一种蒙古冰草的遗传转化方法技术

本发明专利技术提供了一种蒙古冰草的遗传转化方法，包括如下步骤：步骤一、对蒙古冰草的外植体进行诱导形成愈伤组织，将愈伤组织进行继代和分化培养，获得转化受体；步骤二、对步骤一获得的转化受体用农杆菌侵染液进行一次侵染；步骤三、对步骤二侵染后的转化受体进行暗培养筛选，筛选后采用农杆菌侵染液进行二次侵染；步骤四、对完成侵染的转化受体进行共培养，确定侵染效果。本申请设计并成功建立了蒙古冰草的遗传转化体系，将易侵染基因型蒙古冰草的侵染效率由不足5％提高到80％以上，并且在暗培养筛选2个月后，转入的目的基因仍能稳定的在蒙古冰草愈伤组织中表达，为蒙古冰草的分子育种研发提供了新方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及植物基因工程，尤其涉及一种蒙古冰草的遗传转化方法。

技术介绍

1、蒙古冰草(agropyron mongolicum)属于禾本科(poaceae)小麦族(triticeae)冰草属(agropyron)植物，具有抗寒、抗旱、耐盐、耐风沙等特性，营养价值和生态价值较高，是改良天然草场及建立人工草地的适宜草种。

2、目前，由于缺少蒙古冰草遗传转化体系，有关蒙古冰草的研究主要集中在外植体的再生诱导、将基因克隆出来后在其他植物中进行异源表达等方面，在分子育种方面的研究比较滞后，因此，如何建立蒙古冰草高效且稳定的遗传转化体系显得尤为重要。

技术实现思路

1、为了解决上述问题，本专利技术旨在提供一种蒙古冰草的遗传转化方法，包括如下步骤：

2、步骤一、对蒙古冰草的外植体进行诱导形成愈伤组织，将所述愈伤组织进行继代和分化培养，获得转化受体；

3、步骤二、对步骤一获得的转化受体用农杆菌侵染液进行一次侵染；

4、步骤三、对步骤二侵染后的转化受体进行暗培养筛选，筛选后采本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种蒙古冰草的遗传转化方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤一中，蒙古冰草的外植体选自种子、根、茎、叶、花中的一种或多种，优选种子。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤二中一次侵染，和/或所述步骤三中二次侵染的方法包括：将转化受体置于农杆菌侵染液中，于0.05～0.5MPa条件下抽真空5～20min，20kHz～30kHz条件下超声振荡3～10min，再于0.05～0.5MPa条件下抽真空5～20min。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述农杆菌为根癌农杆菌或发根农杆菌；...

【技术特征摘要】

1.一种蒙古冰草的遗传转化方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤一中，蒙古冰草的外植体选自种子、根、茎、叶、花中的一种或多种，优选种子。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤二中一次侵染，和/或所述步骤三中二次侵染的方法包括：将转化受体置于农杆菌侵染液中，于0.05～0.5mpa条件下抽真空5～20min，20khz～30khz条件下超声振荡3～10min，再于0.05～0.5mpa条件下抽真空5～20min。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述农杆菌为根癌农杆菌或发根农杆菌；

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤三中暗培养的条件为：将一次侵染后的转化受体置于筛选培养基上，于22℃～26℃、黑...

【专利技术属性】
技术研发人员：付春祥，赵彦，赵海霞，姜希萍，吴振映，李宇琛，杜锦瑜，邱锐，曹英萍，
申请(专利权)人：中国科学院青岛生物能源与过程研究所，
类型：发明
国别省市：