【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于药用高分子材料以及新型药物制剂研究领域，具体涉及一种cdk抑制剂和抗炎药物联用的炎症微环境响应型聚合物胶束及其制备方法与应用。
技术介绍
1、类风湿性关节炎(ra)是一种常见的慢性自身免疫性疾病，以其关节滑膜炎症和血管新生为主要病理特征，关节滑膜是炎症的中心，由于大量炎症细胞的快速增殖和活化，导致滑膜组织异常扩张、血管新生、血管翳形成和骨组织的损伤；与正常滑膜组织相比，大量的炎症细胞被招募到关节后快速增殖和激活导致滑膜的形成和滑膜的增厚，打破氧化剂和抗氧化剂之间的平衡，导致氧化应激状态和局部组织的缺氧从而诱发炎症，加剧ra的进展。其中中性粒细胞等多种免疫细胞浸润关节滑膜导致其持续性发炎是炎症爆发的主要罪魁祸首，其通过不断释放趋化因子促进自我招募和形成中性粒细胞外陷阱(nets)的过程以及与炎症内皮间的级联黏附作用是阻碍其被组织清除的关键问题。因此，及时有效地清除炎症微环境的中性粒细胞具有重塑微环境稳态的重要意义。
2、鉴于类风湿性关节炎微环境具有低氧、偏酸、高ros等生理性特点，响应型材料的开发已经取得了长效的进步，这些材料可以加工成有吸引力的治疗平台，用于对大量疾病进行靶向治疗。因此针对炎症微环境中活性氧过量表达的特点，设计一种含有活性氧响应性结构的高分子聚合物材料不仅可以作为药物输送载体进行有针对性的治疗，也可以作为一种智能响应性材料来抑制炎症的发生并促进损伤组织的正常修复。含有-nh2的酮缩硫醇是一种结构对称的化合物并具备良好的活性氧响应性，含有该结构的聚合物材料可实现体内的活性氧响应性降解。p>
3、此外，基于抗炎药物的单一疗法，因其严重的毒副作用及多药耐药性已无法满足临床炎症疾病治疗的需求。目前，具有不同抗炎作用机制的两种或多种药物联合治疗可以有效克服单一疗法的弊端，成为临床治疗类风湿关节炎的一种有效策略。甲基泼尼松龙作为一种小分子糖皮质激素药物，具有强效的抗炎作用，改善ra病理特征，能够缓解关节腔的炎症状态，调节炎症微环境异常状态，对关节修复有一定的作用，降低系统损害的风险。但随着身体逐渐适应，糖皮质激素药物可能变得耐受或无效，同时长期高剂量应用会增加骨质疏松、心脏病、糖尿病和肥胖的风险。副作用的出现极大地限制了糖皮质激素药物在ra临床治疗中的应用，同时现有研究的新型免疫药物细胞周期蛋白依赖性激酶(cdk)抑制剂在体外能够促进非增殖性炎症细胞的凋亡，并通过在体内促进中性粒细胞的凋亡和随后的安全清除来加速炎症的消退。因此，将糖皮质激素甲基泼尼松龙与cdk抑制剂r-roscovitine联用是提高临床抗炎疗效的重要策略。但如何提供一种能满足将糖皮质激素甲基泼尼松龙和cdk抑制剂有效共载及体内共递送协同抑制炎症的需要的组合物是本领域人员亟待解决的问题。
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术公开提供一种cdk抑制剂和抗炎药物联用的炎症微环境ros智能响应型的聚合物纳米胶束及其制备方法，用于实现联合递送甲基泼尼松龙和其他药物的高效共载。
2、为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
3、一种cdk抑制剂和抗炎药物联用的炎症微环境响应型聚合物胶束，所述聚合物胶束包括低分子量肝素-tk键-甲基泼尼松龙琥珀酸酯载体以及载体包载的cdk抑制剂、抗炎药物；其中，
4、所述cdk抑制剂为r-roscovitine、ribociclib、at7519中的一种或几种混合；
5、所述低分子量肝素-酮缩硫醇-甲基泼尼松琥珀酸酯的分子结构为：
6、
7、n为正整数。
8、所述tk键的接枝率为40％-50％，甲基泼尼松龙琥珀酸酯的含量占所述聚合物胶束的10％-20％。
9、优选的，所述tk键结构如下：
10、
11、本专利技术利用大分子低分子量肝素、tk键和甲基泼尼松龙共同制备聚合物前药胶束，得到包载cdk抑制剂的前药胶束，其中低分子量肝素的分子量为3500-5000da。
12、本专利技术中cdk抑制剂与甲基泼尼松龙的质量比为1:1-1:2；cdk抑制剂与聚合物载体的质量比为1:5-1:30。
13、本专利技术的第二个目的是提供一种如上所述的cdk抑制剂和抗炎药物联用的炎症微环境响应型聚合物胶束的制备方法。
14、为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
15、一种cdk抑制剂和抗炎药物联用的炎症微环境响应型聚合物胶束的制备方法，具体包括如下步骤：
16、(1)ros响应型中间体酮缩硫醇tk键的合成：将半胱胺盐酸盐溶解于甲醇中，逐滴加入三氟乙酸乙酯和三乙胺反应过夜，用冰乙酸中和碱性停止反应并旋转蒸发除去有机试剂后加入丙酮和乙腈，冰浴冷却至0℃，加入三氟化硼乙醚后0～4℃反应2h，然后将反应体系用质量分数5％和15％碳酸钠溶液洗涤，并经过乙酸乙酯萃取、饱和碳酸钠溶液洗涤及无水硫酸钠干燥后，以体积比为石油醚：正己烷：乙酸乙酯＝10:1～7:1为洗脱剂经硅胶柱层析分离纯化，得到酮缩硫醇tk键的前体药物；随后将所述酮缩硫醇tk键的前体药物溶于6m氢氧化钠溶液于室温下反应2-6h后用二氯甲烷萃取旋转蒸发得到琥珀色油状物为酮缩硫醇tk键；
17、(2)低分子量肝素-tk键的合成：将低分子量肝素溶于pbs中室温溶解，加入催化剂反应活化羧基3h后，将dmf溶解的tk键逐滴加入到低分子量肝素的pbs溶液中，室温反应12-72h后用1000-4000da的透析袋透析三天，经冷冻干燥机冻干后得到低分子量肝素-tk键备用；
18、(3)甲基泼尼松龙琥珀酸酯的合成：将甲基泼尼松龙和dmap溶于超干吡啶中，室温下反应10-30分钟后，加入丁二酸酐室温下反应12-24h终止反应，并用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥后，使用体积比为二氯甲烷：甲醇＝10:1过柱层析分离得到甲基泼尼松龙琥珀酸酯；
19、(4)低分子量肝素-tk键-甲基泼尼松龙琥珀酸酯的合成：将步骤(3)合成的甲基泼尼松龙琥珀酸酯溶于dmf中并加入催化剂，室温下反应3h后在冰浴条件下加入步骤(2)得到的低分子量肝素-tk键水溶液体系，维持冰浴条件下反应12-72h，终止反应后用1000-4000da的透析袋纯水透析三天后使用冷冻干燥机冻干后得到低分子量肝素-tk键-甲基泼尼松龙琥珀酸酯；
20、(5)炎症微环境内高ros水平响应型聚合物胶束的制备
21、将步骤(4)制备的低分子量肝素-tk键-甲基泼尼松龙琥珀酸酯溶于纯水中，使其浓度为1mg/ml，搅拌5-12h后即可。
22、(6)载cdk抑制剂的大分子聚合物胶束的制备
23、将步骤(4)制备的低分子量肝素-tk键-甲基泼尼松龙琥珀酸酯和cdk抑制剂按照质量比5：1，10:1，15:1和20:1的比例溶于等体积的dmso:纯水的混合溶液中，待旋转蒸发干燥过夜后加纯水复溶即得所述的载cdk抑制剂的大分子聚合物胶束。
24、可选地，步骤(1)中低分子量肝素与酮缩硫本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种CDK抑制剂和抗炎药物联用的炎症微环境响应型聚合物胶束，其特征在于，所述聚合物胶束包括低分子量肝素-TK键-甲基泼尼松龙琥珀酸酯载体及由所述载体包载的CDK抑制剂；其中，
2.根据权利要求1所述的CDK抑制剂和抗炎药物联用的炎症微环境响应型聚合物胶束，其特征在于，所述TK键的接枝率为40％-50％，甲基泼尼松龙琥珀酸酯的含量占所述聚合物胶束的10％-20％；
3.一种如CDK抑制剂和抗炎药物联用的炎症微环境响应型聚合物胶束的制备方法，其特征在于，所述方法具体包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述低分子量肝素与酮缩硫醇反应的摩尔比为1:2-1:8，所述低分子量肝素与催化剂的摩尔比为1:1-1:5，所述催化剂为EDCI、DMAP、NHS中的任意一种或多种混合。
5.一种如权利要求1所述的CDK抑制剂和抗炎药物联用的炎症微环境响应型聚合物胶束或如权利要求3所述方法制备的CDK抑制剂和抗炎药物联用的炎症微环境响应型聚合物胶束在药物制剂中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述C
7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述CDK抑制剂在抑制中性粒细胞黏附和促进中性粒细胞凋亡中的应用。
8.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述CDK抑制剂和抗炎药物联用的炎症微环境响应型聚合物胶束在制备恢复关节和滑膜、减少滑膜炎症细胞浸润的药物中的应用。
9.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述CDK抑制剂和抗炎药物联用的炎症微环境响应型聚合物胶束在制备保护关节软骨和骨组织的药物中的应用。
10.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述CDK抑制剂和抗炎药物联用的炎症微环境响应型聚合物胶束在制备抗自身免疫性疾病药物中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种cdk抑制剂和抗炎药物联用的炎症微环境响应型聚合物胶束，其特征在于，所述聚合物胶束包括低分子量肝素-tk键-甲基泼尼松龙琥珀酸酯载体及由所述载体包载的cdk抑制剂；其中，
2.根据权利要求1所述的cdk抑制剂和抗炎药物联用的炎症微环境响应型聚合物胶束，其特征在于，所述tk键的接枝率为40％-50％，甲基泼尼松龙琥珀酸酯的含量占所述聚合物胶束的10％-20％；
3.一种如cdk抑制剂和抗炎药物联用的炎症微环境响应型聚合物胶束的制备方法，其特征在于，所述方法具体包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述低分子量肝素与酮缩硫醇反应的摩尔比为1:2-1:8，所述低分子量肝素与催化剂的摩尔比为1:1-1:5，所述催化剂为edci、dmap、nhs中的任意一种或多种混合。
5.一种如权利要求1所述的cdk抑制剂和抗炎药物联用的炎症微环境响应型聚合物胶束或如权利要求...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘艳华，安敏，刘子涵，杨婷，张晓洁，杨嘉玉，
申请(专利权)人：宁夏医科大学，
类型：发明
国别省市：
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