【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及分子生物基因检测，具体地，涉及一种基于crispr的猴痘病毒检测用探针组、试剂、试剂盒和试纸条。
技术介绍
1、猴痘(monkeypox，mpx)是由猴痘病毒(monkeypox virus，mpxv)引起的一种病毒性人畜共患病，症状表现类似于天花。mpx在人群和野生动物中具有较高的感染率，对人类公共卫生安全造成重大威胁。mpxv与天花病毒、牛痘病毒属于痘病毒科(poxviridae)正痘病毒属(orthopoxvirus)，可在脊椎动物或无脊椎动物细胞的细胞质中复制。mpxv是一种有包膜的线性双链dna病毒，很可能在宿主细胞质中复制形态独特的胞内成熟病毒(imv)和胞外包膜病毒(eev)。imv具有坚固的物理结构，便于在宿主之间传播，而更脆弱的eev被包膜包裹，限制宿主免疫清除，因此适合病毒在细胞间传播。mpxv能有效地感染人原代单核细胞，通过抑制cd4+和cd8+t细胞活化，消除局部t细胞反应，避免全身免疫抑制及免疫监测。
2、目前市面上针对猴痘病毒的检测方法主要为分子和免疫类的方法，利用pcr、qpcr、elisa等技术来进行诊断。该方法不仅成本高、耗时长、流程复杂且需要复杂的引物和探针，反应试剂也需要冷链运输和保存，不便于日常快检。
技术实现思路
1、针对上述现有技术，本专利技术的目的在于针对目前对于猴痘的检测方式一般成本较高、耗时较长，且流程复杂，无法满足日常快检的需求等问题，从而提供一种检测流程简单方便，成本较低，且检测灵敏度高，检测特异性好的
2、为了实现上述目的，本专利技术提供了一种基于crispr的猴痘病毒检测用探针组，所述基于crispr的猴痘病毒检测用探针组包括序列如seq id no:1所示的第一探针，以及序列如seq id no:2所示的第二探针。
3、本专利技术还提供了一种基于crispr的猴痘病毒检测用试剂，所述基于crispr的猴痘病毒检测用试剂包括如上所述的基于crispr的猴痘病毒检测用探针组，以及cas13a核酸酶和可视化显色报告分子。
4、优选地，所述可视化显色报告分子的两端修饰有能够特异性结合对应抗体的修饰基团。
5、优选地，所述可视化显色报告分子的5’端修饰有6-fam基团，3’端修饰有生物素基团。
6、本专利技术还提供了一种基于crispr的猴痘病毒检测用试剂盒，所述基于crispr的猴痘病毒检测用试剂盒包括如上所述的基于crispr的猴痘病毒检测用试剂，用于对所述基于crispr的猴痘病毒检测用探针组进行转录的转录体系，以及用于对待测样本进行扩增的扩增体系。
7、优选地，所述扩增体系至少包括一组扩增引物对；其中，
8、一组所述扩增引物对包括序列如seq id no:3所示的第一引物，以及序列如seqid no:4所示的第二引物。
9、优选地，所述基于crispr的猴痘病毒检测用试剂盒针对的靶基因为猴痘病毒f3l基因。
10、优选地，所述猴痘病毒f3l基因的序列如seq id no:5所示。
11、本专利技术还提供了一种检测用试纸条，所述检测用试纸条用于上述所述的基于crispr的猴痘病毒检测用试剂盒，所述试纸条上包被有能够特异性结合所述可视化显色报告分子的特异性抗体。
12、通过上述技术方案，本专利技术提供的基于crispr的猴痘病毒检测用探针组在转录后能够对猴痘病毒精准识别，通过cas13a核酸酶切割活性的激活，从而对可视化显色报告分子进行切割，进而基于色带的显色进行可视化阅读和结果的判别。
13、本专利技术对待测样品进行扩增，实现低拷贝分子的富集，从而大大提高检测下限，使低拷贝的分子被检出，最低限可达200个拷贝，提高扩增效率使检出率到达更高的要求，满足低拷贝模板的检出率。而且由于检测体系利用基因编辑探针特异性，因此检测有很高的特异性。
14、进一步地，本专利技术提供的基于crispr的猴痘病毒检测用试剂盒减少了对大型仪器的依赖，检测时长稳定且相对较短，成本进一步降低。并且，整个检测过程操作简单、灵敏度高、特异性强、检测速度快，为猴痘病毒的快速检测提供了新的方向。
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1.一种基于CRISPR的猴痘病毒检测用探针组，其特征在于，所述基于CRISPR的猴痘病毒检测用探针组包括序列如SEQ ID No:1所示的第一探针，以及序列如SEQ ID No:2所示的第二探针。
2.一种基于CRISPR的猴痘病毒检测用试剂，其特征在于，所述基于CRISPR的猴痘病毒检测用试剂包括如权利要求1所述的基于CRISPR的猴痘病毒检测用探针组，以及Cas13a核酸酶和可视化显色报告分子。
3.根据权利要求2所述的一种基于CRISPR的猴痘病毒检测用试剂，其特征在于，所述可视化显色报告分子的两端修饰有能够特异性结合对应抗体的修饰基团。
4.根据权利要求3所述的一种基于CRISPR的猴痘病毒检测用试剂，其特征在于，所述可视化显色报告分子的5’端修饰有6-FAM基团，3’端修饰有生物素基团。
5.一种基于CRISPR的猴痘病毒检测用试剂盒，其特征在于，所述基于CRISPR的猴痘病毒检测用试剂盒包括如权利要求2-4中任意一项所述的基于CRISPR的猴痘病毒检测用试剂，用于对所述基于CRISPR的猴痘病毒检测用探针组进行转录的转
6.根据权利要求5所述的一种基于CRISPR的猴痘病毒检测用试剂盒，其特征在于，所述扩增体系至少包括一组扩增引物对；其中，
7.根据权利要求5所述的一种基于CRISPR的猴痘病毒检测用试剂盒，其特征在于，所述基于CRISPR的猴痘病毒检测用试剂盒针对的靶基因为猴痘病毒F3L基因。
8.根据权利要求7所述的一种基于CRISPR的猴痘病毒检测用试剂盒，其特征在于，所述猴痘病毒F3L基因的序列如SEQ ID No:5所示。
9.一种检测用试纸条，其特征在于，所述检测用试纸条用于权利要求5-8所述的基于CRISPR的猴痘病毒检测用试剂盒，所述试纸条上包被有能够特异性结合所述可视化显色报告分子的特异性抗体。
...【技术特征摘要】
1.一种基于crispr的猴痘病毒检测用探针组，其特征在于，所述基于crispr的猴痘病毒检测用探针组包括序列如seq id no:1所示的第一探针，以及序列如seq id no:2所示的第二探针。
2.一种基于crispr的猴痘病毒检测用试剂，其特征在于，所述基于crispr的猴痘病毒检测用试剂包括如权利要求1所述的基于crispr的猴痘病毒检测用探针组，以及cas13a核酸酶和可视化显色报告分子。
3.根据权利要求2所述的一种基于crispr的猴痘病毒检测用试剂，其特征在于，所述可视化显色报告分子的两端修饰有能够特异性结合对应抗体的修饰基团。
4.根据权利要求3所述的一种基于crispr的猴痘病毒检测用试剂，其特征在于，所述可视化显色报告分子的5’端修饰有6-fam基团，3’端修饰有生物素基团。
5.一种基于crispr的猴痘病毒检测用试剂盒，其特征在于，所述基于crispr的猴痘病毒...
【专利技术属性】
技术研发人员：江静，王晓波，宣守明，吴云波，
申请(专利权)人：芜湖森爱驰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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