System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种具有降压活性的大米肽制备方法及其应用技术_技高网

一种具有降压活性的大米肽制备方法及其应用技术

技术编号:40582573 阅读:6 留言:0更新日期:2024-03-06 17:26
本专利提供了一种具有降压活性的大米肽制备方法,包括以下步骤:S1、向酶解罐中加入12方无离子水,加入1kg碱性蛋白酶,充分搅拌溶解蛋白酶;S2、准备1000kg大米蛋白,加入S1的酶解罐中,充分搅拌溶解,继续添加5kg碱性蛋白酶,继续添加2kg中性蛋白酶后酶解3h后升温进行灭酶处理;S3、将S2中的酶解液用孔径为0.2μm孔径的陶瓷膜过滤处理,控制处理压力和酶解液流速;S4、将经陶瓷膜过滤后的酶解液用孔径为10nm孔径的有机过滤膜处理,控制处理压力和酶解液流速,进行喷雾干燥处理,最终得到大米蛋白多肽。一种具有降压活性的大米肽在维持血压健康水平上的应用。其优点在于:大米肽制备简单、成本低,获得大米肽对高血压具有良好的降低效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及大米深加工应用,特别是涉及一种具有降压活性的大米肽制备方法及其应用


技术介绍

1、稻谷的食用历史悠久,且作为当今世界上最主要的粮食之一。2019年居世界粮农组织统计,世界总稻谷产量高达7.13亿吨,我国稻谷产量占比约为30%。而大米更是我国居民膳食中不可或缺的重要组成部分,其消费量占比高达80%以上。全谷物大米中主要营养成分包括80%的淀粉和6%~8%的蛋白质。同时,大米蛋白的氨基酸比例与fao/who的建议模式更为接近,属于优质蛋白质,其蛋白质营养可媲美鸡蛋等动物蛋白。

2、将大米蛋白通过蛋白酶水解制备生物活性肽,相较于大米蛋白,小分子多肽的吸收更为迅速和有效,且具有低致敏性的特点。根据国内外诸多文献的报道,大米蛋白多肽具有诸多生物活性,比如增强免疫力、降血脂等功能。本专利技术通过对大米蛋白肽的制备工艺优化以及不断分离纯化,发现大米蛋白多肽具有显著抑制ace的活性,进一步通过动物试验验证其具备显著的降血压活性。

3、高血压疾病作为当今世界上最常见的慢性健康疾病,它是一种与心血管疾病相关的高度危险因素,如动脉硬化,中风和心肌梗死。心脑血管疾病的死亡率近年来居高不下,死亡率高于其他疾病。目前常见的治疗高血压药物主要类型包括:利尿剂型、钙拮抗剂型、血管紧张素转化酶抑制剂型等药物,其中血管紧张素转化酶抑制剂型的药物最为常见。这类药物主要与血管紧张素转化酶(ace)发生竞争性抑制,进而干扰血管紧张素的合成,起到降血压的效果。这些药物都具有一些副作用,主要包括肾脏毒性、恶心、呕吐等症状。而大米蛋白多肽作为ace抑制剂可以通过肾素-血管紧张素系统有效地降低高血压,且具备安全性高、无毒副作用的特点,为天然降血压多肽的产品开发提供了重要依据。


技术实现思路

1、基于此,有必要针对上述问题,提供一种具有降压活性的大米肽制备方法及其应用。

2、本专利技术为解决上述技术问题,采用如下技术方案:

3、一种具有降压活性的大米肽制备方法,包括以下步骤:

4、s1、向酶解罐中加入12方无离子水,采用1m氢氧化钠调节ph只8.8-9.0,升温至53-55℃,加入1kg碱性蛋白酶,充分搅拌溶解蛋白酶;

5、s2、准备1000kg大米蛋白,加入s1的酶解罐中,充分搅拌溶解,测定ph后采用1m氢氧化钠调节ph至8.8-9.0,继续添加5kg碱性蛋白酶,充分搅拌酶解3h后,继续添加2kg中性蛋白酶后酶解3h后升温进行灭酶处理;

6、s3、将s2中的酶解液用孔径为0.2μm孔径的陶瓷膜过滤处理,控制处理压力和酶解液流速,陶瓷膜可以将脂肪大分子蛋白以及其他杂质充分过滤掉,极大提升产品的品质;

7、s4、将经陶瓷膜过滤后的酶解液用孔径为10nm孔径的有机过滤膜处理,控制处理压力和酶解液流速,用有机膜浓缩后的水解液提高浓度至32%-36%,后进行喷雾干燥处理,喷雾干燥条件为进风温度135℃,出风温度75℃,最终得到大米蛋白多肽;

8、s5、采用制备型高效液相色谱仪对大米肽进行分离纯化。

9、进一步地,所述s1中搅拌溶解蛋白酶时,搅拌机构的转速为60转/分钟。

10、进一步地,所述s2中升温灭菌处理时,升温后的温度为100℃。

11、进一步地,所述s3中酶解液在经过陶瓷膜过滤处理时,其处理压力为1.2mpa,酶解液流速稳定至2000l/h。

12、进一步地,所述s4中的酶解液在经过有机过滤膜进行处理时,其处理压力为2.3mpa,流速稳定在2800l/h。

13、进一步地,所述s5中对大米肽进行分离纯化具体包括以下步骤:

14、s51、采用流动相a以5ml/min的速度平衡6个柱体积,直到基线稳定为止;

15、s52、将经胃蛋白酶和胰蛋白酶水解后的大米肽用流动相a溶解,配制样品的浓度为10mg/ml,10000r/min离心5min,上清液采用0.22μm的滤膜过滤处理,上样量为15ml;

16、s53、采用流动相a和流动相b的混合液进行梯度洗脱;

17、s54、进行接样,冷冻干燥后进行ace酶的抑制活性检测;

18、s55、进一步分离纯化,不断提高单一组分的纯度,纯化后的单一组分采用纳升级液相色谱-q exactive质谱联用系统对其进行纯度和结构鉴定;

19、s56、利用纳升级液相色谱-q exactive质谱联用,从大米肽组分中纯化得到了1条多肽,鉴定其结构为ripagtty的单链多肽,对此单链多肽进行合成。

20、进一步地,所述s51中的流动相a采用0.1%三氟乙酸+99.9%超纯水,流动相b采用0.1%三氟乙酸+99.9%乙腈,检测波长为214nm,检测时间为36min,柱温为21℃-25℃。

21、进一步地,所述s53的洗脱梯度具体如下:0至5min流动相b浓度由0%梯度上升到5%;5至30min,流动相b浓度由5%梯度上升到80%;30至40min始终保持用浓度为80%的流动相b洗脱;40至45min流动相b浓度由80%梯度下降到5%。

22、本专利技术还提供上述具有降压活性的大米肽在维持血压健康水平上的应用。

23、本专利技术的优点在于:

24、1、大米肽的原料来源广泛,参与制备的各种原料成本较低,且制备方法简单易操作,提供一种成本较低、制备工艺简单的大米肽制备方法;

25、2、制备获得大米肽有效降低高血压,且没有副作用。

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【技术保护点】

1.一种具有降压活性的大米肽制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的一种具有降压活性的大米肽制备方法,其特征在于:所述S1中搅拌溶解蛋白酶时,搅拌机构的转速为60转/分钟。

3.根据权利要求1所述的一种具有降压活性的大米肽制备方法,其特征在于:所述S2中升温灭菌处理时,升温后的温度为100℃。

4.根据权利要求1所述的一种具有降压活性的大米肽制备方法,其特征在于:所述S3中酶解液在经过陶瓷膜过滤处理时,其处理压力为1.2MPa,酶解液流速稳定至2000L/h。

5.根据权利要求1所述的一种具有降压活性的大米肽制备方法,其特征在于:所述S4中的酶解液在经过有机过滤膜进行处理时,其处理压力为2.3MPa,流速稳定在2800L/h。

6.根据权利要求1所述的一种具有降压活性的大米肽制备方法,其特征在于:所述S5中对大米肽进行分离纯化具体包括以下步骤:

7.根据权利要求6所述的一种具有降压活性的大米肽制备方法,其特征在于:所述S51中的流动相A采用0.1%三氟乙酸+99.9%超纯水,流动相B采用0.1%三氟乙酸+99.9%乙腈,检测波长为214nm,检测时间为36min,柱温为21℃-25℃。

8.根据权利要求6所述的一种具有降压活性的大米肽制备方法,其特征在于:所述S53的洗脱梯度具体如下:0至5min流动相B浓度由0%梯度上升到5%;5至30min,流动相B浓度由5%梯度上升到80%;30至40min始终保持用浓度为80%的流动相B洗脱;40至45min流动相B浓度由80%梯度下降到5%。

9.权利要求1-8任意一项所述的具有降压活性的大米肽在维持血压健康水平上的应用。

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【技术特征摘要】

1.一种具有降压活性的大米肽制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的一种具有降压活性的大米肽制备方法,其特征在于:所述s1中搅拌溶解蛋白酶时,搅拌机构的转速为60转/分钟。

3.根据权利要求1所述的一种具有降压活性的大米肽制备方法,其特征在于:所述s2中升温灭菌处理时,升温后的温度为100℃。

4.根据权利要求1所述的一种具有降压活性的大米肽制备方法,其特征在于:所述s3中酶解液在经过陶瓷膜过滤处理时,其处理压力为1.2mpa,酶解液流速稳定至2000l/h。

5.根据权利要求1所述的一种具有降压活性的大米肽制备方法,其特征在于:所述s4中的酶解液在经过有机过滤膜进行处理时,其处理压力为2.3mpa,流速稳定在2800l/h。

6.根据权利要求1所述的一种具有降压...

【专利技术属性】
技术研发人员:张钊魏玮张会李会允王芳王惠娟
申请(专利权)人:中食都庆山东生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:

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