【技术实现步骤摘要】
本申请涉及生物医学，尤其涉及一种聚集诱导发光微球及其制备方法与应用。
技术介绍
1、发光微球是指负载有发光物质，直径在纳米至微米范围内，在外界光源刺激下发出冷光的功能性聚合物微球，其具有比表面积大、表面易修饰和发光效率高等优点，已经广泛应用于生物医学检测领域。
2、目前基于生物医学工程的检测试剂盒的比色/发光微球原料主要有以下几类：胶体金、传统荧光分子、稀土配合物、量子点、聚集诱导发光微球。其中，胶体金是应用最为广泛、成本最为低廉的原料，但其应用的检测灵敏度不高、检测限较高；传统荧光微球，不限水溶性或油溶性染料，例如罗丹明、茜素红、偶氮染料等，因进入微球内部浓度过高会产生聚集诱导的荧光猝灭现象而导致无法大幅度提高检测限；稀土配合物虽然可以制备荧光强度高的微球，但稀土资源是非可再生资源，受制于稀土价格，可能带来成本过高的潜在风险；量子点虽然发光效率高，但毒性大，不具有环境友好性，难降解，这都限制了量子点的工业化制备；聚集诱导发光微球的合成方法主要有细乳液聚合法、自组装-纳米沉降法和掺杂法等。但是这些方法在控制微球粒径、批间差、荧光强度上仍有一定的不可控因素，从而限制了其在工业规模制备上的应用。
技术实现思路
1、本申请实施例的目的在于提出一种聚集诱导发光微球及其制备方法与应用，以解决相关技术中发光微球粒径分布大、批间差异大、荧光性能不稳定限制了其在工业规模制备上应用的技术问题。
2、为了解决上述技术问题，本申请实施例提供一种聚集诱导发光微球的制备方法，采用了如
3、将表面含有羧基或氨基的聚苯乙烯微球分散在乳化剂保存液中，得到微球溶液；
4、将聚集诱导发光分子溶解于有机溶剂中，配制得到发光分子溶液；
5、将所述发光分子溶液加入至所述微球溶液中，超声并进行振荡，得到发光微球溶液；
6、对所述发光微球溶液进行离心，取沉淀物进行洗涤，并将清洗后的沉淀物保存于保存液中，制得聚集诱导发光微球。
7、进一步的，所述聚苯乙烯微球的粒径为20nm-1.5μm，表面羧基或氨基的含量为80-500μmol/g。
8、进一步的，所述乳化剂保存液为吐温20、吐温80、聚乙烯醇、十二烷基硫酸钠、十二烷基磺酸钠、triton x-100和peg2000中的至少一种，所述乳化剂保存液的质量浓度为0.1％～10％。
9、进一步的，所述聚集诱导发光分子为四苯基乙烯类、三苯胺类以及噻咯类中的一种。
10、进一步的，所述有机溶剂为二氯甲烷、三氯甲烷、丙酮、甲醇、乙醇、丙三醇、正丁醇、乙酸乙酯、四氢呋喃、乙醚、正己烷、甲苯中的至少一种，质量浓度为1μg/ml～50mg/ml。
11、进一步的，所述超声的功率为10～600w；所述振荡的振荡转速为200～3000rpm，振荡时间为3～24h；所述离心的离心转速为13000～22000rpm。
12、进一步的，所述洗涤选用的洗涤液为乙醇、n-甲基吡咯烷酮和去离子水中的至少一种。
13、进一步的，所述保存液的成分包括添加剂，所述添加剂为防腐剂、分散剂和稳定剂中至少一种，其中，所述防腐剂为叠氮化钠、proclin 300以及山梨酸钾中的至少一种；所述分散剂为peg2000和吐温20中的至少一种；所述稳定剂为海藻糖、蔗糖、乳糖以及甘露糖中的至少一种；所述添加剂总质量浓度为0.001％～0.2％。
14、为了解决上述技术问题，本申请实施例还提供一种采用如上所述的制备方法制备的聚集诱导发光微球。
15、为了解决上述技术问题，本申请实施例还提供一种如上所述的聚集诱导发光微球在抗原抗体检测领域的应用。
16、与现有技术相比，本申请实施例主要有以下有益效果：
17、本申请利用相似相溶原理，通过超声、振荡的便捷操作使得聚集诱导发光分子进入聚苯乙烯微球内部，并在聚苯乙烯微球内部进行聚集，产生高强度荧光；本申请的制备方法操作简便，成本低，批间差异小、可规模化生产，制得的聚集诱导发光微球的荧光性能好。
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1.一种聚集诱导荧光微球的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：
2.根据权利要求1所述的聚集诱导发光微球的制备方法，其特征在于，所述聚苯乙烯微球的粒径为20nm-1.5μm，表面羧基或氨基含量为80-500μmol/g。
3.根据权利要求1所述的聚集诱导发光微球的制备方法，其特征在于，所述乳化剂保存液为吐温20、吐温80、聚乙烯醇、十二烷基硫酸钠、十二烷基磺酸钠、Triton X-100和PEG2000中的至少一种，所述乳化剂保存液的质量浓度为0.1％～10％。
4.根据权利要求1所述的聚集诱导发光微球的制备方法，其特征在于，所述聚集诱导发光分子为四苯基乙烯类、三苯胺类以及噻咯类中的一种。
5.根据权利要求1所述的聚集诱导发光微球的制备方法，其特征在于，所述有机溶剂为二氯甲烷、三氯甲烷、丙酮、甲醇、乙醇、丙三醇、正丁醇、乙酸乙酯、四氢呋喃、乙醚、正己烷、甲苯中的至少一种，质量浓度为1μg/mL～50mg/mL。
6.根据权利要求1所述的聚集诱导发光微球的制备方法，其特征在于，所述超声的功率为10～600W；所述振荡的振荡
7.根据权利要求1所述的聚集诱导发光微球的制备方法，其特征在于，所述洗涤选用的洗涤液为乙醇、N-甲基吡咯烷酮和去离子水中的至少一种。
8.根据权利要求1所述的聚集诱导发光微球的制备方法，其特征在于，所述保存液的成分包括添加剂，所述添加剂为防腐剂、分散剂和稳定剂中至少一种，其中，所述防腐剂为叠氮化钠、proclin 300以及山梨酸钾中的至少一种；所述分散剂为PEG2000和吐温20中的至少一种；所述稳定剂为海藻糖、蔗糖、乳糖以及甘露糖中的至少一种；所述添加剂总质量浓度为0.001％～0.2％。
9.一种采用权利要求1至8中任一项所述的制备方法制备的聚集诱导发光微球。
10.根据权利要求9所述的聚集诱导发光微球在抗原抗体检测领域的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种聚集诱导荧光微球的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：
2.根据权利要求1所述的聚集诱导发光微球的制备方法，其特征在于，所述聚苯乙烯微球的粒径为20nm-1.5μm，表面羧基或氨基含量为80-500μmol/g。
3.根据权利要求1所述的聚集诱导发光微球的制备方法，其特征在于，所述乳化剂保存液为吐温20、吐温80、聚乙烯醇、十二烷基硫酸钠、十二烷基磺酸钠、triton x-100和peg2000中的至少一种，所述乳化剂保存液的质量浓度为0.1％～10％。
4.根据权利要求1所述的聚集诱导发光微球的制备方法，其特征在于，所述聚集诱导发光分子为四苯基乙烯类、三苯胺类以及噻咯类中的一种。
5.根据权利要求1所述的聚集诱导发光微球的制备方法，其特征在于，所述有机溶剂为二氯甲烷、三氯甲烷、丙酮、甲醇、乙醇、丙三醇、正丁醇、乙酸乙酯、四氢呋喃、乙醚、正己烷、甲苯中的至少一种，质量浓度为1μg/ml～50mg/ml。
6.根据权...
【专利技术属性】
技术研发人员：蒋析文，莫君勇，魏星，周水清，许丹丹，钟楚瑶，
申请(专利权)人：广州达安基因股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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