一种免疫荧光检测方法、试剂及其应用技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，尤其涉及使用荧光染料标记抗体的方法、免疫荧光检测方法、试剂及其应用。本发明专利技术提供的方法使用简便，能够对信号进行放大，提高检测的灵敏度，并可在同一体系中检测不同抗原。此外，本发明专利技术提供的试剂稳定性强，持续时间长，适用于生物标志物的各种免疫检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，尤其涉及使用荧光染料标记抗体的方法、免疫荧光检测方法、试剂及其应用。

技术介绍

1、免疫学检测方法是目前最常用的检测方法之一，广泛应用于医院、血站、体检中心等，主要用于肿瘤检测、肝炎检测、性病检测、孕检等。

2、poct，即时检验(point-of-care testing)，指在病人旁边进行的临床检测及床边检测(bedside testing)，通常不一定需要由临床检验师来进行。即时检验是在采样现场即刻进行检测分析，省去标本在实验室检验时的复杂处理程序，快速得到检验结果的一类新方法。主要用于体检中心、急诊、重症监护、门诊等部门。很多即时检验采用方法的是免疫检测，即利用抗体检测特定的标记物，例如肿瘤标记物、心肌标记物、病毒等等。

3、目前常见的检测方法主要包括放射免疫分析法(ria)、胶体金法、酶联免疫法(elisa)、时间分辨荧光免疫法(trfia)和化学发光免疫法(clia)。其中，放射免疫分析法需要使用放射性物质，对环境造成污染；胶体金法的检测灵敏度不高，不能满足临床检测的各种需要；酶联免疫法是把反应所需的本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用荧光染料标记抗体的方法，包括步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述亲和素选自卵白亲和素(Avidin)、链霉亲和素(Streptavidin)、中性链亲和素(NeutrAvidinTM)及类亲和素，优选为链霉亲和素(Streptavidin)。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述激发剂选自多核苷酸、多肽和非核苷酸非氨基酸的化合物或其组合。

4.根据权利要求1-3任一所述的方法，其中所述激发剂为Trigger DNA，所述TriggerDNA为单链DNA或双链DNA，优选为单链DNA。

5.根据权利要求4所述的方法，...

【技术特征摘要】

1.一种用荧光染料标记抗体的方法，包括步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述亲和素选自卵白亲和素(avidin)、链霉亲和素(streptavidin)、中性链亲和素(neutravidintm)及类亲和素，优选为链霉亲和素(streptavidin)。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述激发剂选自多核苷酸、多肽和非核苷酸非氨基酸的化合物或其组合。

4.根据权利要求1-3任一所述的方法，其中所述激发剂为trigger dna，所述triggerdna为单链dna或双链dna，优选为单链dna。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述trigger dna的长度为10-200个核苷酸，例如10-150、11-100、12-100、13-50或15-30。

6.根据权利要求4或5所述的方法，其中所述trigger dna中的生物素位于所述triggerdna的5’端、3’端或中间任意位置，优选位于所述trigger dna的5’端或3’端。

7.根据权利要求4-6任一所述的方法，其中，所述生物素与所述trigger dna之间存在连接子(linker)，优选地，所述连接子序列为poly(a)序列。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述poly(a)序列的长度为1-50、1-40、1-30、1-20，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个核苷酸。

9.根据权利要求1-8任一所述的方法，其中所述荧光染料选自香豆素类(coumarindyes)、荧光素类(fluorescein dyes)、罗丹明类(rhodamine dyes)、碳花青类(cyaninedyes)、新型染料tide flour(tf)或其组合，优选地，所述荧光染料为fam、cy3、cy5、cy7、af488或af647。

10.根据权利要求1-9任一所述的方法，其中所述激...

【专利技术属性】
技术研发人员：张迅，张伯伦，孙若为，陈传品，朱曲波，
申请(专利权)人：湖南早晨纳米机器人有限公司，
类型：发明
国别省市：