一种定向合成高乳化活性和抑菌活性Surfactin同系物的方法技术

本发明专利技术公开了一种定向合成C14‑surfactin、C15‑surfactin的枯草芽孢杆菌的构建及生产方法。本发明专利技术通过调控枯草芽孢杆菌中氨基酸代谢通路及转录调控因子相关基因，定向合成C14‑surfactin和C15‑surfactin同系物。在优化后的发酵培养基中，菌株生产的C14‑surfactin、C15‑surfactin的组分比例分别可高达85％、75％以上，具有更好的乳化活性或溶血活性、抑菌活性，能够更好应用于日化品领域。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程及微生物发酵生产领域，具体涉及一种定向合成高乳化活性和抑菌活性surfactin同系物的方法。

技术介绍

1、生物表面活性素(surfactin)是枯草芽孢杆菌的次级代谢产物，其结构是由一个七肽链(l-glu-l-leu-d-leu-l-val-l-asp-d-leu-l-leu)和一个c13～c15的β-羟基脂肪酸链组成的环状脂肽。由于氨基酸的种类、位置和脂肪酸链的长度不同，surfactin存在很多同系物组分，从而导致抗菌、溶血活性、乳化活性等性质不同。研究表明c13-surfactin和c14-surfactin具有优异的发泡和乳化性能，具有更广泛的日化护理应用前景；而c15-surfactin表现出超强的表面活性，比传统的化学表面活性剂十二烷基磺酸钠(sds)高1000多倍，抗菌、抗病毒以及溶血活性也更高，具有更广泛的医药应用、环境修复和采油应用前景。

2、目前，改变surfactin同系物组分占比的方法主要是通过改变培养基中组分氨基酸和脂肪酸组分来实现，如现有文献(朱玲燕,刘强,刘洋等.培养基组分对枯草芽胞杆菌产本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种定向合成Surfactin同系物菌株的构建方法，所述Surfactin同系物是C14-surfactin或C15-surfactin，其特征在于，所述方法以能够合成surfactin的枯草芽孢杆菌为出发菌株，过表达或敲除支链氨基酸降解途径酶基因、谷氨酸合成代谢途径酶基因和/或氮代谢调控因子基因，获得定向合成C14-surfactin或C15-surfactin的菌株。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述支链氨基酸降解途径酶基因包括以下任一种或多种基因：支链α-酮酸脱氢酶E1亚基基因bkdAA、支链α-酮酸脱氢酶E1亚基基因bkdAB、支链α-酮酸脱氢酶E2亚...

【技术特征摘要】

1.一种定向合成surfactin同系物菌株的构建方法，所述surfactin同系物是c14-surfactin或c15-surfactin，其特征在于，所述方法以能够合成surfactin的枯草芽孢杆菌为出发菌株，过表达或敲除支链氨基酸降解途径酶基因、谷氨酸合成代谢途径酶基因和/或氮代谢调控因子基因，获得定向合成c14-surfactin或c15-surfactin的菌株。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述支链氨基酸降解途径酶基因包括以下任一种或多种基因：支链α-酮酸脱氢酶e1亚基基因bkdaa、支链α-酮酸脱氢酶e1亚基基因bkdab、支链α-酮酸脱氢酶e2亚基基因bkdb、支链α-酮酸脱氢酶e3亚基基因ipdv和长链脂肪酸-coa连接酶基因lcfb。

3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述谷氨酸合成代谢途径酶基因包括以下任一种或多种基因：谷氨酰胺合成酶基因glna和谷酰胺酰胺水解酶基因glsb。

4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述氮代谢调控因子基因包括以下任一种或多种基因：天冬氨酸磷酸基因rape、分泌磷酸二酯酶基因phod和碱性磷酸酶基因phob。

5.利用权利要求1～4任一项所述方法构建的定向合成surfactin同系物菌株...

【专利技术属性】
技术研发人员：夏小乐，高玲，苏雨萌，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：