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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种pfu dna聚合酶抗体r9c8及其应用,属于pfu dna聚合酶。
技术介绍
1、聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,pcr)是体外酶促合成特异dna片段的一种方法,为最常用的分子生物学技术之一。典型的pcr由(1)高温变性模板;(2)引物与模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反应组成一个循环,通过多次循环反应,使目的dna得以迅速扩增。它具有特异性强、灵敏℃高、快速、简便及重复性好等特点,是分子生物学研究最基础、最重要的工具之一。
2、pfu dna聚合酶(简称,pfu酶)是科学家从激烈火球菌(pyrococcus furiosus,pfu)分离出的一种dna聚合酶,该酶分子量为90kda,具有出色的热稳定性。同时该酶具有5’-3’聚合酶活性和3’-5’外切酶活性,而3’-5’外切酶活性的主要功能是校正作用,这让pfu酶拥有极高的保真性。由于高保真性和高稳定性让pfu酶成为最广泛应用的dna聚合酶之一。
3、在pcr的过程中,pfu酶通常与其他dna聚合酶一样,在低温条件下,仍然具有一定聚合酶活性,从而产生非特异性扩增以及形成引物二聚体。目前可以通过很多途径以达到热启动的目的,如对酶进行基因突变、物理隔绝、化学修饰、核酸引物修饰等。但是这些方法均有不利的因素,如酶活封闭不完全、影响pcr的复杂性、影响酶的续进性、忠实性或方法比较繁琐等。
4、针对上述中的相关技术的缺点,采用单克隆抗体修饰pfu酶是一种相对更好的方法。pfu酶抗体是热启动pcr
技术实现思路
1、本专利技术提供了一种pfu dna聚合酶抗体r9c8及其应用,可以有效解决上述问题
2、本专利技术是这样实现的:
3、一种pfu dna聚合酶单克隆抗体r9c8,其重链可变区序列如seq id no:7所示;其轻链可变区序列如seq id no:8所示。
4、在一些实施例中,所述的pfu dna聚合酶单克隆抗体r9c8的重链可变区序列的cdr1序列如seq id no:1所示,cdr2序列如seq id no:2所示,cdr3序列如seq id no:3所示。
5、在一些实施例中,所述的pfu dna聚合酶单克隆抗体r9c8的轻链可变区序列的cdr1序列如seq id no:4所示,cdr2序列如seq id no:5所示,cdr3序列如seq id no:6所示。
6、在一些实施例中,所述的pfu dna聚合酶单克隆抗体r9c8的重链序列如seq idno:9所示。
7、在一些实施例中,所述的pfu dna聚合酶单克隆抗体r9c8的轻链序列如seq idno:10所示。
8、一种降低pfu dna聚合酶非特异性扩增的方法,应用上述的pfu dna聚合酶单克隆抗体r9c8。
9、一种细胞,其产生上述的单克隆抗体r9c8。
10、本专利技术的有益效果是:
11、本专利技术的r9c8抗体能在65℃封闭pfu dna聚合酶5’-3’聚合酶活性,且封闭效率均95%以上。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种Pfu DNA聚合酶单克隆抗体R9C8,其特征在于,其重链可变区序列如SEQ ID NO:7所示;其轻链可变区序列如SEQ ID NO:8所示。
2.根据权利要求1所述的Pfu DNA聚合酶单克隆抗体R9C8,其特征在于,其重链可变区序列的CDR1序列如SEQ ID NO:1所示,CDR2序列如SEQ ID NO:2所示,CDR3序列如SEQ IDNO:3所示。
3.根据权利要求1所述的Pfu DNA聚合酶单克隆抗体R9C8,其特征在于,其轻链可变区序列的CDR1序列如SEQ ID NO:4所示,CDR2序列如SEQ ID NO:5所示,CDR3序列如SEQ IDNO:6所示。
4.根据权利要求1所述的Pfu DNA聚合酶单克隆抗体R9C8,其特征在于,其重链序列如SEQ ID NO:9所示。
5.根据权利要求1所述的Pfu DNA聚合酶单克隆抗体R9C8,其特征在于,其轻链序列如SEQ ID NO:10所示。
6.一种降低Pfu DNA聚合酶非特异性扩增的方法,其特征在于,应用权利要求1至5任一项所述的Pfu
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述的Pfu DNA聚合酶单克隆抗体R9C8与Pfu DNA聚合酶的质量比为1.5-2.5:1。
8.一种细胞,其特征在于,其产生权利要求1至5任一项所述的单克隆抗体R9C8。
...【技术特征摘要】
1.一种pfu dna聚合酶单克隆抗体r9c8,其特征在于,其重链可变区序列如seq id no:7所示;其轻链可变区序列如seq id no:8所示。
2.根据权利要求1所述的pfu dna聚合酶单克隆抗体r9c8,其特征在于,其重链可变区序列的cdr1序列如seq id no:1所示,cdr2序列如seq id no:2所示,cdr3序列如seq idno:3所示。
3.根据权利要求1所述的pfu dna聚合酶单克隆抗体r9c8,其特征在于,其轻链可变区序列的cdr1序列如seq id no:4所示,cdr2序列如seq id no:5所示,cdr3序列如seq idno:6所示。
4.根...
【专利技术属性】
技术研发人员:杨萍萍,江荣成,李萌萌,邓海霞,杨志伟,江溪成,范进华,陈易超,章永垒,
申请(专利权)人:厦门康基生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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