【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分析检测领域，具体涉及一种凹叶瓜馥木茎中指标成分的hplc分析方法。
技术介绍
1、瓜馥木属(fissistigma griff)植物，又名钻山风、铁钻，为瑶药“十八钻”之一。该属植物的主要成分有生物碱、黄酮、苷类、有机酸、挥发油等。具有活血化瘀、祛风除湿、抗肿瘤、镇痛和抗炎等作用，主要用于治疗关节炎、风湿骨痛、痛风等。在民间和临床均有应用，疗效显著，有较高的药用价值。
2、凹叶瓜馥木(fissistigma.retusum)为该属代表植物之一，资源丰富，民间药用效果明确。但是，目前尚无凹叶瓜馥木的质量控制方法，无法进行深入、标准研究。因此，开发一种可以同时检测凹叶瓜馥木多指标成分含量方法，进行多指标成分控制，对凹叶瓜馥木药材的研发利用及质量控制具有深远意义。
技术实现思路
1、本专利技术针对现有技术不足，提供了一种凹叶瓜馥木茎中指标成分的hplc分析方法，解决了凹叶瓜馥木无含量测定方法及质量控制的问题，方法具有可行性，准确性及分离效果好。
2、本专利技术解决其技术问题的技术方案如下：
3、一种凹叶瓜馥木茎中指标成分的hplc分析方法，所述色谱条件为：c18色谱柱；流动相：a相为0.1％磷酸水溶液，流动相b相为乙腈，采用如下梯度洗脱：
4、在0～10min，80％～72％流动相a，20％～28％流动相b；
5、在10～30min，72％～68％流动相a，28％～32％流动相b；
6、在30～50m
7、在50～70min，62％～46％流动相a，38％～54％流动相b；
8、所述指标成分为马兜铃内酰胺aⅱ，goniopedaline，胡椒内酰胺b，马兜铃内酰胺bⅱ和5,6,7,8-四甲氧基黄酮。
9、本专利技术所述的方法，流动相流速：1ml·min-1。色谱柱柱温为25℃。
10、采用双波长进行检测，检测波长为223nm和254nm。
11、本专利技术一个具体的示例，所述色谱柱为ace excel 5c18(货号exl-121-2546u)，250×4.6mm。
12、本专利技术所述方法具体的包括以下步骤：
13、步骤a、供试品溶液的制备：凹叶瓜馥木干燥茎，粉碎后过4号筛，精密称取5g，置25ml容量瓶中，加甲醇定容，称定称重；超声30min，放冷，称量，用甲醇补足减失重量，摇匀，过滤，去续滤液，即得供试品溶液；
14、步骤b、对照品溶液的制备：分别精密称取适量马兜铃内酰胺aⅱ，goniopedaline，胡椒内酰胺b，马兜铃内酰胺bⅱ和5,6,7,8-四甲氧基黄酮对照品，用甲醇溶解并配制成。分别量取母液适量，加甲醇稀释，配置成含马兜铃内酰胺aⅱ、goniopedaline、胡椒内酰胺b、马兜铃内酰胺bⅱ、5,6,7,8-四甲氧基黄酮的混合对照品溶液。
15、步骤c、将供试品溶液、对照品溶液按以上色谱条件注入高效液相色谱仪，进行色谱分析。所述的马兜铃内酰胺aⅱ，goniopedaline，胡椒内酰胺b，马兜铃内酰胺bⅱ和5,6,7,8-四甲氧基黄酮对照品母液浓度分别为1.54mg/ml、0.69mg/ml、0.64mg/ml、0.23mg/ml、6.29mg/ml。所述的混合对照品溶液浓度为含马兜铃内酰胺aⅱ375μg/ml、goniopedaline300μg/ml、胡椒内酰胺b 540μg/ml、马兜铃内酰胺bⅱ320μg/ml、5,6,7,8-四甲氧基黄酮1541.2μg/ml。
16、本专利技术优点：
17、本专利技术针对凹叶瓜馥木茎中多指标成分，利用现代化色谱技术对传统中药进行研究，科研意义深远；采用高效液相色谱(hplc)法提供了一种凹叶瓜馥木茎中多指标成分分析方法。填补了目前国内未见采用hplc法对凹叶瓜馥木药材多成分检测研究的不足；检测凹叶瓜馥木茎中多指标成分，准确可靠，分离效果好，对凹叶瓜馥木的深入研究和质量控制提供了重要依据，具有很大的应用价值。
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1.一种凹叶瓜馥木茎中指标成分的HPLC分析方法，其特征在于，所述色谱条件为：C18色谱柱；流动相：A相为0.1％磷酸水溶液，流动相B相为乙腈，采用如下梯度洗脱：
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述流动相流速：1mL·min-1。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于色谱柱柱温为25℃。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于检测波长为223nm和254nm。
5.如权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于所述色谱柱为ACE EXCEL 5C18，250×4.6mm。
【技术特征摘要】
1.一种凹叶瓜馥木茎中指标成分的hplc分析方法，其特征在于，所述色谱条件为：c18色谱柱；流动相：a相为0.1％磷酸水溶液，流动相b相为乙腈，采用如下梯度洗脱：
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述流动相流速：1ml·min-1。
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【专利技术属性】
技术研发人员：黄慧莲，金晨，唐殿超，刘会珍，何颖，李思颖，陈荷莹，赵灼滨，
申请(专利权)人：江西中医药大学，
类型：发明
国别省市：
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