【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物，尤其涉及抗体类，例如单抗类，fc融合蛋白类，双抗类和重组类蛋白纯化工艺中的病毒灭活。
技术介绍
1、对于蛋白类药物制品生产工艺过程，ich、fda以及cde的相关指导原则中要求对生产工艺的病毒灭活和/或清除能力开展验证研究并要求生产工艺中应包含两种机制上互补且有效的病毒灭活和/或清除工艺，以达到去除潜在的没有感染能力的内源逆转录病毒样颗粒以及具有感染力的外源病毒颗粒。
2、在抗体下游生产工艺操作单元中，具有病毒灭活和/或清除能力的步骤主要包括亲和捕获层析、病毒灭活、阴离子交换层析和病毒过滤等。其中病毒灭活因为能够稳定地使病毒的对数下降值(log reduction value，lrv)达到4-6log10而成为工艺中病毒去除的关键步骤。
3、病毒灭活对包膜病毒有极强的灭活作用，主要是通过低ph孵育，有机溶剂孵育和化学试剂灭活等策略。低ph孵育通常是将蛋白溶液的ph调节到低于3.9从而破坏病毒包膜上的蛋白结构、膜结构和衣壳结构，达到去除病毒传染的能力。而有机溶剂灭活(s/d灭活法)是通过溶解病毒脂包膜使得其核酸颗粒暴露于试剂中，病毒失去脂包膜后不能与细胞表面结合或进入细胞，从而失去感染能力。
4、目前低ph孵育和有机溶剂孵育这种两种策略被广泛应用在具有很好耐受性的单抗上。然而，对于敏感型的蛋白，在采用低ph病毒和有机溶剂病毒灭活孵育策略的同时，会使得蛋白产生多聚体甚至失去活性，目前针对这类蛋白，没有很好的病毒灭活策略。而大多数保护剂在保护蛋白的时候，有可能使得脂蛋白包被的病毒
技术实现思路
1、为了解决上述技术问题，本申请的一个方面提供了一种敏感型蛋白的病毒灭活方法，所述方法包括将保护剂加入蛋白制剂，并且所述保护剂包括氨基酸类、表面活性剂类、盐类、聚合物类、糖类和/或有机物类保护剂。
2、本申请的另一个方面提供了氨基酸类、表面活性剂类、盐类、聚合物类、糖类和/或有机物类保护剂在用于敏感型蛋白病毒灭活中的用途。
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1.一种敏感型蛋白的病毒灭活方法，所述方法包括将保护剂加入蛋白制剂后进行病毒灭活，所述保护剂包括氨基酸类、表面活性剂类、盐类、聚合物类、糖类和/或有机物类保护剂。
2.氨基酸类、表面活性剂类、盐类、聚合物类、糖类和/或有机物类保护剂在用于敏感型蛋白病毒灭活中的用途。
3.如权利要求1所述的病毒灭活方法或权利要求2所述的用途，其中所述病毒灭活包括低pH孵育，优选地，所述低pH孵育的pH为3.0-4.5，优选3.5-4.0，更优选3.5-3.6；并且所述敏感型蛋白对低pH孵育敏感。
4.如权利要求1所述的病毒灭活方法或权利要求2所述的用途，其中所述病毒灭活包括有机溶剂孵育，所述有机溶剂优选地包括磷酸三丁酯，所述有机溶剂任选地还包括去污剂，优选非离子型去污剂，更优选聚山梨酯80；并且所述敏感型蛋白对有机溶剂孵育敏感。
5.如权利要求1所述的病毒灭活方法或权利要求2所述的用途，其中所述敏感型蛋白包括抗体类蛋白，例如单抗类蛋白，双抗类蛋白，重组类蛋白和/或融合蛋白。
6.如权利要求1所述的病毒灭活方法或权利要求2所述的用途，其中所
7.如权利要求6所述的病毒灭活方法或用途，其中所述氨基酸类保护剂的浓度在1mM-3M，优选10mM-1.5M的范围内，例如，甘氨酸的浓度在1mM～3M，优选10mM～1.5M的范围内，又例如，精氨酸的浓度在1mM～1M，优选10mM～0.5M的范围内；
8.如权利要求1所述的病毒灭活方法，所述加入保护剂包括用含有保护剂的溶液洗脱蛋白获得蛋白制剂、向蛋白制剂中加入保护剂粉末或向蛋白制剂中加入保护剂溶液，所述加入保护剂的步骤使得蛋白处于含有保护剂的病毒灭活溶液中。
9.如权利要求1所述的病毒灭活方法或权利要求2所述的用途，其中所述病毒包括包膜病毒。
10.如权利要求1所述的病毒灭活方法或权利要求2所述的用途，其中所述病毒灭活使病毒的对数下降值≥2Log10。
...【技术特征摘要】
1.一种敏感型蛋白的病毒灭活方法，所述方法包括将保护剂加入蛋白制剂后进行病毒灭活，所述保护剂包括氨基酸类、表面活性剂类、盐类、聚合物类、糖类和/或有机物类保护剂。
2.氨基酸类、表面活性剂类、盐类、聚合物类、糖类和/或有机物类保护剂在用于敏感型蛋白病毒灭活中的用途。
3.如权利要求1所述的病毒灭活方法或权利要求2所述的用途，其中所述病毒灭活包括低ph孵育，优选地，所述低ph孵育的ph为3.0-4.5，优选3.5-4.0，更优选3.5-3.6；并且所述敏感型蛋白对低ph孵育敏感。
4.如权利要求1所述的病毒灭活方法或权利要求2所述的用途，其中所述病毒灭活包括有机溶剂孵育，所述有机溶剂优选地包括磷酸三丁酯，所述有机溶剂任选地还包括去污剂，优选非离子型去污剂，更优选聚山梨酯80；并且所述敏感型蛋白对有机溶剂孵育敏感。
5.如权利要求1所述的病毒灭活方法或权利要求2所述的用途，其中所述敏感型蛋白包括抗体类蛋白，例如单抗类蛋白，双抗...
【专利技术属性】
技术研发人员：林森珠，王硕，戴梦迪，朱嘉诚，杨芳，汪景长，
申请(专利权)人：上海药明生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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