【技术实现步骤摘要】
本专利技术用于属于微流控，具体涉及一种微流控芯片其制备方法和应用方法。
技术介绍
1、微流控芯片，又称芯片实验室(lab-on-a-chip)，是一种以在微纳米尺度空间中对流体进行操控为主要特征的科学技术，具有将生物、化学等实验室的基本功能诸如样品制备、反应、分离和检测等缩微到一个几平方厘米芯片上的能力，其基本特征和最大优势是多种单元技术在整体可控的微小平台上灵活组合、规模集成。
2、当前，随着材料科学、微纳米加工技术和微电子学等的发展促进了微流控芯片的迅速发展。然而，微流控芯片的制造加工是起一直以来的难题。
3、中国专利技术专利cn114011480a了一种电化学发光微流控检测芯片及用于蛋白检测的试剂盒。该电化学发光微流控检测芯片包含叠置的芯片上盖、单面胶电极层、双面胶流道层和芯片下盖；芯片上盖包含加样区；芯片下盖设有凹槽及开口槽；单面胶电极层包含单面胶层加样区，单面胶电极层在与芯片上盖接触的一侧表面设置有胶层，在与双面胶流道层接触的一侧表面设置有多个电极，电极包括工作部分及导出部分；双面胶流道层包含样本流动通道及开槽，开槽位于样本流动通道的末端处；样本流动通道包括加样孔区、流道检测区和废液槽区。本专利技术提供的电化学发光微流控检测芯片适于超高灵敏度、精密度的即时检验。然而，微流控芯片在检测过程中属于消耗品，单次测试成本较高，难以与可批量的大型发光仪器的检测成本比较，导致推广困难。降低微流控芯片的成本是促进其应用推广的关键。
4、cn210572334u公开了一种微流控芯片，包括芯片主体，设
5、因此，亟待研发一种低成本高精度的微流控芯片，促进其推广使用。
技术实现思路
1、为了克服现有技术的不足，本专利技术提供了一种微流控芯片及其制备方法，以玻璃毛细管作为微流控芯片基底，将改性探针分子负载到毛细管内壁，将抗原结合到改性探针分子上，再将标记抗体结合抗原，使用成像仪或ccd平台对发光信号进行检测，检测精度高，成本低廉，制备方法简单，利于推广应用。
2、本专利技术的技术方案如下：一种微流控芯片，以玻璃毛细管为微流控芯片基底。
3、所述的微流控芯片，玻璃毛细管的内壁面结合有羟基，所述羟基结合3-氨丙基-三乙氧基硅烷，而后以对苯二甲醛进行醛基化。
4、一种微流控芯片的制备方法，包括如下步骤：
5、a)羟基化：清洗玻璃毛细管内壁，用piranha溶液将清洗后的玻璃毛细管内壁表面羟基化；
6、b)3-氨丙基-三乙氧基硅烷(aptes)的组装：采用分子自组装技术将3-氨丙基-三乙氧基硅烷组装在羟基化的玻璃毛细管内壁表面，形成一层以氨基结尾的单分子自组装膜；
7、c)对苯二甲醛的组装：用对苯二甲醛溶液处理步骤b)所得氨基化的玻璃毛细管进行封装。
8、所述的微流控芯片的制备方法，还包括步骤d)将玻步骤c)得到玻璃毛细管放置在烘箱，在100-110℃条件下烘烤45min。
9、步骤a中，清洗玻璃毛细管内壁是先用先用无水乙醇超声清洗玻璃毛细管内壁表面两次，每次五分钟，然后再用去离子水超声清洗两次，每次5分钟。
10、步骤a中，所述piranha溶液为体积比98％h2so4:30％h2o2＝7：3，玻璃毛细管内壁羟基化是将清洗后的玻璃毛细管在piranha溶液中浸泡25-35分钟。
11、步骤b中，分子自组装技术是表面羟基化后的玻璃毛细管内壁，在3-氨丙基-三乙氧基硅烷的无水乙醇溶液中浸泡25-35分钟，取出玻璃毛细管，用无水乙醇漂洗两遍，用氮气吹干，然后在100～110℃条件下烘烤40-50分钟，使3-氨丙基三乙氧基硅烷与羟基在毛细管内壁表面结合，形成一层以氨基结尾的单分子自组装膜。
12、步骤c中，步骤b)所得氨基化的玻璃毛细管在10-15mm的对苯二甲醛的丙酮溶液中浸泡30分钟，取出用去离子水漂洗两次，氮气吹干，使得对苯二甲醛中一个醛基与玻璃毛细管内壁表面的氨基反应，并以c＝n双键结合，而另一个醛基暴露在玻璃毛细管内壁表面。
13、所述的微流控芯片的应用方法，包括如下步骤：
14、1)探针固定：捕获抗体上的氨基，通过席夫碱反应，结合到毛细管内壁上的醛基上，从而实现捕获在毛细管内壁上的固定；
15、2)免疫反应：将抗原溶液引入并充满毛细管，孵育，清洗后,将标记抗体溶液引入并充满毛细管，孵育，清洗并干燥；
16、4)光学检测：将化学发光底物引入并充满毛细管，使用成像仪或ccd平台对发光信号进行检测。
17、本专利技术的有益效果为：1.本专利技术所述的微流控芯片采用玻璃毛细管作为微流控芯片基底的基底，在其上进行化学反应，具有来源丰富，价格低廉等优点，玻璃毛细管的处理方法简单方便，可极大的解决微流控芯片作为耗材成本高的问题，适合大规模生成。
18、2.本专利技术所述的微流控芯片采用了分子自组装技术，将有机分子通过共价键牢固的固定在玻璃毛细管的内壁表面，不会轻易脱落，保证表面官能团的高密度型和均一性，从而保证基片具有高固定率的优点。
19、3.醛基修饰的毛细管内壁表面用于固定抗原探针分子时，通过共价键结合，具有结合强度大的优点。
20、4.这种玻璃基毛细管内壁修饰改性的过程不会导致荧光信号的明显增大，具有荧光背景低，精确度高的特点。
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1.一种微流控芯片，其特征在于，以玻璃毛细管为微流控芯片基底。
2.如权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于，玻璃毛细管的内壁面结合有羟基，所述羟基结合3-氨丙基-三乙氧基硅烷，而后以对苯二甲醛进行醛基化。
3.如权利要求1所述的微流控芯片的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
4.如权利要求3所述的微流控芯片的制备方法，其特征在于，步骤a中，清洗玻璃毛细管内壁时，先用无水乙醇超声清洗玻璃毛细管内壁表面两次，每次5分钟，然后再用去离子水超声清洗两次，每次5分钟。
5.如权利要求3所述的微流控芯片的制备方法，其特征在于，步骤a中，所述piranha溶液为体积比7：3的98％H2SO4和30％H2O2，玻璃毛细管内壁羟基化是将清洗后的玻璃毛细管在piranha溶液中浸泡25-35分钟。
6.如权利要求3所述的微流控芯片的制备方法，其特征在于，步骤b中，分子自组装技术是将步骤1)表面羟基化后的玻璃毛细管在3-氨丙基-三乙氧基硅烷的无水乙醇溶液中浸泡25-35分钟，取出玻璃毛细管，用无水乙醇漂洗两遍，用氮气吹干，然后在100～1
7.如权利要求3所述的微流控芯片的制备方法，其特征在于，步骤c中，步骤b)所得氨基化的玻璃毛细管在10-15mM的对苯二甲醛的丙酮溶液中浸泡30分钟，取出用去离子水漂洗两次，氮气吹干，使得对苯二甲醛中一个醛基与玻璃毛细管内壁表面的氨基反应，并以C＝N双键结合，而另一个醛基暴露在玻璃毛细管内壁表面。
8.如权利要求3所述的微流控芯片的制备方法，其特征在于，还包括步骤d)将玻步骤c)得到玻璃毛细管放置在烘箱，在100-110℃条件下烘烤45min。
9.如权利要求1-8任一项所述的微流控芯片的应用方法，其特征在于，包括如下步骤：
...【技术特征摘要】
1.一种微流控芯片，其特征在于，以玻璃毛细管为微流控芯片基底。
2.如权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于，玻璃毛细管的内壁面结合有羟基，所述羟基结合3-氨丙基-三乙氧基硅烷，而后以对苯二甲醛进行醛基化。
3.如权利要求1所述的微流控芯片的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
4.如权利要求3所述的微流控芯片的制备方法，其特征在于，步骤a中，清洗玻璃毛细管内壁时，先用无水乙醇超声清洗玻璃毛细管内壁表面两次，每次5分钟，然后再用去离子水超声清洗两次，每次5分钟。
5.如权利要求3所述的微流控芯片的制备方法，其特征在于，步骤a中，所述piranha溶液为体积比7：3的98％h2so4和30％h2o2，玻璃毛细管内壁羟基化是将清洗后的玻璃毛细管在piranha溶液中浸泡25-35分钟。
6.如权利要求3所述的微流控芯片的制备方法，其特征在于，步骤b中，分子自组装技术是将步骤1...
【专利技术属性】
技术研发人员：邹磊，王炫群，赵天聪，韩建美，
申请(专利权)人：深圳陕煤高新技术研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：
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