一种抗中间普氏菌、牙龈卟啉单胞菌和具核羧杆菌复合特异性IgY的制备方法及应用技术

本发明专利技术属于生物医药技术领域，涉及一种抗中间普氏菌、具核羧杆菌和牙龈卟啉单胞菌的抗原、特异性卵黄复合抗体及其制备方法。所述的抗原制备方法包括：（1）分别获得纯的中间普氏菌、牙龈卟啉单胞菌和具核羧杆菌；（2）将中间普氏菌、牙龈卟啉单胞菌与具核梭杆菌与甲醛溶液混合，灭活；（3）去除灭活菌液中的甲醛溶液，然后破碎细菌；（4）将破碎菌液与佐剂复合、搅拌，获得油包水弗氏完全佐剂中间普氏菌、牙龈卟啉单胞菌和具核羧杆菌乳化剂。本发明专利技术以中间普式菌、具核梭杆菌、牙龈卟啉单胞菌作为复合抗原，与佐剂复配制备三菌复合疫苗，所用原料生物安全性高，具有良好的稳定性和高活性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医药，涉及一种卵黄抗体的制备工艺，具体涉及一种抗中间普氏菌、具核羧杆菌和牙龈卟啉单胞菌的特异性卵黄复合抗原，抗体及其制备方法和应用。

技术介绍

1、牙周炎（periodontitis）又称破坏性牙周病，是牙菌斑中的细菌及牙结石侵犯牙周组织而引起的慢性炎症，可导致牙龈、牙周膜、牙槽骨和牙骨质的破坏，牙周袋形成、附着丧失和牙槽骨的吸收，进而引起牙齿萎缩，牙齿缓慢松动最终导致牙齿脱落。牙周炎是人们日常生活中较为常见的口腔疾病，根据《第四次全国口腔流行病学调查》结果显示，我国成年人的牙周健康率仅为9.1%。

2、牙周炎主要有牙菌斑内的微生物引起，这些牙周致病菌在龈下环境中定植、繁殖，产生内毒素、蛋白酶等毒性物质直接破坏牙周组织；同时还可引发一系列的宿主免疫反应，产生大量炎性介质，间接导致牙周结缔组织破坏、牙槽骨吸收。 中间普氏菌是革兰氏阴性产黑色素专性厌养杆菌，该菌与急性中间普氏菌（prevotella intermedia，pi）具有脂多糖、凝集素、纤毛、囊泡、蛋白水解酶等制致病因子，可诱导牙周膜细胞表达调控金属蛋白酶，参与牙周结缔本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种中间普氏菌、牙龈卟啉单胞菌和具核羧杆菌复合抗原的制备方法，其特征在于，所述的制备方法包括：

2.根据权利要求1所述的中间普氏菌、牙龈卟啉单胞菌和具核羧杆菌复合抗原的制备方法，其特征在于，所述的制备方法包括：

3.根据权利要求1所述的中间普氏菌、牙龈卟啉单胞菌和具核羧杆菌复合抗原的制备方法，其特征在于，所述佐剂为弗氏佐剂、白油司班佐剂或者黄芪多糖佐剂。

4.根据权利要求1所述的中间普氏菌、牙龈卟啉单胞菌和具核羧杆菌复合抗原的制备方法，其特征在于，所述的制备方法包括：将中间普氏菌、牙龈卟啉单胞菌和具核羧杆菌接种于哥伦比亚血琼脂培养基上进行扩增培养，...

【技术特征摘要】

1.一种中间普氏菌、牙龈卟啉单胞菌和具核羧杆菌复合抗原的制备方法，其特征在于，所述的制备方法包括：

2.根据权利要求1所述的中间普氏菌、牙龈卟啉单胞菌和具核羧杆菌复合抗原的制备方法，其特征在于，所述的制备方法包括：

3.根据权利要求1所述的中间普氏菌、牙龈卟啉单胞菌和具核羧杆菌复合抗原的制备方法，其特征在于，所述佐剂为弗氏佐剂、白油司班佐剂或者黄芪多糖佐剂。

4.根据权利要求1所述的中间普氏菌、牙龈卟啉单胞菌和具核羧杆菌复合抗原的制备方法，其特征在于，所述的制备方法包括：将中间普氏菌、牙龈卟啉单胞菌和具核羧杆菌接种于哥伦比亚血琼脂培养基上进行扩增培养，并通过pbs挂取菌种进行离心洗涤，洗涤后将细菌沉淀与0.1-0.6%的甲醛水溶液混合均匀，放置于4℃灭活24h以上；再将灭活菌液进行离心收集，使用pbs沉淀，洗涤3次，除去甲醛溶液，并将菌液浓度调至3×109cfu/ml；将该浓度下的菌液在冰水浴条件下用超声破碎仪破碎细菌；将等体积的破碎菌液抗...

【专利技术属性】
技术研发人员：王琴，施裔磊，陆彬，徐艳，仲禺俊，
申请(专利权)人：上海美加净日化有限公司，
类型：发明
国别省市：