【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物，尤其涉及一种胃梭菌及其应用。
技术介绍
1、最近几年pd-1/pd-l1阻断剂的免疫疗法已应用于胃癌治疗，其突破了1年生存期瓶颈，但多数患者仍旧获益有限。胃癌抗原性差，免疫浸润少，是传统意义上的“冷肿瘤”。在免疫检查点抑制剂（immune checkpoint inhibitors，icis）治疗中，免疫炎性型“热肿瘤”更敏感。如何将冷肿瘤转变成热肿瘤，提高对肿瘤免疫疗法的响应率和治疗效果，迫切需要解决的问题。
2、近年来，许多研究发现肿瘤免疫治疗疗效与患者肠道菌群相关，肠道微生物组成与免疫治疗的临床反应之间存在显著的关联。在肺癌，结肠癌模型等多种动物实验种证实了双歧杆菌，阿克曼菌和粪杆菌等细菌对icis治疗的增强作用。但上述热门细菌均在胃中难以存活，寻找适应胃生态环境的有效单菌种或多菌种是增强胃癌免疫治疗更佳的解决方向。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于克服现有技术的不足之处而提供一种对免疫细胞具有促炎效应，促其分泌趋化因子激活t细胞效应发挥抗肿瘤效应，使“冷”肿瘤转变为“热”肿瘤的胃梭菌及其应用。
2、为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：
3、第一方面，本专利技术提供了一种胃梭菌，所述胃梭菌为胃梭菌clostridiumventriculi sysu-12，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no. 27761，保藏日期为：2023年6月30日。
4、本专利技
5、胃梭菌clostridium ventriculi，旧称胃八叠球菌（sarcina ventriculi），是一种革兰氏阳性厌氧细菌，可产芽孢，能够在酸性环境中存活和生长，具有较好抗逆性，常见于上消化道，可在人胃中定植、增殖。胃梭菌属于梭状芽孢杆菌科，常以四分体或八分体的形式存在，直径为1.8-3.0μm。
6、作为本专利技术所述胃梭菌的优选实施方式，所述胃梭菌clostridium ventriculisysu-12的16s rrna序列如seq id no.1所示。本专利技术通过对sysu-12的16s rrna进行pcr扩增、测序、比对、建树，鉴定sysu-12为胃八叠球菌（胃梭菌）。
7、作为本专利技术所述胃梭菌的优选实施方式，所述胃梭菌clostridium ventriculisysu-12分离自pd-1抗体治疗响应的胃癌患者粪便。
8、第二方面，本申请提供了一种胃梭菌培养物，由上述胃梭菌clostridiumventriculi sysu-12制备得到。
9、作为本专利技术所述胃梭菌培养物的优选实施方式，所述胃梭菌培养物中含有胃梭菌活菌、胃梭菌菌体成分及其衍生物和胃梭菌代谢物中的至少一种。本专利技术的胃梭菌培养物为胃梭菌活菌、胃梭菌灭活菌体、含有胃梭菌的生物材料以及胃梭菌生长过程所分泌的代谢物。
10、作为本专利技术所述胃梭菌培养物的优选实施方式，所述胃梭菌培养物主要由以下方法中的至少一种制备得到：
11、方法一：刮取活化后的胃梭菌sysu-12菌体至无菌溶剂中，制备为胃梭菌sysu-12菌悬液，所述胃梭菌sysu-12菌悬液为胃梭菌培养物；
12、方法二：刮取活化后的胃梭菌sysu-12单菌落接种于培养基中培养后，离心，所得上清为胃梭菌培养物；
13、方法三：刮取活化后的胃梭菌sysu-12单菌落接种于培养基中培养后，转入生物反应器批量发酵，所得发酵液为胃梭菌培养物；
14、方法四：刮取活化后的胃梭菌sysu-12单菌落接种于培养基中培养后，离心，将所得沉淀重悬至溶剂中，115-130℃高温灭菌15-30min，所得灭活后的菌悬液为胃梭菌培养物。本专利技术的胃梭菌培养物制备方法并不唯一，只要是由胃梭菌培养得到的产品即为胃梭菌培养物。
15、作为本专利技术所述胃梭菌培养物的优选实施方式，所述制备方法的方法一中，所述溶剂包括但不限于磷酸盐缓冲液、二甲基亚砜、生理盐水、水中的至少一种。
16、作为本专利技术所述胃梭菌培养物的优选实施方式，所述胃梭菌培养物中的胃梭菌sysu-12菌体含量不低于1×106cfu。
17、第三方面，本专利技术提供了上述胃梭菌或其培养物在制备预防和/或治疗肿瘤制品中的应用。根据实验发现，灭活后的胃梭菌仍具有一定的抗肿瘤活性，这说明胃梭菌及其培养物均具有较好的抗肿瘤活性。
18、第四方面，本专利技术提供了上述胃梭菌或其培养物在制备预防和/或治疗肿瘤制品中应用。本专利技术通过动物实验发现胃梭菌具有较好的抑制微卫星稳定（mss型）结直肠癌、黑色素瘤及胃癌等冷肿瘤生长及转移的效果，能够有效防止以结直肠癌、黑色素瘤和胃癌为代表的肿瘤的生长和转移。
19、作为本专利技术所述应用的优选实施方式，所述制品包括药品、食品和保健品中的至少一种。
20、作为本专利技术所述应用的优选实施方式，所述肿瘤包括恶性肿瘤、转移性肿瘤或非转移性肿瘤中的至少一种。
21、作为本专利技术所述应用的优选实施方式，所述肿瘤的种类包括但不限于：肾上腺皮质癌、膀胱尿路上皮癌、乳腺癌、胰腺癌、宫颈癌、胆管癌、结肠癌、结直肠癌、弥漫性大b细胞淋巴瘤、多形成性胶质细胞瘤、胶质瘤、头颈癌、肾嫌色细胞癌、混合肾癌、肾癌、白血病、淋巴瘤、脑癌、肝癌、肺腺癌、肺鳞癌、间皮瘤、卵巢癌、胰腺癌、嗜铬细胞瘤、副神经节瘤、前列腺癌、直肠腺癌、肉瘤、皮肤黑色素瘤、胃癌、胃肠道间质瘤、食管癌、睾丸癌、甲状腺癌、胸腺癌、子宫内膜癌、子宫肉瘤、葡萄膜黑色素瘤和软组织肉瘤中的至少一种。
22、第五方面，本专利技术提供了上述胃梭菌或其培养物联合免疫检查点抑制剂在制备治疗肿瘤药物中的应用。
23、作为本专利技术所述应用的优选实施方式，所述免疫检查点抑制剂为作用于t细胞负性共刺激分子和/或其配体的抑制剂、作用于t细胞负性共抑制分子和/或其配体抑制剂中的至少一种。
24、作为本专利技术所述应用的优选实施方式，所述t细胞负性共刺激分子配体或t细胞负性共抑制分子配体选自ctla-4、pd-1、pd-l1、pd-l2、b7-1、b7-2、b7-h3、b7-h4、b7-h6、a2ar、ido、tim-3、btla、vista、tigit、lag-3、cd40、kir、ceacam1、garp、ps、csf1r、cd94/nkg2a、tdo、tnfr和dcr3中的至少一种。
25、第六方面，本专利技术提供了上述胃梭菌sysu-12或其培养物在制备免疫刺激剂中的应用。本专利技术通过实验发现胃梭菌能够刺激免疫细胞分泌趋化因子激活t细胞效应，加强了cd8+t细胞对肿瘤组织的浸润。
26、第七方面，本本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种胃梭菌，其特征在于，所述胃梭菌为胃梭菌Clostridium ventriculi SYSU-12，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No. 27761，保藏日期为2023年6月30日。
2.如权利要求1所述胃梭菌，其特征在于，所述胃梭菌Clostridium ventriculi SYSU-12的16S rRNA序列如SEQ ID NO.1所示。
3.如权利要求1所述胃梭菌，其特征在于，所述胃梭菌Clostridium ventriculi SYSU-12分离自PD-1抗体治疗响应的胃癌患者粪便。
4.一种胃梭菌培养物，其特征在于，由权利要求1-3任一项所述胃梭菌Clostridiumventriculi SYSU-12制备得到。
5.如权利要求4所述胃梭菌培养物，其特征在于，所述胃梭菌培养物中含有胃梭菌活菌、菌体成分及其衍生物和胃梭菌代谢物中的至少一种。
6.如权利要求4-5任一项所述的胃梭菌培养物，其特征在于，所述胃梭菌培养物主要由以下方法中的至少一种制备得到：
...【技术特征摘要】
1.一种胃梭菌，其特征在于，所述胃梭菌为胃梭菌clostridium ventriculi sysu-12，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no. 27761，保藏日期为2023年6月30日。
2.如权利要求1所述胃梭菌，其特征在于，所述胃梭菌clostridium ventriculi sysu-12的16s rrna序列如seq id no.1所示。
3.如权利要求1所述胃梭菌，其特征在于，所述胃梭菌clostridium ventriculi sysu-12分离自pd-1抗体治疗响应的胃癌患者粪便。
4.一种胃梭菌培养物，其特征在于，由权利要求1-3任一项所述胃梭菌clostridiumventriculi sysu-12制备得到。
...
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。