【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
技术介绍
技术实现思路
【技术保护点】
1.产生治疗性外来体的方法，其包括下列步骤：
2.产生治疗性外来体的方法，其包括下列步骤：
3.权利要求1或权利要求2的方法，其中培养步骤(a)在特定的CO2、O2和氮浓度或条件存在下发生。
4.权利要求3的方法，其中CO2浓度为5％。
5.权利要求3或权利要求4的方法，其中O2浓度为20％。
6.权利要求1-5中任一项的方法，其中培养步骤(a)在用氮进行平衡的条件下发生。
7.权利要求1-6中任一项的方法，其中所述MSC来自脐带组织、骨髓、脂肪组织、牙质组织、胎盘组织或其混合物。
8.权利要求1-7中任一项的方法，其中所述MSC来自脐带组织。
9.权利要求1-8中任一项的方法，其中所述方法发生在自动化系统中。
10.权利要求9的方法，其中所述系统被设置成包含通过所述系统的至少一部分连续输注培养基。
11.权利要求9或10的方法，其中所述系统是封闭的或半封闭的。
12.权利要求1-11中任一项的方法，其中所述方法发生在生物反应器中。
13
14.权利要求13的方法，其中修饰在所述生物反应器内部的一个或多个表面以允许细胞粘附。
15.权利要求14的方法，其中修饰在所述生物反应器内部的所述一个或多个表面以包含一种或多种细胞外基质蛋白质。
16.权利要求15的方法，其中所述细胞外基质蛋白质为纤连蛋白。
17.权利要求9-16中任一项的方法，其进一步包括从所述系统中提取样品的步骤。
18.权利要求17的方法，其中就所述外来体的一种或多种特征对所述样品进行测试。
19.权利要求1-18中任一项的方法，其中步骤(b)使用缺乏血小板裂解物的培养基。
20.权利要求1-19中任一项的方法，其中步骤(b)使用包含L-丙氨酰基-L-谷氨酰胺二肽的培养基。
21.权利要求1-20中任一项的方法，其中培养步骤(a)使用包含L-丙氨酰基-L-谷氨酰胺二肽的培养基。
22.权利要求1-21中任一项的方法，其中培养步骤(a)使用α-MEM培养基、肝素、人血小板裂解物和L-丙氨酰基-L-谷氨酰胺二肽。
23.权利要求1-22中任一项的方法，其中步骤(a)和(b)发生多于一次。
24.权利要求1-23中任一项的方法，其中步骤(a)和(b)发生2、3、4、5、6、7、8、9、10或更多次。
25.权利要求1-24中任一项的方法，其中步骤(b)发生多于一次,并且所述收集以大约48小时的间隔发生。
26.权利要求2-25中任一项的方法，其中在步骤(c)中的电穿孔之前将所收集的外来体悬浮在无菌的、等渗的、非致热的缓冲液中。
27.权利要求26的方法，其中所述缓冲液包含Plasma-Lyte A。
28.权利要求2-27中任一项的方法，其中在步骤(c)中对大约1×108至大约10×1012个所收集的外来体进行电穿孔。
29.权利要求1-28中任一项的方法，其中所述一种或多种治疗试剂为miRNA、siRNA、shRNA、蛋白质、肽、药物、脂质、DNA、RNA或其组合。
30.权利要求29的方法，其中所述一种或多种治疗试剂为蛋白质、肽、药物和/或脂质，并且其中所述蛋白质、肽、药物和/或脂质的浓度在1μg/mL和1000mg/mL之间。
31.权利要求29或权利要求30的方法，其中所述蛋白质包括抗体或抗体片段。
32.权利要求29-31中任一项的方法，其中所述一种或多种治疗试剂为miRNA，并且其中miRNA的浓度在1μg/mL和200μg/mL之间。
33.权利要求29-32中任一项的方法，其中所述miRNA包括miR-124、miR-148a、miR-let7i、miR-135a-2、miR-668、miR-942、miR-657。
34.权利要求29-33中任一项的方法，其中所述一种或多种治疗试剂为siRNA、shRNA和/或RNA，并且其中siRNA、shRNA和/或RNA的浓度在1μg/mL和200μg/mL之间。
35.权利要求29-34中任一项的方法，其中所述siRNA包括针对FGFR3-TACC3基因融合产物的融合断点的siRNA。
36.权利要求29-35中任一项的方法，其中所述DNA包含至多1000个碱基对。
37.权利要求29-36中任一项的方法，其中DNA的浓度在1...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.产生治疗性外来体的方法，其包括下列步骤：
2.产生治疗性外来体的方法，其包括下列步骤：
3.权利要求1或权利要求2的方法，其中培养步骤(a)在特定的co2、o2和氮浓度或条件存在下发生。
4.权利要求3的方法，其中co2浓度为5％。
5.权利要求3或权利要求4的方法，其中o2浓度为20％。
6.权利要求1-5中任一项的方法，其中培养步骤(a)在用氮进行平衡的条件下发生。
7.权利要求1-6中任一项的方法，其中所述msc来自脐带组织、骨髓、脂肪组织、牙质组织、胎盘组织或其混合物。
8.权利要求1-7中任一项的方法，其中所述msc来自脐带组织。
9.权利要求1-8中任一项的方法，其中所述方法发生在自动化系统中。
10.权利要求9的方法，其中所述系统被设置成包含通过所述系统的至少一部分连续输注培养基。
11.权利要求9或10的方法，其中所述系统是封闭的或半封闭的。
12.权利要求1-11中任一项的方法，其中所述方法发生在生物反应器中。
13.权利要求12的方法，其中所述生物反应器包含多个中空纤维。
14.权利要求13的方法，其中修饰在所述生物反应器内部的一个或多个表面以允许细胞粘附。
15.权利要求14的方法，其中修饰在所述生物反应器内部的所述一个或多个表面以包含一种或多种细胞外基质蛋白质。
16.权利要求15的方法，其中所述细胞外基质蛋白质为纤连蛋白。
17.权利要求9-16中任一项的方法，其进一步包括从所述系统中提取样品的步骤。
18.权利要求17的方法，其中就所述外来体的一种或多种特征对所述样品进行测试。
19.权利要求1-18中任一项的方法，其中步骤(b)使用缺乏血小板裂解物的培养基。
20.权利要求1-19中任一项的方法，其中步骤(b)使用包含l-丙氨酰基-l-谷氨酰胺二肽的培养基。
21.权利要求1-20中任一项的方法，其中培养步骤(a)使用包含l-丙氨酰基-l-谷氨酰胺二肽的培养基。
22.权利要求1-21中任一项的方法，其中培养步骤(a)使用α-mem培养基、肝素、人血小板裂解物和l-丙氨酰基-l-谷氨酰胺二肽。
23.权利要求1-22中任一项的方法，其中步骤(a)和(b)发生多于一次。
24.权利要求1-23中任一项的方法，其中步骤(a)和(b)发生2、3、4、5、6、7、8、9、10或更多次。
25.权利要求1-24中任一项的方法，其中步骤(b)发生多于一次,并且所述收集以大约48小时的间隔发生。
26.权利要求2-25中任一项的方法，其中在步骤(c)中的电穿孔之前将所收集的外来体悬浮在无菌的、等渗的、非致热的缓冲液中。
27.权利要求26的方法，其中所述缓冲液包含plasma-lyte a。
28.权利要求2-27中任一项的方法，其中在步骤(c)中对大约1×108至大约10×1012个所收集的外来体进行电穿孔。
29.权利要求1-28中任一项的方法，其中所述一种或多种治疗试剂为mirna、sirna、shrna、蛋白质、肽、药物、脂质、dna、rna或其组合。
30.权利要求29的方法，其中所述一种或多种治疗试剂为蛋白质、肽、药物和/或脂质，并且其中所述蛋白质、肽、药物和/或脂质的浓度在1μg/ml和1000mg/ml之间。
31.权利要求29或权利要求30的方法，其中所述蛋白质包括抗体或抗体片段。
32.权利要求29-31中任一项的方法，其中所述一种或多种治疗试剂为mirna，并且其中mirna的浓度在1μg/ml和200μg/ml之间。
33.权利要求29-32中任一项的方法，其中所述mirna包括mir-124、mir-148a、mir-let7i、mir-135a-2、mir-668、mir-942、mir-657。
34.权利要求29-33中任一项的方法，其中所述一种或多种治疗试剂为sirna、shrna和/或rna，并且其中sirna、shrna和/或rna的浓度在1μg/ml和200μg/ml之间。
35.权利要求29-34中任一项的方法，其中所述sirna包括针对fgfr3-tacc3基因融合产物的融合断点的sirna。
36.权利要求29-35中任一项的方法，其中所述dna包含至多1000个碱基对。
37.权利要求29-36中任一项的方法，其中dna的浓度在1μg/ml和200μg/ml之间。
38.权利要求1-37中任一项的方法，其中所述一种或多种治疗试剂的加载效率为至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％或至少90％。
39.权利要求1-38中任一项的方法，其进一步包括将有效量的所述外来体递送至有此需要的个体的步骤。
40.权利要求39的方法，其中在向有此需要的个体进行递送后，所述外来体提供针对由一种或多种递送至所述个体的另外的疗法所诱导的中枢神经系统毒性的神经保护。
41.权利要求39或权利要求40的方法，其中在向有此需要的个体进行递送后，所述外来体改善或逆转由一种或多种递送至所述个体的另外的疗法所诱导的认知功能障碍和/或神经变性。
42.权利要求40或权利要求41的方法，其中所述一种或多种递送至所述个体的另外的疗法包括化学疗法、放射疗法或其组合。
43.权利要求39-42中任一项的方法，其中在向有此需要的个体进行递送后，所述外来体减轻炎症。
44.权利要求39-43中任一项的方法，其中在向有此需要的个体进行递送后，所述外来体向需要再生和/或修复的组织提供组织再生和/或组织修复效应。
45.权利要求44的方法，其中所述组织由于由一种或多种递送至所述个体的另外的疗法所诱导的毒性而需要再生和/或修复。
46.权利要求44或权利要求45的方法，其中所述一种或多种递送至所述个体的另外的疗法包括化学疗法、放射疗法或其组合。
47.权利要求44-46中任一项的方法，其中所述组织由于炎症、挫伤、扭伤、肌腱炎、粘液囊炎、应力性损伤、劳损或其组合而需要再生和/或修复。
48.权利要求44-47中任一项的方法，其中所述需要再生和/或修复的组织包括软组织、脑、肺、脾、肝、心脏、肾、胰腺、肠、睾丸或骨。
49.权利要求39-48中任一项的方法，其中在向有此需要的个体进行递送后，所述外来体向需要再生和/或修复的皮肤提供皮肤再生和/或皮肤修复效应。
50.权利要求49的方法，其中所述皮肤由于由一种或多种递送至所述个体的另外的疗法所诱导的毒性而需要再生和/或修复。
51.权利要求49或权利要求50的方法，其中所述一种或多种递送至所述个体的另外的疗法包括化学疗法、放射疗法或其组合。
52.权利要求49-51中任一项的方法，其中所述皮肤由于皮肤病症而需要再生和/或修复。
53.权利要求49-52中任一项的方法，其中所述皮肤病症包括炎症、衰老、皮肤癌、痤疮、唇疱疹、水疱、血清肿、血肿、溃疡、痈、疣、银屑病、湿疹、蜂窝织炎、狼疮、光化性角化病、毛发角化病、带状疱疹、荨麻疹、黑斑病、脓疱病、晒伤、皮炎、酒渣鼻、热灼伤、化学灼伤、电灼伤、冻伤、皮肤伤口损害、挫伤、切伤、裂伤、深长伤口、撕裂、刺伤、刮伤、擦伤、抓伤、咬伤、螫伤、瘀伤、压迫伤、挤压伤、切口或其组合。
54.权利要求39-53中任一项的方法，其中在向有此需要的个体进行递送后，所述外来体向需要伤口愈合的组织或皮肤提供伤口愈合效应。
55.权利要求54的方法，其中所述组织或皮肤由于由一种或多种递送至所述个体的另外的疗法所诱导的毒性而需要伤口愈合。
56.权利要求54或权利要求55的方法，其中所述一种或多种递送至所述个体的另外的疗法包括化学疗法、放射疗法或其组合。
57.权利要求54-56中任一项的方法，其中所述组织或皮肤由于组织损伤或皮肤病症而需要伤口愈合。
58.权利要求54-57中任一项的方法，其中所述组织损伤或皮肤病症包括炎症、衰老、皮肤癌、痤疮、唇疱疹、水疱、血清肿、血肿、溃疡、痈、疣、银屑病、湿疹、蜂窝织炎、狼疮、光化性角化病、毛发角化病、带状疱疹、荨麻疹、黑斑病、脓疱病、晒伤、皮炎、酒渣鼻、热灼伤、化学灼伤、电灼伤、冻伤、皮肤伤口损害、挫伤、切伤、裂伤、深长伤口、撕裂、刺伤、刮伤、擦伤、抓伤、咬伤、螫伤、瘀伤、压迫伤、挤压伤、切口、扭伤、肌腱炎、粘液囊炎、应力性损伤、劳损或其组合。
59.权利要求39-58中任一项的方法，其中所述外来体穿过血脑屏障、血瘤屏障或其组合。
60.权利要求39-59中任一项的方法，其中所述外来体在具有免疫病症、癌症、心脏疾病、肾疾病、肺疾病、肝疾病、感染、组织损伤、皮肤病症、伤口或其组合的有此需要的个体中直接地或间接地治疗免疫病症、癌症、心脏疾病、肾疾病、肺疾病、肝疾病、感染、组织损伤、皮肤病症、伤口或其组合，或者免疫病症、癌症、心脏疾病、肾疾病、肺疾病、肝疾病、感染、组织损伤、皮肤病症、伤口或其组合的一个或多个症状。
61.权利要求60的方法，其中所述一个或多个症状包括中枢神经系统毒性、认知功能障碍、神经变性、炎症、组织变性、组织损害、皮肤损害、伤口、创伤、灼伤或其组合。
62.权利要求60或权利要求61的方法，其中所述免疫病症为自身免疫性病症或同种异体免疫性病症。
63.权利要求62的方法，其中所述免疫病症为移植物抗宿主病。
64.权利要求60或权利...
【专利技术属性】
技术研发人员：F·F·朗，E·J·施帕尔，K·雷兹瓦尼，M·曼德特，D·莱德贝特，J·古敏，B·帕克尔克里根，A·侯赛因，F·M·朗，
申请(专利权)人：得克萨斯大学体系董事会，
类型：发明
国别省市：
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