【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于畜牧动物养殖及动物新品种，具体涉及一种基于地方优良品种的无特定病原鸭的培育方法。
技术介绍
1、我国是世界第一养鸭大国，养鸭历史悠久，地方品种丰富。2021年全国肉鸭出栏量约为41.2亿只，占全世界总出栏量的68％。近年来，鸭病如鸭肝炎、鸭短喙-侏儒综合征、鸭呼肠孤病毒、鸭疫里默氏杆菌等老病、新病不断涌现，感染情况复杂，防控形势任重而道远。目前，无论是疫苗研制还是生产检验都缺乏标准的实验动物-无特定病原(specificpathogen free，spf)鸭。
2、无特定病原体动物(specific pathogen free，spf)是指不携带主要潜在感染或条件致病和对科学实验干扰大的病原的动物。随着生命科学研究的飞速发展和人民对生活品质的更高需求，科学研究和疫苗生产都对实验动物质量的要求越来越高。国家已规定所有的鸡活疫苗都需要使用spf鸡胚来生产。中国作为畜牧大国，生物科技及其产业发展迅速，特别是新兽药的研发日益增多，所需的高等级实验动物不足。以spf鸭为例，目前仅是哈尔滨兽医研究所研究取得一些进展。为了满足培育、科研、疫苗研发等研究基础的支持，建立无特定病原体的spf鸭群具有重要意义。
3、spf鸭的培育过程需严格进行防控，基于其稳定性和无特定病原体状态的首要目的，目前尚未见能够大规模推广其培育生产的方法报道，尤其是对特定病原体种类数量中有害病原体种类有限，这直接影响了spf鸭的品质。
4、本专利技术拟选定我国具有代表性的地方鸭品种，通过病原监测、疫苗免疫和药物预防、物理屏
技术实现思路
1、为了解决上述问题，提供了一种基于地方优良品种的无特定病原鸭的培育方法，选定我国具有代表性的地方鸭品种，通过从隔离屏障饲养环境、病原微生物监测、饲料饮水灭菌、生物安全等各个角度入手，对种鸭进行筛选，成功培育了无特定病原体spf鸭，解决了现有技术中存在的问题。
2、本专利技术提供了如下技术方案：
3、一种基于地方优良品种的无特定病原鸭的培育方法，包括如下步骤：
4、(1)屏障隔离饲养
5、选取山东省优良地方鸭品种，隔离器饲养，严格保证饲料、饮水以及物品无菌、阻断外界环境污染和再感染的可能性；定时进行病原监测，及时淘汰携带病原的鸭；
6、①饲料消毒
7、spf鸭用饲料采用经过灭菌的全价饲料；灭菌饲料通过无菌通道传送，并且严格防止中间过程的污染，现灭菌现用；
8、②饮用水消毒
9、spf鸭用饮用水采用符合饮用水标准的无菌水，或经反渗透或超滤膜水处理机处理的水；
10、③其他物品消毒
11、进入鸭舍所有物品经高温消毒或平铺后紫外灭菌30min以上，再进入养殖区；
12、④人员
13、饲养人员保持固定；饲养员穿着无菌防护服，进入饲养环境走固定通道，工作前消毒；
14、⑤饲养场所消毒地面用无菌水冲洗，定期喷洒消毒液；粪便采用制板式袋装，无菌处理；⑥种蛋处理每天收蛋，擦拭粪便后，新洁尔灭消毒；种蛋贮存室温度在15℃左右，相对湿度60％-80％；贮存时间不超过7天；
15、(2)病原监测
16、设计spf鸭微生物学监测项目，开展针对spf鸭病原的全群监测净化工作；监测项目包括的监测病原种类为：鸭沙门氏菌、禽多杀性巴氏杆菌、鸭疫里默氏杆菌、禽流感病毒、禽1型副黏病毒、鸭肠炎病毒、鸭甲型肝炎病毒、鸭腺病毒a型、网状内皮组织增生症病毒、i群禽腺病毒、鸭坦布苏病毒、鸭星状病毒；
17、(3)经全群监测，以上监测病原种类检测均为阴性，确定为12种无特定病原的鸭群动物模型成立。
18、进一步地，步骤(2)中监测病原沙门氏菌、禽多杀性巴氏杆菌、鸭疫里默氏杆菌、禽流感病毒分别按照国家相关标准ny/t 2838、ny/t 563、db37/t3880、sn/t 1182标准执行；其余病原按照pcr或rt-pcr方法监测。
19、进一步地，病原监测用引物如下：
20、禽1型副黏病毒引物：f-gtcccaaataccggagacct；r-ttgtttgccacaaccctacag，预期长度152bp。
21、鸭肠炎病毒dev引物：f-gagcgtatttagatgaaactgc；r-tgttgtgattgttcc，预期长度416bp。
22、鸭甲型肝炎病毒dhav-f：gccccatccaatattgact；dhav-r：gttccactccttcagtagt，预期长度470bp。
23、鸭腺病毒a型duck adenovirus a(edsv)：gagctggaattgatgctgcggctacgctgataccgcttct预期长度956bp。
24、网状内皮组织增生症病毒引物：f-ccccgaccaagaggagtaga；r-atgacccggtggaggacata预期长度372bp。
25、i群禽腺病毒fadv引物：f-tgggacagatgaccaacgtg，r-tcgtagccgtcgttgttgaa，预期长度664bp。
26、坦布苏病毒tmuv引物：f:atttggaacgcaaccacagc；r:aaagtggcaccctgaccaaa，预期长度751bp。
27、星状病毒astv引物：f-gctgcacaagttggttggac；
28、r-gagtaatctgagcgtcggca，预期长度400bp。
29、进一步地，步骤(1)山东省优良地方鸭品种为山东麻鸭；隔离器饲喂条件：0-3日龄，温度不低于30℃，不高于35℃；4-14日龄在28-30℃之间，15日龄-2月龄在25℃左右，随后保持在20℃；湿度控制在60-70％；洁净度为5级标准。
30、上述隔离器的安装环境和设备运行按照gb14925-2010执行。
31、进一步地，步骤(1)中①灭菌方法采用高温高压灭菌法或钴60射线照射灭菌法；②中无菌水消毒灭菌方法采用酸化法，用0.1％盐酸处理。
32、进一步地，步骤(1)中④人员更衣、淋浴15分钟以上进入固定通道，穿戴专用鞋、隔离帽、口罩、无菌手套或酒精消毒手部后工作。
33、进一步地，步骤(1)还包括在饲养过程中进行疫苗免疫和药物预防的步骤，所述疫苗免疫是对种鸭群免疫禽流感、鸭病毒性肝炎、新城疫灭活疫苗；所述药物预防采用在夏季饮水中加入用于增强鸭群免疫力的中草药和多维素。
34、本专利技术的有益效果：
35、本专利技术的培育方法是在屏障隔离饲养的基础上，严格实现病原微生物监测、饲料饮水灭菌、生物安全等，对种鸭进行筛选成功培育了无特定病原体spf鸭。该培育方法实现了稳定、规模推广无特定病原体鸭的实施方本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种基于地方优良品种的无特定病原鸭的培育方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的基于地方优良品种的无特定病原鸭的培育方法，其特征在于，步骤(2)中监测病原沙门氏菌、禽多杀性巴氏杆菌、鸭疫里默氏杆菌、禽流感病毒分别按照国家相关标准NY/T 2838、NY/T 563、DB37/T3880、SN/T 1182标准执行；其余病原按照PCR或RT-PCR方法监测。
3.根据权利要求1所述的基于地方优良品种的无特定病原鸭的培育方法，其特征在于，步骤(1)山东省优良地方鸭品种为山东麻鸭；隔离器饲喂条件：0-3日龄，温度不低于30℃，不高于35℃；4-14日龄在28-30℃之间，15日龄-2月龄在23℃-26℃，随后保持在20℃；湿度控制在60％-70％；洁净度为5级标准。
4.根据权利要求1所述的基于地方优良品种的无特定病原鸭的培育方法，其特征在于，步骤(1)中①灭菌方法采用高温高压灭菌法或钴60射线照射灭菌法；②中无菌水消毒灭菌方法采用酸化法，用0.1％盐酸处理。
5.根据权利要求1所述的基于地方优良品种的无特定病原鸭的
6.根据权利要求1所述的基于地方优良品种的无特定病原鸭的培育方法，其特征在于，步骤(1)还包括在饲养过程中进行疫苗免疫和药物预防的步骤，所述疫苗免疫是对种鸭群免疫禽流感、鸭病毒性肝炎、新城疫灭活疫苗；所述药物预防采用在夏季饮水中加入用于增强鸭群免疫力的中草药和多维素。
...【技术特征摘要】
1.一种基于地方优良品种的无特定病原鸭的培育方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的基于地方优良品种的无特定病原鸭的培育方法，其特征在于，步骤(2)中监测病原沙门氏菌、禽多杀性巴氏杆菌、鸭疫里默氏杆菌、禽流感病毒分别按照国家相关标准ny/t 2838、ny/t 563、db37/t3880、sn/t 1182标准执行；其余病原按照pcr或rt-pcr方法监测。
3.根据权利要求1所述的基于地方优良品种的无特定病原鸭的培育方法，其特征在于，步骤(1)山东省优良地方鸭品种为山东麻鸭；隔离器饲喂条件：0-3日龄，温度不低于30℃，不高于35℃；4-14日龄在28-30℃之间，15日龄-2月龄在23℃-26℃，随后保持在20℃；湿度控制在60％-70％；洁净度为...
【专利技术属性】
技术研发人员：袁小远，李峰，李桂明，张玉霞，孟凯，董雯雯，张世栋，徐怀英，李玉峰，于可响，田野，
申请(专利权)人：山东省农业科学院家禽研究所山东省无特定病原鸡研究中心，
类型：发明
国别省市：
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