高通量功能物质筛选双报告基因模型及其构建方法与应用技术

技术编号:40428233 阅读:30 留言:0更新日期:2024-02-20 22:49
本发明专利技术提供一种高通量功能物质筛选双报告基因模型及其构建方法与应用,其是将萤火虫荧光素酶报告基因表达盒和海肾荧光素酶报告基因表达盒通过慢病毒转导至猪胚胎滋养层细胞中,经G418和Puro筛选后得到高通量功能物质筛选双报告基因模型;其中,萤火虫荧光素酶报告基因表达盒中萤火虫荧光素酶报告基因与猪Cdx2基因启动子可操作地连接,海肾荧光素酶报告基因表达盒中海肾荧光素酶报告基因与猪TEAD4基因启动子可操作地连接。本发明专利技术构建的双荧光素酶报告基因细胞系可用于高通量筛选调节母猪早期胚胎发育的功能物质,对于快速、高效地鉴定可促进母猪早期胚胎发育的功能物质具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物工程,具体地说,涉及一种高通量功能物质筛选双报告基因模型及其构建方法与应用


技术介绍

1、早期胚胎死亡率高是限制母猪繁殖性能的关键因素之一,猪的胚胎死亡率约为30%~50%,其中主要发生在妊娠早期。早期胚胎丢失的主要原因是早期胚胎发育不良导致的附植失败。因此,如何改善胚胎的营养状况,调控早期胚胎的发育和着床,从而提高早期胚胎的成活率一直是该领域的热点。

2、哺乳动物早期胚胎发育过程受多种因素调控,如激素、母体营养、生长因子和细胞因子等。越来越多的证据表明,母体营养的变化会影响哺乳动物胚胎质量和早期胚胎发育。均衡精准的营养可以有效改善胎儿的生理环境,提高早期胚胎的存活率。由此可见,利用营养干预母猪妊娠早期胚胎发育、提高母猪繁殖性能具有很大的实际应用潜力。

3、目前的研究大多以单一营养素的角度开展相关试验,现有的研究方法无法实现从大量营养素中快速、高效地筛选出能够调节母猪早期胚胎发育的候选营养素或组合。因此,亟需构建一种可用于高通量筛选调节母猪早期胚胎发育的营养物质的检测系统。


<p>技术实现思本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.高通量功能物质筛选双报告基因模型的构建方法,其特征在于,将萤火虫荧光素酶报告基因表达盒和海肾荧光素酶报告基因表达盒通过慢病毒转导至猪胚胎滋养层细胞中,经G418和Puro筛选后得到高通量功能物质筛选双报告基因模型;

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述猪Cdx2基因启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述猪TEAD4基因启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

4.按照权利要求1-3任一项所述方法制备的高通量功能物质筛选双报告基因模型。

5.猪胚胎滋养层细胞p...

【技术特征摘要】

1.高通量功能物质筛选双报告基因模型的构建方法,其特征在于,将萤火虫荧光素酶报告基因表达盒和海肾荧光素酶报告基因表达盒通过慢病毒转导至猪胚胎滋养层细胞中,经g418和puro筛选后得到高通量功能物质筛选双报告基因模型;

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述猪cdx2基因启动子的核苷酸序列如seq id no:1所示。

3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述猪tead4基因启动子的核苷酸序列如seq id no:2所示。

4.按照...

【专利技术属性】
技术研发人员:曾祥芳王新宇谯仕彦黎欢蔡爽黄俊赵琦琪
申请(专利权)人:中国农业大学
类型:发明
国别省市:

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