一种酶催化工艺合成LNT II的中控检测方法技术

技术编号:40821679 阅读:34 留言:0更新日期:2024-04-01 14:41
本发明专利技术属于化学分析领域,尤其涉及一种酶催化工艺合成LNT II的中控检测方法,包括以下过程:在酶催化合成LNTⅡ的中间体和/或终产物的过程中,对灭活和除蛋白后的反应液进行HPLC‑UV‑RI检测,并对检测结果进行定量分析;所述HPLC‑UV‑RI检测的色谱条件为:聚合物基质的HILIC柱,柱温为50~60℃,流动相A为乙腈,流动相B为磷酸氢二钾水溶液,磷酸氢二钾水溶液的浓度为40~60mmol/L、pH值为6.5~7.5,流动相A与流动相B的体积比为(65~75):(35~25)。本发明专利技术提供的方法可以对酶催化工艺合成LNT II过程中反应液中的底物、中间体、终产物等进行有效分离和准确定量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于化学分析领域,尤其涉及一种酶催化工艺合成lnt ii的中控检测方法。


技术介绍

1、人乳寡糖(humanmilk oligosaccharides,hmos)是人乳中一类结构复杂、非消化性的碳水化合物。人乳寡糖(hmos)作为母乳中仅次于乳糖和脂肪的第三大固体成分,是母乳中重要的活性因子,在婴儿的生长发育过程中发挥着特殊的作用,对新生儿的生长、发育及健康状况有重要影响,被应用于婴幼儿配方食品,为婴儿提供了普通奶粉无法提供的独特健康益处,在婴儿配方奶粉中添加hmo已成为高端配方奶粉行业的重要趋势。

2、hmos种类多样,主要包括乳糖-n-新四糖、乳糖-n-四糖、3-岩藻糖基乳糖、2’-岩藻糖基乳糖、6’-唾液酸乳糖和3’-唾液酸乳糖等,乳糖-n-三糖ii(lnt ii)是hmo中的一个重要核心结构单元,可作为前体生产乳糖-n-新四糖(lnnt)和乳糖-n-四糖(lnt)。传统上,lntii是通过化学方法合成的,该方法需要激活、保护和去保护等多个步骤来实现糖苷键合成的立体选择性和区域选择性控制。相比之下,酶催化法由于其温和的水环境和对本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种酶催化合成LNTⅡ的中控检测方法,其特征在于,包括以下过程:

2.根据权利要求1所述的中控检测方法,其特征在于,所述酶催化合成LNTⅡ的具体合成路线为:

3.根据权利要求1所述的中控检测方法,其特征在于,进行所述HPLC-UV-RI检测的过程中,测定的物质包括乙酰氨基葡萄糖、乳糖、乙酰氨基葡萄糖-1-磷酸、三磷酸腺苷、单磷酸腺苷、二磷酸腺苷、三磷酸尿苷、二磷酸尿苷、单磷酸尿苷、尿苷5’-二磷酸-N-乙酰氨基葡糖和乳糖-N-三糖II中的一种或多种。

4.根据权利要求1所述的中控检测方法,其特征在于,所述柱温为55℃。

<p>5.根据权利要求...

【技术特征摘要】

1.一种酶催化合成lntⅱ的中控检测方法,其特征在于,包括以下过程:

2.根据权利要求1所述的中控检测方法,其特征在于,所述酶催化合成lntⅱ的具体合成路线为:

3.根据权利要求1所述的中控检测方法,其特征在于,进行所述hplc-uv-ri检测的过程中,测定的物质包括乙酰氨基葡萄糖、乳糖、乙酰氨基葡萄糖-1-磷酸、三磷酸腺苷、单磷酸腺苷、二磷酸腺苷、三磷酸尿苷、二磷酸尿苷、单磷酸尿苷、尿苷5’-二磷酸-n-乙酰氨基葡糖和乳糖-n-三糖ii中的一种或多种。

4.根据权利要求1所述的中控检测方法,其特征在于,所述柱温为55℃。

5.根据权利要求1所述的中控检测方法,其特征在于,所述磷酸氢二钾水溶液的浓度为50mmol/l,所述磷酸氢二钾水溶液的p...

【专利技术属性】
技术研发人员:李冰心周必海焦茂清于铁妹潘俊锋刘建
申请(专利权)人:深圳瑞德林生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:

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