【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物采油领域，具体涉及一株副地衣芽孢杆菌及其在石油开采中作为驱油剂应用。
技术介绍
1、随着社会经济的快速发展，作为人类现代社会的动力燃料、化工原料和重要战略物资，石油的需求量与日俱增。目前，我国大部分油田都采用注水增加油藏能量的开发方式。然而，低渗透油田随着开发的进展，含水率越来越高，开发难度越来越大，开发好此类油田对维持现有石油稳定具有重要的意义。
2、表面活性剂驱油技术(surfactant enhanced oil recovery，简称seor)是一种增强石油开采的技术方法，通过使用表面活性剂来改变油水界面的物理和化学特性，以便更有效地驱出地下储层中的石油。这项技术可以应用于传统石油开采、重质油开采和含油页岩开采等各种情况，常被用于在三次采油中,是有效利用聚合物的粘度和活性剂活性的驱油技术，能够提高采油效率。与单一注聚相比，驱油技术能更加有效地获得降水增油效果,更大幅度地提高采收率。
3、表面活性剂是一类化学物质，具有可以降低液体表面张力的特性，可以使油水界面的张力降低，从而减少油在储层岩石中的附着力和粘附力。生物表面活性剂是一些特定微生物在其代谢过程中分泌出的具有一定表面活性的代谢产物，如糖脂、脂肽、磷脂、脂肪酸中性脂和结合多糖、蛋白质等复合物。生物表面活性剂中含有亲水基团和亲油基团，相较于化学表面活性剂，具有可再生、环保、低毒性和降解性、强适应性和多功能性等特性。
4、在seor技术中，表面活性剂被注入到油田储层中，与原油和水混合形成乳液或胶束。乳液或胶束能够将原本
5、微生物驱油是一项利用微生物及代谢产物来提高原油采收率的综合技术，相比普通的驱油方法，具有适用范围广、工艺简单、成本低、污染小等优点，具体来说有4个原因：生物表面活性剂可以明显地降低油水接触面上的表面张力，使油滴变形，增加了原油在地层中的流速；使选择性润湿接触角变小，使岩石颗粒表面水润湿性加强，使岩石更加亲水；可以清洗掉覆盖在岩石表面的原油；使地层孔隙毛管中的弯液面发生变形，加强毛管力作用，加快渗吸的速度。生物驱油技术目前已经成为最具发展前景的三次采油技术之一。
6、目前报道的微生物驱油技术主要是使用铜绿假单胞菌(pseudomonasaeruginosa)，枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)。本专利技术中分离筛选得到一株副地衣芽孢杆菌(bacillus paralicheniformis)，其产生的表面活性剂能耐高盐和高温环境，在石油乳化和微生物驱油中具有重要的应用价值。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一株副地衣芽孢杆菌及其在石油乳化及微生物驱油中的应用。
2、本专利技术所提供的副地衣芽孢杆菌为副地衣芽孢杆菌(bacillusparalicheniformis)nian2，cgmcc no.28120。
3、所述副地衣芽孢杆菌(bacillus paralicheniformis)nian2，分类命名为副地衣芽孢杆菌bacillus paralicheniformis，已于2023年8月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称cgmcc no.28120，地址为：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，保藏编号为cgmcc no.28120。
4、所述副地衣芽孢杆菌(bacillus paralicheniformis)nian2具有以下特征：
5、温度30℃下，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长7d，菌落为白色、圆形、无光泽、不透明、有隆起、波状边缘，可在高盐察氏培养基上生长。最适产生表面活性剂的碳源为牛肉膏、氮源为硝酸钠。
6、本专利技术还提供一种微生物制剂，其活性成分为所述的副地衣芽孢杆菌(bacillusparalicheniformis)nian2和/或其发酵液。
7、其中，所述发酵液的制备步骤为：
8、步骤1：将副地衣芽孢杆菌(bacillus paralicheniformis)nian2接种于种子液培养基中，150rpm，30℃恒温摇床培养24-26h获得种子液；
9、步骤2：将步骤1中获得的种子液按体积比1％的比例转接到以牛肉膏为碳源，以硝酸钠为氮源的发酵培养基中，150rpm，30℃恒温摇床培养72-96h获得发酵液；
10、其中，步骤1的种子液培养基为牛肉膏蛋白胨培养基，具体配方为：牛肉膏3g，蛋白胨10g，nacl 5g，ph 7。
11、优选的，步骤2的发酵培养基为葡萄糖10g/l，nano3 5g/l，k2hpo4 5g/l，kh2po42g/l，(nh4)2so4 0.2g/l，nacl 0.1g/l，mgso4 0.2g/l，ph 8.0。
12、本专利技术还提供所述的副地衣芽孢杆菌在产生的表面活性剂中的应用。
13、本专利技术所述的副地衣芽孢杆菌在微生物驱油和/或石油乳化中的应用也属于本专利技术的保护范围。
14、本专利技术还提供一种促进所述的副地衣芽孢杆菌在产生表面活性剂的方法，其特征在于，包括下述步骤：
15、步骤1：将副地衣芽孢杆菌(bacillus paralicheniformis)nian2接种于种子液培养基中，150rpm，30℃恒温摇床培养24-26h获得种子液；
16、步骤2：将步骤1中获得的种子液按体积比1％的比例转接到以牛肉膏为碳源，以硝酸钠为氮源的发酵培养基中，150rpm，30℃恒温摇床培养72-96h获得发酵液；
17、其中，步骤1的种子液培养基为牛肉膏蛋白胨培养基；步骤2的发酵培养基为葡萄糖10g/l，nano3 5g/l，k2hpo4 5g/l，kh2po4 2g/l，(nh4)2so4 0.2g/l，nacl 0.1g/l，mgso40.2g/l，ph 8.0。
18、本专利技术的有益效果：
19、本专利技术中的副地衣芽孢杆菌(bacillus paralicheniformis)nian2对高盐环境具有良好的耐受性，在固体高盐察氏培养基中(nacl 60g/l)，都能进行生长与繁殖。
20、本专利技术所提供的副地衣芽孢杆菌(bacillus paralicheniformis)nian2能产生表面活性剂，10μl该菌株发酵液对石油产生的排油圈直径为7.9cm。
21、本专利技术所提供的副地衣芽孢杆菌(bacillus paralicheniformis)nian2在牛肉膏蛋白胨培养基培养了3天的种子液20μl可以在油膜中形成6-8cm的排油圈，在发酵培养基培养了3天的发酵液10μl可以在油膜中形成7-9cm的排油圈。
22、本专利技术所提供的副地衣芽孢杆菌(bacillus paralicheniformis)nian2具有耐盐特性，该菌株产生的表面活性剂对ca2+比较本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一株副地衣芽孢杆菌，其特征在于，名称为副地衣芽孢杆菌(Bacillusparalicheniformis)nian2，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.28120。
2.一种微生物制剂，其活性成分为权利要求1所述的副地衣芽孢杆菌(Bacillusparalicheniformis)nian2和/或其发酵液。
3.根据权利要求2所述的微生物制剂，所述发酵液的制备步骤为：
4.根据权利要求3所述的微生物制剂，其特征在于，
5.权利要求1所述的副地衣芽孢杆菌在产生的表面活性剂中的应用。
6.权利要求1所述的副地衣芽孢杆菌在微生物驱油中的应用。
7.权利要求1所述的副地衣芽孢杆菌在石油乳化中的应用。
8.一种促进权利要求1所述的副地衣芽孢杆菌在产生表面活性剂的方法，其特征在于，包括下述步骤：
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，
【技术特征摘要】
1.一株副地衣芽孢杆菌，其特征在于，名称为副地衣芽孢杆菌(bacillusparalicheniformis)nian2，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为cgmcc no.28120。
2.一种微生物制剂，其活性成分为权利要求1所述的副地衣芽孢杆菌(bacillusparalicheniformis)nian2和/或其发酵液。
3.根据权利要求2所述的微生物制剂，所述发酵液的制备步骤为：...
【专利技术属性】
技术研发人员：王宏奕，蒋美玉，吴江明，魏士平，
申请(专利权)人：中国地质大学北京，
类型：发明
国别省市：
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