一种高效降解2,4,6-三氯苯酚的菌株及其构建方法技术

本发明专利技术公开了一种高效降解2,4,6‑三氯苯酚的菌株及其构建方法。本发明专利技术公开的菌株是是以钩虫贪铜菌JMP134(Cupriavidus necator JMP134)为出发菌株，将外源TcpA基因、TcpC基因以及TcpD基因整合在phaC基因之前，得到JMP134‑1菌株；在JMP134‑1菌株中过表达来源于其自身的PcaI基因、PcaJ基因和PcaF基因，得到JMP134‑2菌株。与出发菌株JMP134相比，改造后的工程菌株JMP134‑2，在含有2,4,6‑三氯苯酚作为唯一碳源的MM培养基上OD600可以达到0.63，提高了1.625倍，并且2,4,6‑TCP的降解能力是其2.19倍。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程，涉及一种高效降解2,4,6-三氯苯酚的菌株及其构建方法。

技术介绍

1、2,4,6-三氯苯酚(2,4,6-tcp)是一种难溶于水、易溶于有机溶剂的氯代有机污染物，通常用于木材、纺织品以及皮革中作为防腐剂。tcp是一种被美国环境保护署(epa)列为优先污染物的有害物质。由于tcp自1950年代以来被用作木材、皮革和胶水防腐剂，因此tcp广泛存在于环境中。tcp通过饮用水、食物或受污染的空气被人体吸收，对人体产生毒害作用，例如咳嗽、慢性支气管炎、胸部喘息、肺功能改变和肺部病变等。动物研究表明，长期暴露于10,000μg/l tcp的环境下的小鼠诱发淋巴瘤和白血病。因此，发掘能够降解tcp的微生物对解决tcp带来的环境污染的问题至关重要。

2、钩虫贪铜菌(cupriavidus necator)jmp134是一种革兰氏阴性细菌，其基因组已被测序。它是从澳大利亚土壤中分离出来的，能够消耗tcp作为唯一的能源和碳源，c.necator jmp134中tcp降解途径已经被研究清楚。但是其降解tcp的能力还有待进一步加强。因此，通过代本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种降解2,4,6-三氯苯酚的菌株的构建方法，其是以钩虫贪铜菌JMP134(Cupriavidus necator JMP134)为出发菌株，将来源于格氏伯克霍尔德菌(Caballeroniaglathei)的TcpA基因、来源于约氏红球菌(Rhodococcus jostii)的TcpC基因以及来源于小红白毛杯菌(Lachnellula occidentalis)的TcpD基因，整合在phaC基因之前，得到JMP134-1菌株；在JMP134-1菌株中过表达来源于其自身的PcaI基因、PcaJ基因和PcaF基因，得到JMP134-2菌株。

2.根据权利要求1所述的方法，...

【技术特征摘要】

1.一种降解2,4,6-三氯苯酚的菌株的构建方法，其是以钩虫贪铜菌jmp134(cupriavidus necator jmp134)为出发菌株，将来源于格氏伯克霍尔德菌(caballeroniaglathei)的tcpa基因、来源于约氏红球菌(rhodococcus jostii)的tcpc基因以及来源于小红白毛杯菌(lachnellula occidentalis)的tcpd基因，整合在phac基因之前，得到jmp134-1菌株；在jmp134-1菌株中过表达来源于其自身的pcai基因、pcaj基因和pcaf基因，得到jmp134-2菌株。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述tcpa基因的序列如seq id no:7中第1位至第1554位所示，其编码的3,5,6-三氯-2-吡啶醇单加氧酶的氨基酸序列如seq id no:8所示。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述tcpc基因的序列如seq id no:7中第1568位至第2416位所示，其编码的6-氯羟基喹啉-1,2-双加氧酶的氨基酸序列如seq idno:9所示。

4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于：所述tcpd基因的...

【专利技术属性】
技术研发人员：王嘉，王竞辉，岑祥许，
申请(专利权)人：万华化学四川有限公司，
类型：发明
国别省市：