【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术提供了靶向腺苷激酶的新的反义寡核苷酸。该化合物可用于治疗神经疾病(神经疾病，neurological diseases)例如癫痫。
技术介绍
1、癫痫是一种严重的慢性神经障碍，其特征是反复自发性癫痫发作，影响全球约5000万人。
2、目前可用的抗癫痫药物通常可以控制三分之二患者的癫痫发作，但可能对潜在的病理生理学没有影响。其余三分之一的癫痫患者要么对现有药物产生耐药性，要么遭受目前可用药物的严重副作用。
3、脑部手术、迷走神经刺激、颅内刺激和生酮饮食是避免无法接受药物治疗的患者癫痫发作的替代方案。
4、有症状(获得性)癫痫的发展被认为涉及离子通道和神经递质受体表达的改变、突触重塑、炎症、神经胶质增生和神经元死亡等。然而，针对这些过程的抗癫痫发作干预措施很少在体内表现出足够的功效，而且我们对细胞和分子机制的理解仍然不完整。目前尚无在可能导致癫痫发展的脑损伤之后的预防性治疗(“抗癫痫发作”)。类似地，对于癫痫持续状态(se)没有特异性神经保护治疗方法，或治疗急性神经损伤可能导致脑损伤或癫痫，例如中风或创伤。
5、因此，对于专门针对癫痫和可能导致脑损伤发展的其它神经损伤的过程并且克服一些上述问题的治疗或预防措施存在高度未满足的需求。
6、腺苷和腺苷激酶
7、腺苷是一种特性已知的内源性抗惊厥剂和大脑癫痫发作终止剂。腺苷影响癫痫发作(发作发生)、癫痫的发展及其进展(癫痫发生)。腺苷代谢的适应不良变化，特别是星形胶质细胞酶腺苷激酶(adk)表达的增加，在癫痫发
8、哺乳动物细胞中表达两种n末端不同的adk亚型(同种型，同工型，isoform)。adk在调节细胞内和间质的嘌呤核苷腺苷浓度方面发挥着核心作用，表现出强大的心脏保护和神经保护活性。癫痫发作或中风后，腺苷激酶的表达在大脑中经历快速协调变化，导致腺苷急剧激增，从而最大限度地减少对大脑的损害。哺乳动物细胞中腺苷激酶的两种亚型仅在其n末端有所不同。长亚型(adk-l)含有额外的20-21个氨基酸，而不是adk短亚型(adk-s)的前四个氨基酸。adk-l中的n末端延伸起到核定位信号的作用。因此，在两种亚型中，adk-l靶向细胞核，而adk-s定位于细胞质。(cui et al,2011,molecular characterization ofchinese hamster cells mutants affected in adenosine kinase and showing novelgenetic and biochemical characteristics,bmc biochemistry 2011.)
9、腺苷发挥多种心脏保护作用。此外，adk表达失调以及由此导致的腺苷稳态破坏与多种神经系统和神经精神病理有关。星形胶质细胞adk是预测和预防癫痫发作的一个有前景的靶点。在由侧面液体冲击损伤引起的严重创伤性脑损伤(tbi)的大鼠模型中也发现了星形胶质细胞增生和相关的adk过表达。此外，adk表达水平关键性决定大脑对中风影响的脆弱性。腺苷及其受体激动剂也可以增强睡眠和睡眠强度，而诸如咖啡因或茶碱等拮抗剂则可以诱导觉醒。
10、根据boison et al.，adk过表达与认知障碍之间的联系可能与神经疾病具有病理相关性，其中adk过表达已被证实(癫痫)或怀疑(阿尔茨海默病、帕金森病、肌萎缩性侧索硬化症)。精神分裂症的腺苷假说假设腺苷信号功能低下可能导致精神分裂症的病理生理学。在糖尿病中，多种组织中的腺苷稳态被严重改变。
11、此外，腺苷受体信号传导的稳态对于炎症的调节和促炎细胞因子的释放至关重要。腺苷受体信号传导的稳态对于ibd中的慢性炎症反应也具有至关重要的意义。
12、腺苷/adk调节系统在癌症中的作用可能取决于癌症的类型。发现肝癌细胞中adk活性降低，表明腺苷增加可能为肝癌提供了选择性优势。(boison et al.,2013,adenosinekinase:exploitation for therapeutic gain,pharmacol rev 65:906-943,july 2013.)
13、腺苷受体
14、抑制性腺苷a1受体的激活对于癫痫、慢性疼痛和脑缺血有益，而促进性a2a受体的抑制则具有深远的神经保护作用。(boison et al,2008,adenosine as a neuromodulatorin neurological diseases,curr opin pharmacol,2008february.)
15、腺苷是一种神经调节剂，通过最丰富的抑制性腺苷a1受体(a1r)和数量较少但广泛的促进性a2ar发挥作用。人们普遍认为，a1r在神经保护中发挥着关键作用，因为它们减少谷氨酸释放并使神经元超极化。(rodrigo a.cunha,2005,neuroprotection byadenosine in the brain:from a1 receptor activation to a2areceptor blockade,purinergic signalling(2005)1:111-134.)
16、通过抑制腺苷激酶或用鞘内选择性a3ar激动剂激活a3ar来恢复脊髓中的a3ar信号传导，可以预防建立化疗诱发的神经性疼痛(cinp)。(wahlman et al,2018,chemotherapy-induced pain is promoted by enhanced spinal adenosine kinaselevels via astrocyte-dependent mechanisms,pain.2018jun；159(6):1025-1034.)
17、癫痫、神经保护和精神障碍
18、腺苷具有抗惊厥和神经保护作用。(patodia et al,2020,adenosine kinase andadenosine receptors a1r and a2ar in temporal lobe epilepsy and hippocampalsclerosis and association with risk factors for sudep,epilepsia,page 787-797.)
19、使用腺苷激酶抑制剂的局灶腺苷增强疗法已被证明可以有效减少动物模型和从难治性癫痫患者的各种病因切下的人脑组织中的癫痫发作。除了减少癫痫发作之外，腺苷增强疗法还可以缓解合并症，如睡眠、认知或抑郁。adk减少的转基因小鼠能够抵抗由急性脑损伤引起的癫痫发生。(wang et al,2020,role of adenosine kinase inhi本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种与ADK mRNA(SEQ ID NO:1)互补的反义寡核苷酸，包含长度为10-30个核苷酸的序列，其中所述反义寡核苷酸具有至少一个亲和力增强核苷酸类似物，并且其中所述反义寡核苷酸包含至少一个硫代磷酸酯核苷间键。
2.根据权利要求1)所述的反义寡核苷酸，其中所述反义寡核苷酸对ADK-L具有特异性并且与SEQ ID NO:2、120、121或122-132中的任一个互补。
3.根据权利要求1)-2)中任一项所述的反义寡核苷酸，其中所述反义寡核苷酸含有至少5个连续DNA核苷酸的连续链段。
4.根据权利要求1)-2)中任一项所述的反义寡核苷酸，其中所述反义寡核苷酸不含有超过4个DNA核苷酸的连续链段，例如不超过3个连续DNA核苷酸。
5.根据权利要求1)-4)中任一项所述的反义寡核苷酸，其中所述反义寡核苷酸包含长度为14-19个核苷酸的序列。
6.根据权利要求1)-5)中任一项所述的反义寡核苷酸，其中所述亲和力增强核苷酸类似物选自LNA、三环DNA、2'-氟、2'-O-甲基、2'甲氧基乙基(2'MOE)、2'环乙基(c
7.根据权利要求1)-6)中任一项所述的反义寡核苷酸，其中所述反义寡核苷酸包含至少一个LNA。
8.根据权利要求1)-7)中任一项所述的反义寡核苷酸，其中所述反义寡核苷酸是SEQID NO 3-73中的任一个或者SEQ ID NO 74-100中的任一个或者SEQ ID NO 133-147中的任一个。
9.根据权利要求1)-8)中任一项所述的反义寡核苷酸，其中所述反义寡核苷酸是SEQID NO:10、11、14、16、18、23、36、41、42、43、64、65、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146或147中的任一个。
10.根据权利要求9)所述的反义寡核苷酸，其中所述反义寡核苷酸是以下SEQ ID NO中的任一个：
11.根据权利要求1)-10)中任一项所述的反义寡核苷酸，其中所述寡核苷酸连接至递送载体或配制用于靶向递送。
12.根据权利要求1)-11)中任一项所述的反义寡核苷酸，其中所述寡核苷酸与另一种药物组合使用。
13.根据权利要求1)-12)中任一项所述的反义寡核苷酸，用于作为药物使用。
14.根据权利要求1)至13)所述的用于使用的反义寡核苷酸或组合物，其中用途是用于治疗依赖于ADK-L表达的CNS或PNS的疾病。
15.根据权利要求1)至14)中任一项所述的用于使用的反义寡核苷酸或组合物，其中CNS或PNS的疾病是神经障碍。
16.根据权利要求1)至15)中任一项所述的用于使用的反义寡核苷酸或组合物，其中神经障碍是癫痫。
...【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种与adk mrna(seq id no:1)互补的反义寡核苷酸，包含长度为10-30个核苷酸的序列，其中所述反义寡核苷酸具有至少一个亲和力增强核苷酸类似物，并且其中所述反义寡核苷酸包含至少一个硫代磷酸酯核苷间键。
2.根据权利要求1)所述的反义寡核苷酸，其中所述反义寡核苷酸对adk-l具有特异性并且与seq id no:2、120、121或122-132中的任一个互补。
3.根据权利要求1)-2)中任一项所述的反义寡核苷酸，其中所述反义寡核苷酸含有至少5个连续dna核苷酸的连续链段。
4.根据权利要求1)-2)中任一项所述的反义寡核苷酸，其中所述反义寡核苷酸不含有超过4个dna核苷酸的连续链段，例如不超过3个连续dna核苷酸。
5.根据权利要求1)-4)中任一项所述的反义寡核苷酸，其中所述反义寡核苷酸包含长度为14-19个核苷酸的序列。
6.根据权利要求1)-5)中任一项所述的反义寡核苷酸，其中所述亲和力增强核苷酸类似物选自lna、三环dna、2'-氟、2'-o-甲基、2'甲氧基乙基(2'moe)、2'环乙基(cet)、una、2'氟和构象受限的核苷(crn)的列表。
7.根据权利要求1)-6)中任一项所述的反义寡核苷酸，其中所述反义寡核苷酸包含至少一个lna。
8.根据权利要求1)-7)中任一项所述的反义寡核苷酸，其中所述反义寡核苷酸是se...
【专利技术属性】
技术研发人员：马库斯·萨卡里·考皮宁，吕克·佩德森，斯蒂娜·诺曼·汉森，亨里克·瓦尔德马尔·克利特高德，
申请(专利权)人：神经微核糖核酸治疗有限公司，
类型：发明
国别省市：
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