一种PC12细胞PD模型的构建方法技术

本发明专利技术涉及细胞生物学和药理学的技术领域，公开了一种PC12细胞PD模型的构建方法，包括S1、细胞培养；S2、PC12细胞造模建立；S3、PD模型数据检测；S4、蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)。本发明专利技术创新点在于将淫羊藿素引入对PD的干预研究，探讨淫羊藿素对6‑OHDA诱导的PC12细胞PD模型的作用及可能机制，以期为神经退行性疾病的防治提供新的思路。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及细胞生物学和药理学的，具体涉及一种pc12细胞pd模型的构建方法。

技术介绍

1、淫羊藿(herba epimedii)系小檗科淫羊藿属(epimedium)植物，具有补肾壮阳、祛风除湿等功效。现代药理研究证明，淫羊藿含有特殊的化学成分和显著的生物活性，是一种具有广泛药理活性的中药材。淫羊藿中黄酮醇类化合物具有治疗心脑血管疾病、防治骨质疏松等药理活性。淫羊藿素是淫羊藿中主要有效成分淫羊藿苷的苷元，既为淫羊藿苷的体内代谢产物，也均少量存在于淫羊藿药材中，属黄酮醇类化合物，化学结构式如下：

2、

3、淫羊藿素r＝ch3，r1＝r2＝h

4、其制备过程为：淫羊藿苷超声溶解在尽可能少的甲醇中，边搅拌边缓慢加入含纤维素酶的缓冲液，37℃反应过夜。使淫羊藿苷结构上的葡萄糖和鼠李糖被充分水解，乙酸乙酯萃取水解产物，旋转蒸发仪挥干即得淫羊藿素。到目前为止，有关淫羊藿素的药理活性研究报道较少。

5、本研究室对淫羊藿苷及其代谢产物的相关药理活性研究发现，淫羊藿素能显著促进人乳腺癌mcf-7细胞的增殖，具有雌激素样作本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种PC12细胞PD模型的构建方法，其特征在于，包括S1、细胞培养：选取对数生长期的PC12细胞放置在培养瓶内，经细胞培养处理后得到细胞悬液，将细胞悬液分为3份悬液组，将3份悬液组分别接种至新的细胞培养瓶，轻微晃动细胞培养瓶3-5次后，放置于CO2含5％的恒温培养箱培养，得到3份PC12细胞悬液；

2.根据权利要求1所述的一种PC12细胞PD模型的构建方法，其特征在于：在步骤S1细胞培养中细胞培养处理包括以下步骤：

3.根据权利要求1所述的一种PC12细胞PD模型的构建方法，其特征在于：在步骤S1-1中PC12细胞的细胞密度达到70％以上。

4.根...

【技术特征摘要】

1.一种pc12细胞pd模型的构建方法，其特征在于，包括s1、细胞培养：选取对数生长期的pc12细胞放置在培养瓶内，经细胞培养处理后得到细胞悬液，将细胞悬液分为3份悬液组，将3份悬液组分别接种至新的细胞培养瓶，轻微晃动细胞培养瓶3-5次后，放置于co2含5％的恒温培养箱培养，得到3份pc12细胞悬液；

2.根据权利要求1所述的一种pc12细胞pd模型的构建方法，其特征在于：在步骤s1细胞培养中细胞培养处理包括以下步骤：

3.根据权利要求1所述的一种pc12细胞pd模型的构建方法，其特征在于：在步骤s1-1中pc12细胞的细胞密度达到70％以上。

4.根据权利要求3所述的一种pc12细胞pd模型的构建方法，其特征在于：在步骤s1-4中离心处理为细胞悬液移入5ml离心管内，在室温下离心转速为1500rpm，时间为5min。

5.根据权利要求1所述的一种pc12细胞pd模型的构建方法，其特征在于：在步骤s2-1中6-ohda的摩尔质量为50μmol。

6.根据权利要求1所述的一种pc12细胞pd模型的构建方法，其特征在于：在步骤s3中mtt检测处理包括以下步骤：

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【专利技术属性】
技术研发人员：巴智胜，
申请(专利权)人：遵义市第一人民医院遵义医学院第三附属医院，
类型：发明
国别省市：