一种针对多种支原体快速等温扩增检测方法的建立及应用技术

本发明专利技术公开了一种针对多种支原体快速等温扩增检测方法的建立及应用，本发明专利技术提供一种高效的重组酶转录酶介导的等温扩增(RTMA)技术结合侧流层析试纸条(LFD)显示法，针对多种实验室常见支原体的进行检测，不仅避免了传统的PCR、QPCR技术对仪器的苛刻要求，且大大地缩短检测时间，对比荧光型的检测方案可将灵敏性提高1～2个数量级完成可视化检测，同时也便于基础人员在现场有限的环境中使用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，涉及一种针对多种支原体快速等温扩增检测方法的建立及应用。

技术介绍

1、支原体是目前已知一类能在无生命培养基上生长繁殖的最小的原核细胞微生物，分为两个属：一为支原体属(mycoplasma)，有几十个种；另一为脲原体属(ureaplasma)，仅有一种。支原体在自然界分布广泛，无细胞壁，直径为0.1-0.3μm，且形态易变，极易通过除菌过滤器。细胞培养过程中遇到的支原体95％都来自于以下四种支原体：口腔支原体、精氨酸支原体、猪鼻支原体、莱氏无胆甾支原体，其中莱氏无胆甾支原体为牛源性。

2、实验室细胞培养物被支原体污染是全球面临亟待解决的问题，对此常见的分子生物学诊断方法之一为聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,pcr)，该技术虽然敏感性强但实验耗时长，且极容易气溶胶污染，对实验室环境要求严格，需要昂贵的实验机器，因此限制了其应用能力和应用范围。

技术实现思路

1、研发一种重组酶聚合酶等温扩增((recom binase transcription本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种检测多种支原体污染的引物/探针组，其特征在于，所述引物组的序列包括：

2.一种检测多种支原体的扩增体系，其特征在于，所述扩增体系包括权利要求1所述的引物组和扩增试剂，所述扩增试剂为混合物。

3.根据权利要求2所述的扩增体系，其特征在于，所述扩增试剂包括RTMA buffer、RTMA酶MIX；

4.一种检测多种支原体污染的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1所述的引物组，权利要求2或3所述的扩增体系，包括13种支原体阳性质控片段。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述支原体的种类包括猪鼻支原体M.hyorhini...

【技术特征摘要】

1.一种检测多种支原体污染的引物/探针组，其特征在于，所述引物组的序列包括：

2.一种检测多种支原体的扩增体系，其特征在于，所述扩增体系包括权利要求1所述的引物组和扩增试剂，所述扩增试剂为混合物。

3.根据权利要求2所述的扩增体系，其特征在于，所述扩增试剂包括rtma buffer、rtma酶mix；

4.一种检测多种支原体污染的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1所述的引物组，权利要求2或3所述的扩增体系，包括13种支原体阳性质控片段。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述支原体的种类包括猪鼻支原体m.hyorhinis、发酵支原体m.fermentans、精氨酸支原体m.argini、人型支原体m.hominis、口腔支原体m.orale、唾液支原体m.salivarium、梨支原体m.pirum、无胆甾支原体m.acholeplasma laidlawii、无乳支原体m.agalactiae、牛支原体m.bovis、颊支原体m.buccale、关节炎支原体m.arthritidis、和/或肺支原体m.pulmonis。

6....

【专利技术属性】
技术研发人员：梅斯尧，陈佳庆，张伦，秦萍萍，胡振阳，刘霄卉，
申请(专利权)人：苏州东抗生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：