【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于药物分析，尤其涉及一种叶绿醌(维生素k1)滴剂有关物质的检测方法。
技术介绍
1、叶绿醌(phylloquinone，2-甲基-3-叶绿基-1,4-萘醌，又称为维生素k1)为2-甲基-3-(3，7，11，15-四甲基-2-十六碳烯基)-1，4-萘二酮的反式和顺式异构体的混合物。属维生素类药物，是肝脏合成因子ⅱ、ⅶ、ⅸ、ⅹ所必需的物质。
2、中国药典(chp2020)、日本药典(jp18)和美国药典(usp43)中均未收载本品有关物质的检测方法，只在欧洲药典(ep10.6)中有收载维生素k1原料的有关物质检测方法。欧洲药典方法采用辛醇-二异丙基醚-庚烷(1:3.3:1000v/v/v)作为流动相，色谱柱填料采用硅胶，其方法已经不能满足叶绿醌(维生素k1)滴剂的质量要求，其中杂质a、杂质b和杂质c间的分离度低于1.5，按照上述方法不能达到有效分离(分离度需≥1.5才能有效分离)，且流动相体系采用的是纯有机相体系，对环境和实验人员的危害较大。
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术旨在开发一种叶绿醌(维生素k1)叶绿醌(维生素k1)滴剂有关物质的检测方法，能够准确有效地定性和定量测定叶绿醌(维生素k1)滴剂中杂质a、杂质b和杂质c。
2、为达到以上技术目的，本专利技术采用的技术方案如下：
3、本专利技术提供一种叶绿醌(维生素k1)滴剂有关物质的检测方法，采用高效液相色谱法检测，所述高效液相色谱法的检测条件包括：以体积百分比浓度为60～70
4、优选地，所述高效液相色谱法的检测条件中，以体积百分比浓度为60～65％的乙腈水溶液为流动相a，体积比计：乙腈：四氢呋喃＝9～10:1为流动相b，进行梯度洗脱。
5、进一步优选地，所述高效液相色谱法的检测条件中，以体积百分比浓度为65％的乙腈水溶液为流动相a，体积比计：乙腈：四氢呋喃＝9:1为流动相b，进行梯度洗脱。
6、优选地，所述检测方法按照如下的顺序进行梯度洗脱：0～8分钟：100％流动相a；8～13分钟：流动相a从100％减少到5％，流动相b从0增加到95％；13～45分钟：流动相a为5％，流动相b为95％；45～50分钟：流动相a从5％增加到100％，流动相b从95％减少到0；50～60分钟：流动相a为100％，流动相b为0％；26～34分钟：97％流动相a：3％流动相b；其中，上述梯度洗脱的每段时间的范围可以均增加1-2分钟或者可以从3～10分钟起的梯度洗脱时间范围可以均减少1-2分钟。
7、优选地，所述高效液相色谱法的检测条件还包括：采用以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，采用紫外检测器，优选地，检测波长为252nm～256nm；和/或，流速为0.9～1.1ml/min；和/或，柱温为38～40℃。
8、进一步优选地，所述高效液相色谱法的检测条件中，检测波长为254nm；和/或，流速为1.0ml/min；和/或，柱温为40℃。
9、优选地，所述高效液相色谱法的检测条件还包括：溶液的配制，所述溶液包括供试品溶液、对照品溶液，其中，供试品溶液的制备包括：
10、取叶绿醌(维生素k1)滴剂20粒，将其内容物转移至适宜容器中，混合均匀。取混合后的内容物适量，精密称定，加乙腈超声使溶解并定量稀释制成每1ml中约含维生素k10.5mg的溶液；
11、所述对照品溶液的制备包括：
12、精密量取供试品溶液适量，用乙腈稀释制成每1ml中约含维生素k1 1μg的溶液。
13、优选地，所述溶液还包括杂质对照品溶液，所述杂质对照品包括杂质a对照品、杂质b对照品、杂质c对照品中的至少一种；进一步优选地，所述杂质对照品溶液的制备包括：取杂质a对照品、杂质b对照品、杂质c对照品中的至少一种适量，精密称定，加无水乙醇超声使溶解并定量稀释制成每1ml中含单一杂50μg的溶液。
14、优选地，所述杂质对照品的溶液中含有杂质a、杂质b、杂质c。
15、和现有技术相比，本专利技术具有以下技术效果：
16、本专利技术重新设计合理的流动相a和流动相b组合，并结合相应的洗脱条件进行梯度洗脱，即便在杂质a、杂质b、杂质c同时存在的条件下，杂质a、杂质b、杂质c与维生素k1之间的最小分离度大于2.0，使各组分达到有效分离，并且能有效检测出其它未知杂质，为叶绿醌(维生素k1)滴剂的质量可靠性、稳定性和安全性提供了保障与技术支持。且本专利技术的检测方法流动相体系减少了有机溶剂的使用，进而减轻了对实验员和环境的危害。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种叶绿醌滴剂有关物质的检测方法，其特征在于，采用高效液相色谱法检测，所述高效液相色谱法的检测条件包括：以体积百分比浓度为60～70％的乙腈水溶液为流动相A，体积比计：乙腈：四氢呋喃＝8～10:1的混合溶液为流动相B，进行梯度洗脱。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的检测条件中，以体积百分比浓度为60～65％的乙腈水溶液为流动相A，体积比计：乙腈：四氢呋喃＝9～10:1为流动相B，进行梯度洗脱。
3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的检测条件中，以体积百分比浓度为65％的乙腈水溶液为流动相A，体积比计：乙腈：四氢呋喃＝9:1为流动相B，进行梯度洗脱。
4.根据权利要求1～3任一项所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法按照如下的顺序进行梯度洗脱：0～8分钟：100％流动相A；8～13分钟：流动相A从100％减少到5％，流动相B从0增加到95％；13～45分钟：流动相A为5％，流动相B为95％；45～50分钟：流动相A从5％增加到100％，流动相B从95％减少到0；50～60分钟：流
5.根据权利要求1～4任一项所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的检测条件还包括：采用以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，采用紫外检测器，优选地，检测波长为252nm～256nm；和/或，流速为0.9～1.1mL/min；和/或，柱温为38～40℃。
6.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的检测条件中，检测波长为254nm；和/或，流速为1.0mL/min；和/或，柱温为40℃。
7.根据权利要求1～6任一项所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的检测条件还包括：溶液的配制，所述溶液包括供试品溶液、对照品溶液，其中，供试品溶液的制备包括：
8.根据权利要求7所述的检测方法，其特征在于，所述溶液还包括杂质对照品溶液，所述杂质对照品包括杂质A对照品、杂质B对照品、杂质C对照品中的至少一种；优选地，所述杂质对照品溶液的制备包括：取杂质A对照品、杂质B对照品、杂质C对照品中的至少一种适量，精密称定，加无水乙醇超声使溶解并定量稀释制成每1ml中含单一杂50μg的溶液。
9.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于，所述杂质对照品的溶液中含有杂质A、杂质B、杂质C。
...【技术特征摘要】
1.一种叶绿醌滴剂有关物质的检测方法，其特征在于，采用高效液相色谱法检测，所述高效液相色谱法的检测条件包括：以体积百分比浓度为60～70％的乙腈水溶液为流动相a，体积比计：乙腈：四氢呋喃＝8～10:1的混合溶液为流动相b，进行梯度洗脱。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的检测条件中，以体积百分比浓度为60～65％的乙腈水溶液为流动相a，体积比计：乙腈：四氢呋喃＝9～10:1为流动相b，进行梯度洗脱。
3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的检测条件中，以体积百分比浓度为65％的乙腈水溶液为流动相a，体积比计：乙腈：四氢呋喃＝9:1为流动相b，进行梯度洗脱。
4.根据权利要求1～3任一项所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法按照如下的顺序进行梯度洗脱：0～8分钟：100％流动相a；8～13分钟：流动相a从100％减少到5％，流动相b从0增加到95％；13～45分钟：流动相a为5％，流动相b为95％；45～50分钟：流动相a从5％增加到100％，流动相b从95％减少到0；50～60分钟：流动相a为100％，流动相b为0％；26～34分钟：97％流动相a：3％流动相b；其中，上述梯度洗脱的每段时间的范围可以均增加1-2分钟或者可以...
【专利技术属性】
技术研发人员：张锐，申天天，张锐敏，黄玉香，赵小君，陈可达，谌宗永，
申请(专利权)人：北京阳光诺和药物研究股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。