一种利用新型筛选剂筛选豇豆遗传转化体的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用新型筛选剂筛选豇豆遗传转化体的方法，所述方法是利用除草剂作为筛选剂筛选豇豆遗传转化体；所述豇豆遗传转化体含抗除草剂基因；所述除草剂包括嘧啶磺隆或五氟磺草胺。本发明专利技术创建以啶嘧磺隆或五氟磺草胺为筛选剂的新型豇豆遗传转化筛选方法，为豇豆转基因的获得提供新途径；有效解决了草甘膦耐受性问题。本发明专利技术创建的新方法所获得的转化体阳性率100％，转化率提升至11％以上，且转化体抗除草剂性状可以稳定遗传，该方法具有一定的应用价值。

【技术实现步骤摘要】

(一)本专利技术属于生物，具体涉及一种利用新型筛选剂进行豇豆遗传转化的方法。

技术介绍

0、(二)
技术介绍

1、豇豆(vigna unguiculata l.)属于严格的自花授粉作物，其柱头和花粉被龙骨瓣包围，人工杂交非常容易破坏柱头和花粉，传统育种存在局限性。转基因技术成为豇豆新品种培育的重要方式。

2、在遗传转化过程中，筛选剂的选择直接影响转化效率，并且影响转基因材料的实用性。当前的豇豆遗传转化体系主要使用新霉素、潮霉素、卡那霉素等抗生素作为筛选剂，此类筛选剂存在假阳性、转化率低等问题。中国专利2021105267146披露了利用草甘膦为筛选剂的豇豆转化体系，其阳性率高达99.9％、转化率达到8％。然而目前的转基因植物大多都是含抗草甘膦基因，由于大量单一广泛使用化学除草剂，很多杂草对草甘膦产生了抗性。据国际抗性调查网站(http://www.weedscience.org/)报道，自1974年引入草甘膦，1996年引入首个抗草甘膦大豆后，草甘膦的用量急剧上升，截至2022年，已有354个案例、57种杂草对草甘膦产生抗性。

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【技术保护点】

1.一种利用新型筛选剂筛选豇豆遗传转化体的方法，其特征在于，所述方法是利用除草剂作为筛选剂筛选豇豆遗传转化体；所述豇豆遗传转化体含抗除草剂基因；所述除草剂包括嘧啶磺隆或五氟磺草胺。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述抗除草剂基因核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述筛选豇豆遗传转化体的方法包括如下步骤：

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤(4)、(5)、(6)中所述筛选剂浓度均为0.1-10mg/L。

5.一种防治种植含抗除草剂基因的豇豆遗传转化体的田间杂草的方法，其特征在于...

【技术特征摘要】

1.一种利用新型筛选剂筛选豇豆遗传转化体的方法，其特征在于，所述方法是利用除草剂作为筛选剂筛选豇豆遗传转化体；所述豇豆遗传转化体含抗除草剂基因；所述除草剂包括嘧啶磺隆或五氟磺草胺。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述抗除草剂基因核苷酸序列如seq idno.1所示。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述筛选豇豆遗传转化体的方法包括...

【专利技术属性】
技术研发人员：林海燕，于小星，沈志成，
申请(专利权)人：浙江大学中原研究院，
类型：发明
国别省市：