制et-1分泌来起到细胞降血压活性。
2、本专利技术的另一目的在于提供上述血管紧张素i转换酶抑制肽的制备方法。
3、本专利技术的再一目的在于通过上述血管紧张素i转换酶抑制肽的应用。
4、本专利技术的目的通过下述技术方案实现：
5、一种血管紧张素i转换酶抑制肽，其氨基酸序列为：aaaspgggm或gihettyns；
6、所述的血管紧张素i转换酶抑制肽的制备方法，包含如下步骤：
7、直接采用体外固相合成上述血管紧张素i转换酶抑制肽或者以英红九号红茶渣为原料，经碱溶酸沉提取、胰蛋白酶水解、纯化得到血管紧张素i转换酶抑制肽；
8、所述的胰蛋白酶水解的条件优选为：在37℃、ph 7.20条件下水解3.20h；
9、所述的胰蛋白酶水解的底物质量浓度优选为3％、酶底质量比优选为0.40％；
10、所述的纯化包含超滤分离和液相色谱分离等步骤；
11、所述的超滤分离的具体操作为：
12、利用超滤管对英红九号茶蛋白酶解液进行初分离，离心，收集分子量<3kda组分；
13、所述的离心的条件优选为4000r/min离心30min；
14、所述的液相色谱分离的具体操作为：采用prep 150制备液相系统，反相柱sunfireprep c18obdtm(19mm×250mm,5μm,waters)，对超滤分离得到的分子量<3kda组分进行分离纯化；收集活性组分，旋转蒸发浓缩并进行冷冻干燥，得到血管紧张素i转换酶抑制肽；
15、所述的液相色谱的条件优选为：流动相a：超纯水、0.1％ tfa；流动相b：甲醇、0.1％tfa；洗脱条件：0～30min，5％～15％ b；30～40min，15％～25％ b；40～60min，25％～35％ b；60～70min，35％～45％ b；70～80min，45％～95％ b；以上百分比均为体积百分比；进样量为4ml，洗脱流速10ml/min，检测波长214nm和280nm；
16、所述的血管紧张素i转换酶抑制肽在制备抑制血管紧张素转化酶(ace)产品中的应用；
17、所述的血管紧张素i转换酶抑制肽在制备降血压产品中的应用；
18、一种血管紧张素转化酶抑制剂，包含所述的血管紧张素i转换酶抑制肽作为活性成分；
19、所述的血管紧张素转化酶抑制剂中还包含药物学上可接受的载体或辅料；
20、所述药学上可接受的载体或辅料包括助溶剂、保湿剂、表面活性剂、基质、乳化剂、防腐剂和溶剂等中的至少一种；
21、一种降血压药物，包含所述的血管紧张素i转换酶抑制肽作为活性成分；
22、所述的降血压药物中还包含药物学上可接受的载体或辅料；
23、所述药学上可接受的载体或辅料包括助溶剂、保湿剂、表面活性剂、基质、乳化剂、防腐剂和溶剂等中的至少一种；
24、本专利技术相对于现有技术具有如下的优点及效果：
25、(1)本专利技术以英红九号红茶渣为原料，利用酶解、超滤、高效液相色谱分离纯化从英红九号茶蛋白中获得ace抑制肽；再通过质谱法对ace抑制肽进行结构鉴定从59个肽段中筛选出两个新型高活性ace抑制肽，其氨基酸序列分别为：aaaspgggm(903.3717da，ic50＝0.77mg/ml)、gihettyns(1053.3994da，ic50＝0.2mg/ml)。然后本专利技术利用分子对接技术研究其构效关系和ace抑制机制，结果表明，aaaspgggm和gihettyns均能够与ace的s1、s2和s1′活性口袋中的多个氨基酸残发生结合，主要是氢键、金属离子结合和疏水相互作用对稳定对接复合物和抑制ace活性起到了最重要的作用。
26、(2)本专利技术进一步通过ea.hy926细胞模型发现aaaspgggm和gihettyns可通过促进no的释放，抑制et-1的分泌来发挥活性作用。
27、综上，茶叶蛋白是食源性ace抑制肽的良好来源，本专利技术提供的血管紧张素i转换酶抑制肽有望作为一种潜在的抗高血压药物或功能性食品配料，为茶渣中茶蛋白的开发、高价值利用以及新型健康食品的开发提供新的思路。
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1.一种血管紧张素I转换酶抑制肽，其特征在于其氨基酸序列为：AAASPGGGM或GIHETTYNS。
2.权利要求1所述的血管紧张素I转换酶抑制肽的制备方法，其特征在于包含如下步骤：
3.根据权利要求2所述的血管紧张素I转换酶抑制肽的制备方法，其特征在于：
4.根据权利要求3所述的血管紧张素I转换酶抑制肽的制备方法，其特征在于：
5.根据权利要求3所述的血管紧张素I转换酶抑制肽的制备方法，其特征在于：
6.根据权利要求5所述的血管紧张素I转换酶抑制肽的制备方法，其特征在于：
7.权利要求1所述的血管紧张素I转换酶抑制肽在制备抑制血管紧张素转化酶产品中的应用。
8.权利要求1所述的血管紧张素I转换酶抑制肽在制备降血压产品中的应用。
9.一种血管紧张素转化酶抑制剂，其特征在于包含权利要求1所述的血管紧张素I转换酶抑制肽作为活性成分。
10.一种降血压药物，其特征在于包含权利要求1所述的血管紧张素I转换酶抑制肽作为活性成分。
【技术特征摘要】
1.一种血管紧张素i转换酶抑制肽，其特征在于其氨基酸序列为：aaaspgggm或gihettyns。
2.权利要求1所述的血管紧张素i转换酶抑制肽的制备方法，其特征在于包含如下步骤：
3.根据权利要求2所述的血管紧张素i转换酶抑制肽的制备方法，其特征在于：
4.根据权利要求3所述的血管紧张素i转换酶抑制肽的制备方法，其特征在于：
5.根据权利要求3所述的血管紧张素i转换酶抑制肽的制备方法，其特征在于：
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