【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及水稻千粒重主效qtl连锁的分子标记筛选及水稻选育，更具体的说是涉及与调控水稻千粒重主效qtl连锁的分子标记及应用。
技术介绍
1、水稻产量由每株有效穗数、每穗实粒数和千粒重等性状构成，其中千粒重对产量有着直接的影响。因此，深入解析千粒重性状的遗传调控机制，培育高粒重作物，可为水稻高产育种奠定坚实的理论依据和提供可利用的基因资源。
2、有效穗数，穗粒数和粒重共同决定了水稻的产量。千粒重是影响水稻产量和品质的关键因素之一，其与粒型密切相关，是由多个基因控制的数量性状。而干旱、土壤盐碱化以及重金属污染等危害频发与人民对稻米的需求量逐渐增加间形成矛盾。因此培育并推广具有较高千粒重的水稻品种，对当前矛盾背景下保证水稻保持高产量具有重要的意义，是解决可用土地面积减少等问题导致水稻减产问题的根本措施之一，能够提高种植经济效益，保护我国粮食安全。
3、迄今为止，前人对水稻千粒重性状的遗传调控机理开展了大量的研究，研究人员在水稻12条染色体上己经发现了315个影响千粒重的主效qtl，并成功克隆了一些参与千粒重调控的基因，如qtgw2、tgw6、xiao等。尽管定位了很多千粒重qtls，但水稻千粒重由多基因控制的复杂的数量性状，虽然现在又许多研究发现了可改变千粒重的基因，但仅仅靠这些基因并不一定能直接通过千粒重调控来增加产量。因此，在改良水稻千粒重、提高产量方面，需要发现更多千粒重相关qtl，并深入了解它们的功能和相应的调控机制。为进一步改善千粒重性状，增加单产，培育高产优质的品种奠定基础。
4、目
5、因此，如何附与调控水稻千粒重的主效qtl进行定位并筛选与之连锁的分子标记是本领域技术人员亟需解决的问题。
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术提供了一种与调控水稻千粒重主效qtl连锁的分子标记及应用。
2、为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
3、本专利技术提供了水稻千粒重的主效qtl的定位方法，包括以下步骤：
4、1)以热研、华占为亲本进行杂交，通过单粒传法，获得120个稳定遗传的株系，共同组成rils群体；
5、2)考察重组自交系群体成熟期的千粒重情况；
6、3)利用实验室前期开发的大量snp和indel标记构建的遗传图谱，通过r-qtl专业软件分析整个染色体组的标记和数量性状表型值的关系，将qtl逐一定位到连锁群的相应位置，并估计其遗传效应。若检测到lod>2.5的分子标记，则认为lod值最高处对应的2个标记间存在1个qtl，并将其命名为qtgw2.1，所述的主效qtl被定位于2号染色体上，其遗传距离为40.42～90.16cm，物理距离为9429264～21032980bp，lod值达到5.28。通过开发该主效qtl紧密连锁的分子标记，来检测水稻品种或品系中是否具有千粒重相关qtl，可加快水稻优种的选育进程。
7、基于上述定位到的主效qtl，本专利技术还请求保护与调控水稻千粒重主效qtl连锁的分子标记，所述分子标记包括indel tgw-1和indel tgw-2；其中，
8、所述分子标记indel tgw-1的引物对为：
9、上游引物tgw-1-f：5’-gtacgtcacttgctgcatgg-3’，seq id no.1；
10、下游引物tgw-1-r：5’-tggctcaccacttgttggta-3’，seq id no.2；
11、所述分子标记indel tgw-2的引物对为：
12、上游引物tgw-2-f：5’-tccatgcttatggctccagt-3’，seq id no.3；
13、下游引物tgw-2-r：5’-gggccaaatttcgattttct-3’，seq id no.4。
14、作为与上述技术方案相同的专利技术构思，本专利技术还请求保护所述的分子标记在选育高千粒重水稻中的应用。
15、作为与上述技术方案相同的专利技术构思，本专利技术还请求保护一种高千粒重水稻的选育方法，过程为：
16、提取水稻dna，使用权利要求4所述的分子标记的引物对对dna进行p cr扩增，扩增产物进行电泳检测，通过带型分析水稻千粒重。
17、优选的，pcr扩增的反应体系为：上游引物0.75μl，下游引物0.75μl，dna模板1μl，mix酶12.5μl，ddh2o10μl；
18、pcr扩增的反应程序为：94℃预变性3min，94℃变性20s，57℃退火30s，72℃延伸5s，扩增35个循环，最后72℃终延伸1min。
19、本专利技术还请求保护一种高千粒重水稻选育试剂盒，包括所述的分子标记的引物对。
20、经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本专利技术以为籼稻品种华占父本、粳稻品种热研为母本的杂交f1代连续自交后得到的120个重组自交系群体为材料，利用该群体已构建的加密遗传图谱对数据进行qtl作图分析，检测到一个lod值高达5.28的qtl。分子标记辅助育种技术可以有效的解决相关基因认识不全面的问题，通过构建遗传连锁图谱和数量性状位点(quantitative trait locus，qtl)分析，能够有效地找到与千粒重相关的主效qtl紧密连锁的分子标记，使用这些标记可以对水稻后代进行筛选，在节约成本的同时大大提高了育种效率。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.与调控水稻千粒重主效QTL连锁的分子标记，其特征在于，所述分子标记包括Indeltgw-1和Indel tgw-2；其中，
2.权利要求1所述的分子标记在选育高千粒重水稻中的应用。
3.一种高千粒重水稻的选育方法，其特征在于，过程为：
4.根据权利要求3所述的一种高千粒重水稻的选育方法，其特征在于，
5.一种高千粒重水稻选育试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述的分子标记的引物对。
【技术特征摘要】
1.与调控水稻千粒重主效qtl连锁的分子标记，其特征在于，所述分子标记包括indeltgw-1和indel tgw-2；其中，
2.权利要求1所述的分子标记在选育高千粒重水稻中的应用。
3.一种...
【专利技术属性】
技术研发人员：饶玉春，朱超宇，朱哲楠，王跃星，杨惠敏，蔡依林，黄佳慧，刘之陶，汪理海，张芷宁，
申请(专利权)人：浙江师范大学，
类型：发明
国别省市：
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