人五型腺病毒的数字PCR检测的引物探针及其试剂盒与应用制造技术

本发明专利技术提供一种检测人五型腺病毒的数字PCR检测的引物探针及其试剂盒与应用。本发明专利技术用于检测人五型腺病毒E1A基因的数字PCR检测试剂盒包括引物和特异性探针，所述引物的核苷酸系列如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示，所述特异性探针的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示。本发明专利技术的试剂盒与微滴数字PCR结合使用检测人五型腺病毒E1A基因，其检测的灵敏度高，不用设置标准曲线，根据检测结果可以直接判读样品中人五型腺病毒的核酸拷贝数，极大的简化了操作步骤。为人五型腺病毒感染相关疾病的早期发现、预防和治疗提供高效的绝对定量检测方法，具有重要的应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于病毒检测，具体涉及人五型腺病毒的数字pcr检测的引物探针及其试剂盒与应用。

技术介绍

1、微滴式数字pcr(droplet digitalpolymerase chain reaction，ddpcr)是20世纪末，vogelstein等提出的一项核酸定量检测新技术。通过将一个样本分成20,000个纳升级的微滴，分配到不同的反应单元，每个单元包含一个或多个拷贝的目标分子(dna模板)，本质上将传统定量pcr的一个反应变成20,000个反应，在每个反应单元中分别对目标分子进行pcr扩增，扩增结束后对各个反应单元的荧光信号进行统计学分析。与qpcr不同的是，数字pcr不依赖于ct值，因此不受扩增效率影响，扩增结束后通过直接计数或泊松分布公式来计算每个反应单元的平均浓度(含量)，能够将误差控制在5％以内，数字pcr可以不需要对照标准样品和标准曲线来实现绝对定量分析。此外，由于反应体系被分成数万分，即使样本浓度非常低也能进行准确检测。

2、数字pcr一般包括两部分内容，即pcr扩增和荧光信号分析。在pcr扩增阶段，与传统技术不同，数字pc本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.人五型腺病毒的数字PCR检测引物探针组，其特征在于，包括序列如SEQ ID NO.1-2所示的引物对和序列如SEQ ID NO.3所示的探针。

2.根据权利要求1所述的引物探针组，其特征在于，所述探针两端分别带有荧光基团和淬灭基团，所述荧光基团为FAM、ROX、VIC、CY5.5、ATTO 425、和CY5中的一种，所述淬灭基团为BHQ1、BHQ2、BHQ3和MGB中的一种。

3.包含权利要求1或2所述的引物探针组的试剂盒。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括选自PCR反应缓冲液、DNA聚合酶、dNTP、发生油、阳性标准品...

【技术特征摘要】

1.人五型腺病毒的数字pcr检测引物探针组，其特征在于，包括序列如seq id no.1-2所示的引物对和序列如seq id no.3所示的探针。

2.根据权利要求1所述的引物探针组，其特征在于，所述探针两端分别带有荧光基团和淬灭基团，所述荧光基团为fam、rox、vic、cy5.5、atto 425、和cy5中的一种，所述淬灭基团为bhq1、bhq2、bhq3和mgb中的一种。

3.包含权利要求1或2所述的引物探针组的试剂盒。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括选自pcr反应缓冲液、dna聚合酶、dntp、发生油、阳性标准品和阴性标准品中的一种或多种。

5.权利要求1或2所述的引物探针组在检测人五型腺病毒中的应用。

6.一种人五型腺病毒的检测...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵良怀，
申请(专利权)人：臻准生物科技上海有限公司，
类型：发明
国别省市：