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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物,具体涉及一种贝莱斯芽孢杆菌t16及其用途。
技术介绍
1、芽孢杆菌(bacillus spp.)是一类生存在根际范围内,对植物有促进作用、对环境和人畜安全的有益细菌。芽孢杆菌不仅可以通过提高营养元素的可利用性,降低乙烯含量或者分泌吲哚乙酸、分裂素、亚精胺、挥发性化合物等方式促进植物生长;还能够以竞争营养和空间位点、合成抗菌物质、诱导植物产生系统抗性等机制提高植物的抗病能力。而芽孢杆菌对植物的促生或抗病效果,主要依赖于其在植物根际的定殖情况。
2、趋化性是细菌对环境中化学物质的分布梯度做出响应所表现的定向运动。芽胞杆菌的趋化性主要由chea组氨酸激酶和chey反应调节因子组成的双组分系统调控。chea与化学感受器、转接蛋白chew形成复合体;当氨基酸、糖等引诱剂与复合体中的化学感受器结合后,刺激chea自身磷酸化;随后chea将磷酸基团转移给chey;cheyp与鞭毛蛋白结合,促使其趋向引诱剂。当感知到植物分泌的信号分子,芽孢杆菌通过趋化反应向植物根部移动和聚集。到达植物根表后,移动型的芽孢杆菌细胞停止游动并分化成生物膜型细胞,随后生物膜结构逐步成熟,芽孢杆菌在植物根际形成微菌落,因此趋化性是决定芽孢杆菌在植物根际定殖的先决条件。
3、根系分泌物(root exudates)是植物通过根系分泌到根际环境中的有机物质总称。植物在遭受生物或非生物胁迫时也会改变其根系分泌物组分来吸引或趋避某些微生物。例如,当番茄遭受到丁香假单胞菌番茄致病变种(pseudomonas syringae pat
4、芽孢杆菌在根际的有效定殖是充分发挥其促生拮抗效果的前提。很多芽孢杆菌在田间施用效果不稳定,大多情况是由于其定殖效率较低导致的。而芽孢杆菌对植物根系分泌物的趋化性是其在根际定殖的第一步。因此筛选出对青枯病菌侵染后的烟草根系分泌物表现出更强趋化性的拮抗菌株,为开发效果稳定的微生物农药打下基础,具有重要意义。
技术实现思路
1、因此,本专利技术要解决的技术问题在于提供一种贝莱斯芽孢杆菌(bacillusvelezensis)t16菌株,对青枯病菌侵染后的烟草根系分泌物表现出更强的趋化性,同时能够防治烟草青枯病。
2、为此,本专利技术提供了如下的技术方案:
3、一种贝莱斯芽孢杆菌(bacillus velezensis)t16,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心cgmcc,保藏地址北京市朝阳区北辰西路,邮编100101,保藏编号为cgmcc no.28670,保藏日期为2023年10月19日。
4、一种微生物制剂,含有所述的贝莱斯芽孢杆菌t16或其培养物。
5、一种所述的微生物制剂的制备方法,包括如下步骤:将所述贝莱斯芽孢杆菌t16进行活化,扩大培养。
6、可选的,所述活化步骤中,将所述贝莱斯芽孢杆菌t16在固体培养基上划线活化,37±0.5℃培养12±2h,获得单菌落;
7、和/或,在所述放大培养步骤中,将所述活化步骤中挑取的单菌落转接至液体培养基中,37±0.5℃、200±20rpm震荡培养12±2h,获得初始贝莱斯芽孢杆菌t16菌悬液;
8、和/或,还包括继续扩大培养步骤,将所述初始t16菌悬液以1%(体积比v/v)比例转接到新的液体培养基中,37±0.5℃、200±20rpm震荡培养2h;再在分光光度计中用液体培养基将菌悬液稀释至约od600=0.2,再以1%(体积比v/v)比例转接到新的液体培养基的离心管中,37±0.5℃、200±20rpm震荡培养至od600=1,获得贝莱斯芽孢杆菌t16菌悬液。
9、所述的贝莱斯芽孢杆菌t16、所述的微生物制剂或所述的微生物制剂的制备方法制备的微生物制剂具有如下任意的用途:
10、1)、在拮抗植物病原菌或制备拮抗植物病原菌产品中的用途;
11、2)、在防治植物病害或制备防治植物病害的产品中的用途。
12、可选的,具有如下任意的用途:
13、1)、在拮抗青枯病菌或制备拮抗青枯病菌产品中的用途;
14、2)、在防治植物青枯病或制备防治植物青枯病的产品中的用途。
15、可选的,所述青枯病菌为青枯菌属(ralstonia);
16、和/或,所述植物为烟草属(nicotiana l);
17、和/或,所述产品包括农药;
18、可选的,所述青枯菌属包括青枯劳尔氏菌(ralstonia solanacearum);
19、可选的,所述烟草属包括烟草(nicotiana tabacum l.)。
20、一种防治烟草的农药组合物,包括所述的贝莱斯芽孢杆菌t16、所述的微生物制剂或所述的制备方法制备得到的微生物制剂。
21、可选的,还包括病原菌侵染后的烟草根系分泌物。
22、可选的,所述病原菌侵染后的烟草根系分泌物的制备方法,包括如下步骤:
23、将病原菌液接种到烟草植株的根部,植株大小为5-6叶期,做伤根处理,冲洗,用无菌水浸没根部,室温避光,静置24±2h后,观察到水颜色变黄,收集浓缩并冻干;
24、可选的,所述病原菌液为od600值为1.0-1.2,每株接种量为20ml。
25、本专利技术提供了贝莱斯芽孢杆菌(bacillus velezensis)t16菌株,该菌株的微生物保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心cgmcc,保藏地址北京市朝阳区北辰西路,邮编100101,保藏编号为cgmcc no.28670,保藏日期为2023年10月19日。
26、该贝莱斯芽孢杆菌t16菌株为革兰氏阳性菌,杆状,能运动,在lb培养基上的单菌落为淡黄色不透明菌落,表面粗糙,有隆起,边缘不规则。
27、本专利技术还提供了上述贝莱斯芽孢杆菌t16菌株在制备防治烟草青枯病药物中的应用。
28、作为本专利技术的进一步优化方案,所述烟草青枯病防治药物指对烟草青枯病菌(ralstonia solanacearum)具有拮抗活性的药物。
29、本专利技术还提供了上述烟草青枯病防治药物,包括所述菌株和青枯病菌侵染后的烟草根系分泌物。
30、本专利技术技术方案,具有如下优点:
31、1.本专利技术提供的贝莱斯芽孢杆菌(bacillus velezensis)t16保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心cgmcc,保藏编号为cgmccno.28670,所述贝莱斯芽孢杆菌t16对烟草青枯病菌具有较好的拮抗活性,抑菌圈直径达到2.3本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)T16,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC,保藏编号为CGMCC No.28670。
2.一种微生物制剂,其特征在于,含有权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌T16或其培养物。
3.一种如权利要求2所述的微生物制剂的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:将所述贝莱斯芽孢杆菌T16进行活化,放大培养。
4.根据权利要求3所述的微生物制剂的制备方法,其特征在于,
5.权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌T16、权利要求2所述的微生物制剂或权利要求3或4所述的微生物制剂的制备方法制备的微生物制剂具有如下任意的用途:
6.根据权利要求5所述的用途,其特征在于,具有如下任意的用途:
7.根据权利要求6所述的用途,其特征在于,所述青枯病菌为青枯菌属(Ralstonia);
8.一种防治烟草的农药组合物,其特征在于,包括权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌T16、权利要求2所述的微生物制剂或权利要求3或4所述的制备方法制备得到的微生物制剂。
...【技术特征摘要】
1.一种贝莱斯芽孢杆菌(bacillus velezensis)t16,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心cgmcc,保藏编号为cgmcc no.28670。
2.一种微生物制剂,其特征在于,含有权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌t16或其培养物。
3.一种如权利要求2所述的微生物制剂的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:将所述贝莱斯芽孢杆菌t16进行活化,放大培养。
4.根据权利要求3所述的微生物制剂的制备方法,其特征在于,
5.权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌t16、权利要求2所述的微生物制剂或权利要求3或4所述的微生物制剂的制备方法制备的微生物制剂...
【专利技术属性】
技术研发人员:胡亚杰,李群岭,周效峰,首安发,吴峰,林小兴,黄忠向,谢珊珊,丁婷,李章海,陈燕红,黄正宾,
申请(专利权)人:广西中烟工业有限责任公司,
类型:发明
国别省市:
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