一种快速筛选与诱饵RNA结合的蛋白系统及方法和应用技术方案

本发明专利技术公开了一种快速筛选与诱饵RNA结合的蛋白系统及方法和应用，该系统包括诱导表达自杀基因‑诱饵载体和RNA酶‑待选RNA结合蛋白融合表达载体。诱导表达自杀基因‑诱饵载体是一个可诱导表达的杂合RNA，含有自杀基因表达框及诱饵RNA；RNA酶‑待选RNA结合蛋白融合表达载体是通过基因工程方法使RNA酶与待选RNA结合蛋白形成一个融合蛋白；当融合蛋白的RNA结合蛋白特异识别诱饵RNA时，融合蛋白的RNA酶活性会破坏诱导表达的杂合RNA，使诱导表达的自杀基因减少，从而使细胞活下来，否则细胞死亡。本发明专利技术实现了特异、高效和简易地筛选与RNA结合的蛋白，可用于开发任意一种靶向RNA的药物，简单实用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程，具体涉及一种快速筛选与诱饵rna结合的蛋白系统及方法和应用。

技术介绍

1、rna结合蛋白(rna-binding protein，rbp)通常被认为是通过一个或多个rna结合结构域(rbd)来结合rna并改变结合rna命运或功能的蛋白质。这些rbp广泛控制rna生命周期的每个阶段，包括mrna的合成和成熟，非编码rna(non-coding rna，ncrna)的激活、剪切、降解等，因此rna-蛋白质相互作用越来越被认为是病毒/病菌和宿主细胞间的rna-蛋白相互作用、转录组和蛋白质组调节的关键一环。因此，系统鉴定及定量rbps在细胞功能和疾病状态中的动态变化对于研究者了解复杂系统中的生理功能和疾病进展也具有重要意义，并对筛选有效的干扰多肽类药物具有重要的临床意义。

2、近年来，为了全面鉴定这些rna结合蛋白，并阐释rbp的动态组装行为，研究者发展了许多捕获rna结合蛋白的技术手段。较为常用的rna结合蛋白捕获方法可以主要分为靶向与无偏两种蛋白捕获方法，前者是已知想要研究的rna，通过一系列基于ap-ms或apex的方法本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种快速筛选与诱饵RNA结合的蛋白系统，其特征在于，包括诱导表达自杀基因-诱饵载体和RNA酶-待选RNA结合蛋白融合表达载体；

2.根据权利要求1所述的一种快速筛选与诱饵RNA结合的蛋白系统，其特征在于，所述自杀基因为皂草素蛋白质序列，如SEQ ID NO.2所示；所述SA-NCD的重组蛋白的序列如SEQID NO.1所示。

3.根据权利要求1所述的一种快速筛选与诱饵RNA结合的蛋白系统，其特征在于，所述待选RNA结合蛋白为已确定的RNA结合蛋白或基因表达文库。

4.一种基于权利要求1-3任一项所述的快速筛选与诱饵RNA结合的蛋白系统的筛选方法，其...

【技术特征摘要】

1.一种快速筛选与诱饵rna结合的蛋白系统，其特征在于，包括诱导表达自杀基因-诱饵载体和rna酶-待选rna结合蛋白融合表达载体；

2.根据权利要求1所述的一种快速筛选与诱饵rna结合的蛋白系统，其特征在于，所述自杀基因为皂草素蛋白质序列，如seq id no.2所示；所述sa-ncd的重组蛋白的序列如seqid no.1所示。

3.根据权利要求1所述的一种快速筛选与诱饵rna结合的蛋白系统，其特征在于，所述待选rna结合蛋白为已确定的rna结合蛋白或基因表达文库。

4.一种基于权利要求1-3任一项所述的快速筛选与诱饵rna结合的蛋白系统的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：

5....

【专利技术属性】
技术研发人员：刘清华，吴晓月，李燕强，宋昱，郭羽白，李海英，
申请(专利权)人：徐州医科大学，
类型：发明
国别省市：