用于市政污水中浓缩富集猴痘病毒DNA的提取方法技术

本发明专利技术涉及的一种用于市政污水中浓缩富集猴痘病毒DNA的提取方法，包括以下步骤：灭活处理、过滤处理、缓冲液处理和浓缩处理。缓冲液处理包括称量10g氯化钠并将其置入100mL的无菌HDPE样品瓶中，并在无菌HDPE样品瓶中加入500μLTE缓冲液，TE缓冲液包括100mM EDTA，1M Tris，pH为7.2。浓缩处理包括取45mL过滤后的污水样品，直接倒入无菌HDPE样品瓶中，待氯化钠溶解后，振荡混匀1h，振荡采用恒温气浴振荡器，处理温度为4℃，振荡速度为100r/min，取出样品瓶缓慢加入25mL无水乙醇，静置10min获得污水样品浓缩液。本发明专利技术的有益之处在于：能够对污水样品进行富集浓缩，能够降低对降低市政污水中猴痘病毒DNA的检出极限，进而能够提高检测的敏感性和可靠性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及了病毒检测，尤其涉及一种用于市政污水中浓缩富集猴痘病毒dna的提取方法。

技术介绍

1、污水流行病学(wastewater-based epidemiology,wbe)在全球范围内已经成为重要的分析技术被广泛运用在药物滥用、疫病的监测之中。理论的假设基于所携带病毒的患者通过尿液和粪便将少量病毒或者核酸排出体外，进入市政污水系统，从而进入区域污水处理厂。通过采集该地区废水作为分析样本，根据检出病毒浓度、污水处理厂进水流量和服务人口数量等参数评估该病毒的影响程度以及该区域人类健康水平。污水流行病学作为多学科交叉所产生的科学技术，优势在于监测大规模人口社区、城市的同时，提供丰富的空间分布、病毒的扩散程度以及健康暴露水平等深层信息，有效实时疫病的监控和预警的作用。

2、猴痘是一种包膜双链dna病毒，属于人畜共患病，临床表现类似天花，但病情较轻。这种疾病由猴痘病毒造成。这种病毒可以通过直接密切接触由动物传染给人，也可以在人与人之间传播，其传染途径主要包括血液和体液。猴痘病毒共有中非和西非两个不同的遗传进化分支。相比于病死率约为3.6％的西本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于市政污水中浓缩富集猴痘病毒DNA的提取方法，其特征在于：包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的用于市政污水中浓缩富集猴痘病毒DNA的提取方法，其特征在于：还包括在灭活之前，在-20℃的环境下，对污水样本进行保存和运输。

3.根据权利要求1所述的用于市政污水中浓缩富集猴痘病毒DNA的提取方法，其特征在于：还包括准备真空抽滤装置，将核酸硅胶吸附柱连接到抽真空装置上，并安装增量管，向增量管中倒入浓缩后的污水样本，使得浓缩后的污水样本在负压下通过核酸硅胶吸附柱。

4.根据权利要求3所述的用于市政污水中浓缩富集猴痘病毒DNA的提取方法，其特征在于：...

【技术特征摘要】

1.一种用于市政污水中浓缩富集猴痘病毒dna的提取方法，其特征在于：包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的用于市政污水中浓缩富集猴痘病毒dna的提取方法，其特征在于：还包括在灭活之前，在-20℃的环境下，对污水样本进行保存和运输。

3.根据权利要求1所述的用于市政污水中浓缩富集猴痘病毒dna的提取方法，其特征在于：还包括准备真空抽滤装置，将核酸硅胶吸附柱连接到抽真空装置上，并安装增量管，向增量管中倒入浓缩后的污水样本，使得浓缩后的污水样本在负压下通过核酸硅胶吸附柱。

4.根据权利要求3所述的用于市政污水中浓缩富集猴痘病毒dna...

【专利技术属性】
技术研发人员：周波，陈一波，宋明芳，胡志远，徐嘉逸，张巍，
申请(专利权)人：苏州先进分子诊断技术有限公司，
类型：发明
国别省市：