一种引物探针组合物、幽门螺旋杆菌及其耐药基因检测试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，具体涉及一种引物探针组合物、幽门螺旋杆菌及其耐药基因检测试剂盒及其应用，包括检测gyrA基因260T、261G、261A、271T、271A、272G突变位点的引物探针序列；检测23S rRNA基因A2142G、A2142C、A2143G突变位点的引物探针序列；检测幽门螺旋杆菌16S rRNA基因的引物探针；检测RPPH1内标的引物探针序列，与上述引物探针相匹配的PCR启动试剂，阴性对照和阳性对照。本发明专利技术试剂盒通过设置预混的PCR扩增体系实现了一管检测所述所有突变位点、幽门螺旋杆菌、内标，检测特异性强，灵敏度高达400copies/ml；并且兼容胃粘膜组织样本和粪便样本的检测，实现了胃粘膜样本检测无需核酸提取，简化了操作流程，提供了一种新的能快速且高效地检测幽门螺旋杆菌及其耐药基因的途径。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，尤其涉及一种引物探针组合物、幽门螺旋杆菌及其耐药基因检测试剂盒及其应用。

技术介绍

1、幽门螺旋杆菌(helicobacter pylori，h.pylori)，简称hp，是一种微需氧条件下生长的革兰氏阴性致病菌，从儿童至成人，普遍易感。hp感染与多种胃肠道内外疾病相关，包括消化性溃疡、慢性胃炎、胃malt淋巴瘤和胃腺癌等多种胃肠道疾病等等，且感染幽门螺旋杆菌会显著增加胃腺癌的发生几率，根除幽门螺旋杆菌已被证实可降低胃癌的发生率。

2、目前，根除幽门螺旋杆菌的方案主要包括质子泵抑制剂(ppi)和胃黏膜保护剂，并联合一种或两种抗生素，可实现三联或者四联疗法。用于根除幽门螺旋杆菌的抗生素包括大环内酯类(例如克拉霉素)、硝基咪唑类(例如甲硝唑)、β-内酰胺类(例如阿莫西林)、喹诺酮类(例如左氧氟沙星)、四环素类等。近年来，随着对幽门螺旋杆菌的根除治疗，在我国及世界不少地区，耐药形势已经非常严峻，相关研究报道显示，目前最常见的耐药性包括了克拉霉素、甲硝唑和喹诺酮类，从初次接受根除治疗的患者体内分离出来的幽门螺旋杆菌对甲硝唑的耐药率约本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种引物探针组合物，其特征在于，所述引物探针组合物包括用于检测幽门螺旋杆菌16S rRNA基因、幽门螺旋杆菌gyrA基因突变位点260T、261G、261A、271T、271A、272G以及幽门螺旋杆菌23S rRNA基因突变位点A2142G、A2142C、A2143G的特异性引物对和/或特异性探针，包括：

2.一种幽门螺旋杆菌及其耐药基因检测试剂盒，其特征在于：包括权利要求1所述的引物探针组合物，还包括用于对人基因组DNA内标进行检测的特异性引物对和/或特异性探针；优选地，所述人基因组DNA内标为RPPH1。

3.如权利要求2所述的一种幽门螺旋杆菌及其耐药基...

【技术特征摘要】

1.一种引物探针组合物，其特征在于，所述引物探针组合物包括用于检测幽门螺旋杆菌16s rrna基因、幽门螺旋杆菌gyra基因突变位点260t、261g、261a、271t、271a、272g以及幽门螺旋杆菌23s rrna基因突变位点a2142g、a2142c、a2143g的特异性引物对和/或特异性探针，包括：

2.一种幽门螺旋杆菌及其耐药基因检测试剂盒，其特征在于：包括权利要求1所述的引物探针组合物，还包括用于对人基因组dna内标进行检测的特异性引物对和/或特异性探针；优选地，所述人基因组dna内标为rpph1。

3.如权利要求2所述的一种幽门螺旋杆菌及其耐药基因检测试剂盒，其特征在于：检测所述rpph1的特异性引物包括核苷酸序列如seq id no：18所示的上游引物和核苷酸序列如seq id no：19所示的下游引物，所述特异性探针的核苷酸序列如seq id no：20所示。

4.如权利要求2～3任意一项所述的一种幽门螺旋杆菌及其耐药基因检测试剂盒，其特征在于：所述引物探针组合物中的特异性探针和/或检测人基因组dna内标的特异性探针的5’端和3’端分别连接有荧光报告基团和荧光淬灭基团；优选地，所述荧光报告基团选自fam、texas red、vic、cy5荧光染料中的任意一种；优选地，所述荧光淬灭基团选用bhq1或bhq3荧光染料中的任意一种。

5.如权利要求2所述的一种幽门螺旋杆菌及其耐药...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓波，范亮波，石欣，姚甜甜，李红东，张明鑫，崔曼莉，路宁，温华，李杰，
申请(专利权)人：西安天隆科技有限公司，
类型：发明
国别省市：