重组溶瘤痘苗病毒及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种重组痘苗病毒、其在制备治疗人类癌症的药物中的应用以及包含该病毒的药物组合物。所述重组痘苗病毒通过在Lister痘苗病毒毒株的胸苷激酶(TK)基因中插入TGF‑βRII基因片段、并在痘苗病毒生长因子(VGF)基因中插入GM‑CSF基因而获得，其中，所述插入使得所述胸苷激酶(TK)基因和所述痘苗病毒生长因子(VGF)基因均失活，且所述TGF‑βRII基因片段包含编码TGF‑βRII的TGF‑β结合结构域的序列。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及溶瘤病毒及其在治疗癌症中的应用，更具体而言，涉及一种经遗传改造的重组痘苗病毒及其在治疗癌症中的应用。

技术介绍

1、溶瘤病毒(oncolytic virus)是一类能够在肿瘤细胞中选择性地增殖而在正常细胞中相对无增殖的病毒，这种选择性增殖能够导致肿瘤细胞的生长减缓或死亡。

2、痘苗病毒(vaccinia virus)属于痘病毒属(poxvirus)，是一种双链dna病毒，基因组为180-200kb，曾一直被用作预防天花的疫苗，后发现痘苗病毒对肿瘤细胞具有强趋向性，表现出溶瘤病毒的作用。还发现痘苗病毒能够携带大量外源dna序列，因此常常被用作遗传工程的工具载体。

3、痘苗病毒基因组含有病毒胸苷激酶(tk)基因。正常细胞自身的tk表达较低，痘苗病毒在感染正常细胞后，其dna的复制依赖于其病毒胸苷激酶(tk)活性来提供足够浓度的核苷酸；但是在快速增殖的肿瘤细胞中，肿瘤细胞本身表达高水平的tk，使得痘苗病毒dna的复制不再依赖于其自身的病毒tk。因此，在大多数正常细胞中，痘苗病毒的tk基因的缺失大大降低了其复制能力，从而导致病本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种重组痘苗病毒，其通过在Lister痘苗病毒毒株的胸苷激酶(TK)基因中插入TGF-βRII基因片段、并在痘苗病毒生长因子(VGF)基因中插入GM-CSF基因而获得，

2.如权利要求1所述的重组痘苗病毒，其中，所述TGF-βRII基因片段通过CRISPR-Cas9技术插入所述胸苷激酶(TK)基因中，并且其中使用的gRNA的序列选自SEQ ID No:1、SEQ IDNo:2和SEQ ID No:3，优选为SEQ ID No:1。

3.如权利要求1所述的重组痘苗病毒，其中，所述TGF-βRII基因片段的序列是SEQ IDNo:4或者是编码SEQ ID No:1...

【技术特征摘要】

1.一种重组痘苗病毒，其通过在lister痘苗病毒毒株的胸苷激酶(tk)基因中插入tgf-βrii基因片段、并在痘苗病毒生长因子(vgf)基因中插入gm-csf基因而获得，

2.如权利要求1所述的重组痘苗病毒，其中，所述tgf-βrii基因片段通过crispr-cas9技术插入所述胸苷激酶(tk)基因中，并且其中使用的grna的序列选自seq id no:1、seq idno:2和seq id no:3，优选为seq id no:1。

3.如权利要求1所述的重组痘苗病毒，其中，所述tgf-βrii基因片段的序列是seq idno:4或者是编码seq id no:10的核酸序列。

4.如权利要求1所述的重组痘苗病毒，其中，所述lister痘苗病毒毒株的基因组序列如genbank kx061501.1所示。

5.如权利要求1所述的重组痘苗病毒，其中，所述重组痘苗病毒通过在于2022年9月14日保藏于中国典型培养物保藏中心、保藏号为cctcc no:v202270的病毒的痘苗病毒生长因子(vgf)基因中插入gm-csf基因而获得。

6.如权利要求1所述的重组痘苗病毒，其中，所述重组痘苗病毒于2023年6月26日保藏于中国典型...

【专利技术属性】
技术研发人员：林凡佳，程欣，张妍，段清，孙菁，韩佳迪，单艺玮，乔雪涵，左帅，方运玲，
申请(专利权)人：东曜药业有限公司，
类型：发明
国别省市：