靶向抑制RNA m6A甲基转移酶活性的抑制剂及其在制备抗新冠病毒药物中的应用制造技术

技术编号：40536043 阅读：8 留言：0更新日期：2024-03-01 13:58

本发明专利技术公布了靶向抑制RNAm<supgt;6</supgt;A甲基转移酶活性的抑制剂及其在制备抗新冠病毒药物中的用途。本发明专利技术通过计算机辅助高通量筛选技术成功找到靶向抑制RNAm<supgt;6</supgt;A甲基转移酶活性的小分子，并用实验证明Onvansertib和Vilazodone能抑制SARS‑CoV‑2病毒的复制，通过靶向结合METTL3蛋白从而抑制其甲基转移酶活性，且具有较低的细胞毒性和较好的抗病毒活性。本发明专利技术证明Onvansertib和Vilazodone是靶向抑制RNAm<supgt;6</supgt;A甲基转移酶活性的抑制剂且可以作为抗新冠病毒的候选药物。Onvansertib和Vilazodone属于老药新用，安全可靠，也为抗击新冠病毒提供了新的策略和思路。

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【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医药领域，具体地涉及靶向抑制rna m6a甲基转移酶活性的抑制剂及其在制备抗新冠病毒药物中的应用。

技术介绍

1、目前，一些针对新型冠状病毒自身蛋白的抗病毒药物研发取得了重要进展，但病毒可能通过缺失或突变以拮抗上述药物的抗病毒作用。随着临床实验的不断扩展，越来越多研究指出，目前用于临床治疗的药物存在作用机制不明、抗病毒活性不强、药代动力学性质不佳等问题。此外，不断出现的sars-cov-2变异株不但给有效化合物的疗效和安全性等带来了挑战，同时也为新药研发带来了困难。

2、sars-cov-2属于rna病毒，其基因组稳定性差，突变率高。自2019年以来，已经演化出多种突变体，是导致抗病毒药物、疫苗和中和抗体保护效果减弱的主要原因。因此，针对病毒蛋白或rna序列的抗病毒药物研发面临着巨大挑战。与病毒相比，宿主基因组稳定性高，突变率低；并且在漫长的进化过程中，宿主细胞已经形成了一套保守且广谱的抗病毒分子调控机制，其中rna m6a修饰及其相关蛋白酶在调节sars-cov-2介导的感染和covid-19疾病进展中发挥着关键性调节作用。研究表明，rna m6a修饰允许sars-cov-2病毒逃逸宿主的天然免疫反应，从而在感染个体的肺部创造一个隐蔽地带，以促进疾病恶化。mettl3作为核心的rna m6a修饰甲基转移酶，参与催化多种病毒rna分子的m6a修饰生成，从而调节病毒基因组复制、转录和翻译等。近期研究发现，mettl3作为催化sars-cov-2 rna m6a修饰形成的关键酶，对sars-cov-2的

3、mettl3已被证明是sars-cov-2病毒复制的关键酶，在抗病毒治疗中发挥重要作用，因此，将其作为目的蛋白，建立高通量药物小分子筛选平台，以获得新的抗冠状病毒药物具有重要意义，同时可为后续联合用药研究提供完善的分子调控机制和理论依据。

4、奥文色替，英文别名onvansertib(pcm-075)和

5、1-(2-hydroxyethyl)-8-((5-(4-methylpiperazin-1-yl)-2-(trifluoromethoxy)phenyl)amino)-4,5-dihydro-1h-pyrazolo[4,3-h]quinazoline-3-carboxamide，是一款新型plk1抑制剂。研究者在2021年asco胃肠道研讨会(gi)上公开了其二线治疗kras阳性的转移性结直肠癌患者的疗效。此外，onvansertib具有抑制myc扩增的g3型髓母细胞瘤增殖并增强其放疗敏感性的作用；因此onvansertib可作为单药和/或联合放疗，用于治疗该亚型髓母细胞瘤。onvansertib是一类小分子化合物，相对分子质量为532.52，分子式c24h27f3n8o3，结构式如下

6、

7、维拉佐酮，英文别名vilazodone、unii-s239o2oov3和5-[4-[4-(5-cyano-1h-indol-3-yl)butyl]-1-piperazinyl]-2-benzofurancarboxamidehydrochloride，被用于治疗重度抑郁症。vilazodone是一类小分子化合物，相对分子质量为441.52，分子式c26h27n5o2，结构式如下

8、

9、经检索，在现有技术中，化合物onvansertib、vilazodone均没有被报道过有抗新冠病毒的作用，也没有报道过其可靶向抑制rna m6a甲基转移酶活性。

技术实现思路

1、鉴于此，本专利技术提供靶向抑制rna m6a甲基转移酶活性的抑制剂及其在制备抗新冠病毒药物中的应用。

2、靶向抑制rna m6a甲基转移酶活性的抑制剂，其特征在于：所述的靶向抑制rna m6a甲基转移酶活性的抑制剂为化合物onvansertib和/或vilazodone，所述的onvansertib为4,5-二氢-1-(2-羟基乙基)-8-[[5-(4-甲基-1-哌嗪基)-2-(三氟甲氧基)苯基]氨基]-1h-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲酰胺，所述的vilazodone的为5-(4-[4-(5-氰基-1h-吲哚-3-基)丁基]哌嗪-1-基)苯并呋喃-2-甲酰胺盐酸盐。

3、本专利技术还保护所述的靶向抑制rna m6a甲基转移酶活性的抑制剂在制备抗新冠病毒药物中的应用。

4、进一步地，所述的抗新冠病毒药物通过靶向结合mettl3蛋白从而抑制rna m6a甲基转移酶活性。

5、优选地，所述的药物为包含靶向抑制rna m6a甲基转移酶活性的抑制剂。

6、进一步地，所述的药物为在其药效上可接受的。

7、本专利技术首先在huh-7、caco-2、calu-3细胞系中验证敲低mettl3基因确实能够显著抑制sars-cov-2原始病毒株的复制；随后通过分子对接和分子动力学拟合分析发现onvansertib和vilazodone具备靶向结合mettl3蛋白的能力；进一步联合镍柱亲和层析蛋白纯化技术、表面等离子共振实验和细胞热位移实验，本专利技术证实了onvansertib和vilazodone在分子和细胞水平均可靶向结合mettl3蛋白；最后利用抗甲基转移酶活性实验，本专利技术证实它们均可抑制甲基转移酶mettl3与底物sam的结合，从而削弱其甲基转移酶活性。证明化合物onvansertib或vilazodone可靶向抑制rna m6a甲基转移酶活性。

8、在体外抗原始病毒株活性评估中，onvansertib和vilazodone在huh-7、caco-2和calu-3细胞中均表现出较低的细胞毒性和较好的抗病毒效果：在huh-7细胞中ec50分别为2.763±0.211μm、3.270±0.077μm，cc50分别为123.131±12.573μm、199.151±23.542μm；在caco-2细胞中ec50分别为1.778±0.357μm、2.279±0.407μm，cc50均大于200μm；在calu-3细胞中ec50分别为1.843±0.386μm、2.301±0.381μm，cc50均大于200μm。此外，在caco-2细胞中，这两个药物对omicron ba.2突变株同样具备较好的抗病毒效果，ec50分别为1.105±0.202μm、1.023±2.090μm。上述结果表明，onvansertib和vilazodone均可通过抑制mettl3甲基转移酶活性，发挥广谱的抗sars-本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.靶向抑制RNAm6A甲基转移酶活性的抑制剂，其特征在于：所述的靶向抑制RNAm6A甲基转移酶活性的抑制剂为化合物Onvansertib和/或Vilazodone，所述的Onvansertib为4,5-二氢-1-(2-羟基乙基)-8-[[5-(4-甲基-1-哌嗪基)-2-(三氟甲氧基)苯基]氨基]-1H-吡唑并[4,3-H]喹唑啉-3-甲酰胺，所述的Vilazodone的为5-(4-[4-(5-氰基-1H-吲哚-3-基)丁基]哌嗪-1-基)苯并呋喃-2-甲酰胺盐酸盐。

2.根据权利要求1所述的靶向抑制RNAm6A甲基转移酶活性的抑制剂在制备抗新冠病毒药物中的应用。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的抗新冠病毒药物通过靶向结合METTL3蛋白从而抑制RNAm6A甲基转移酶活性。

4.一种用于抗新冠病毒的药物，其特征在于：所述的药物为包含靶向抑制RNAm6A甲基转移酶活性的抑制剂。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述的药物为在其药效上可接受的盐。

【技术特征摘要】

1.靶向抑制rnam6a甲基转移酶活性的抑制剂，其特征在于：所述的靶向抑制rnam6a甲基转移酶活性的抑制剂为化合物onvansertib和/或vilazodone，所述的onvansertib为4,5-二氢-1-(2-羟基乙基)-8-[[5-(4-甲基-1-哌嗪基)-2-(三氟甲氧基)苯基]氨基]-1h-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲酰胺，所述的vilazodone的为5-(4-[4-(5-氰基-1h-吲哚-3-基)丁基]哌嗪-1-基)苯并呋喃-2-甲酰胺...

【专利技术属性】
技术研发人员：张婷，郑永唐，李西娅，罗荣华，王紫凌，
申请(专利权)人：中国科学院昆明动物研究所，
类型：发明
国别省市：

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