【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分子生物学，具体地说，涉及一种基于布鲁氏菌的双重数字pcr方法。
技术介绍
1、布鲁氏菌是胞内寄生致病菌，其毒力基因在于四型分泌系统，布鲁氏菌的胞内运输是在virb编码的四型分泌系统的调节下完成的，四型分泌系统可以转运蛋白质和/或dna和/或蛋白复合物，跨越细胞膜建立一个转运的通道然后与靶细胞结合，使得分泌的蛋白到达靶细胞；布鲁氏菌的基因编码区有12个开放阅读框，分别为virb1~virb11以及virb12，其中，virb1~virb11与以农杆菌的virb编码区同源，virb12与以农杆菌的virb编码区没有同源性。在胞内运输时通过virb8建立通道以供是virb蛋白进入外膜，virb12进入胞内起到布鲁氏菌的致病力作用，因此，对于布鲁氏菌致病力的研究中对于virb8以及virb12的检测是必不可少的。
2、现有技术中virb8以及virb12的检测方法有多种，其中pcr检测方法是最为常见的一种，硕士学位论文《布鲁氏菌virb8-pcr诊断方法的建立与应用及ery基因的克隆与序列分析》（吴冬玲，新疆农业大学...
【技术保护点】
1.一种基于布鲁氏菌的双重数字PCR方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的基于布鲁氏菌的双重数字PCR方法，其特征在于，PCR反应体系包括：
3.根据权利要求2所述的基于布鲁氏菌的双重数字PCR方法，其特征在于，
4.根据权利要求2或3所述的基于布鲁氏菌的双重数字PCR方法，其特征在于，PCR反应体系包括：
5.根据权利要求1所述的基于布鲁氏菌的双重数字PCR方法，其特征在于，微滴处理的步骤为：
6.根据权利要求5所述的基于布鲁氏菌的双重数字PCR方法，其特征在于，定性定量分析的步骤如下：
7.一...
【技术特征摘要】
1.一种基于布鲁氏菌的双重数字pcr方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的基于布鲁氏菌的双重数字pcr方法，其特征在于，pcr反应体系包括：
3.根据权利要求2所述的基于布鲁氏菌的双重数字pcr方法，其特征在于，
4.根据权利要求2或3所述的基于布鲁氏菌的双重数字pcr方法，其特征在于，pcr反应体系包括：
5.根据权利要求1所述的基于布鲁氏菌的双重数字pcr方法，其特征在于，微滴处理的步骤为：
6.根据权利要求5所述的基于布鲁氏菌的双重数字pcr方法，其特征在于，定性定量分析的步骤如下：
7.一种双重数字pcr方法的灵敏度检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
【专利技术属性】
技术研发人员：兰邹然，张月，薛瑞雪，商营利，孙圣福，胡莉萍，唐熠，邢林林，李玉杰，王洪梅，张玉玉，宋桂才，
申请(专利权)人：山东省动物疫病预防与控制中心山东省人畜共患病流调监测中心，
类型：发明
国别省市：
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