黑龙骨中黄酮糖苷类糖基转移酶PfUGT74E7及其编码基因与应用制造技术

技术编号：40421391 阅读：8 留言：0更新日期：2024-02-20 22:40

本发明专利技术公开了黑龙骨中黄酮糖苷类糖基转移酶PfUGT74E7及其编码基因与应用。所述糖基转移酶PfUGT74E7的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。所述糖基转移酶PfUGT74E7的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明专利技术旨在揭示黑龙骨中参与黄酮糖苷类成分生物合成的糖基转化酶，经本发明专利技术实验证明，糖基转移酶PfUGT74E7能够催化芹菜素生成芹菜素‑7‑O‑葡萄糖苷，以及催化木犀草素生成木犀草素‑7‑O‑葡萄糖苷，为芹菜素‑7‑O‑葡萄糖苷和木犀草素‑7‑O‑葡萄糖苷的体外合成及大规模应用奠定基础。

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【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，特别地涉及黑龙骨中黄酮糖苷类糖基转移酶pfugt74e7及其编码基因与应用。

技术介绍

1、黄酮苷类化合物广泛存在于植物界，在植物胁迫响应以及生长发育调控中具有关键作用，同时黄酮苷类成分较多存在于食品和药品中，具有良好的生物活性。药用植物黑龙骨(periploca forrestii schltr)为夹竹桃科(apocynaceae)杠柳属(periploca l.)物种，其干燥根或全株可入药(黑骨藤)，药用历史悠久，具有舒筋活络、祛风除湿、清热解毒等作用。此外，黑骨藤追风活络胶囊、黑骨藤液等中成药也广泛应用于临床。已有研究表明黄酮类成分是黑龙骨中重要活性成分之一，但其合成机制尚未有研究。

2、芹菜素和木犀草素c-7位羟基的葡萄糖基化可以形成芹菜素-7-o-葡萄糖苷和木犀草素-7-o-葡萄糖苷。现代药理学研究证明芹菜素-7-o-葡萄糖苷具有体外抗氧化及抗炎等活性，木犀草素-7-o-葡萄糖苷能够减轻心肌损伤，具有较好的药理价值和应用前景。然而，植物来源的芹菜素-7-o-葡萄糖苷和木犀草素-7-o-葡萄糖苷含量低，限制了其发展与应用，同时不利于中药资源的可持续发展。

3、植物中黄酮类成分的糖基化反应由尿苷二磷酸活化的糖基转移酶(udp-glycosyltransferase,ugt)家族参与完成，在调节植物生长发育和应对胁迫环境中发挥关键作用。目前已被鉴定功能的糖基转移酶仍不到发现数量的1％，ugt74家族是ugt中数量较多的一个家族，已报道拟南芥atugt74e2可以催化3-吲哚丁酸(i

技术实现思路

1、有鉴于此，本专利技术提出黑龙骨中黄酮糖苷类糖基转移酶pfugt74e7及其编码基因与应用。

2、本专利技术的技术方案如下：

3、一种蛋白，所述蛋白的氨基酸序列如seq id no:2所示。

4、本专利技术还提供了所述蛋白的编码基因，所述编码基因的核苷酸序列如seq id no:1所示。

5、将该基因命名为pfugt74e7，将其编码的蛋白命名为pfugt74e7。具体信息如下：pfugt74e7基因序列如序列表中序列1所示，序列1含有1368个核苷酸，其编码序列表中序列2所示的蛋白，序列2由455个氨基酸组成。

6、含有所述编码基因的表达盒、重组表达载体或重组菌也属于本专利技术的保护范围。

7、扩增所述编码基因全长的引物对也属于本专利技术的保护范围，所述引物对中，一条引物序列如seq id no:3所示，另一条引物序列如seq id no:4所示。

8、所述的蛋白在作为糖基转移酶中的应用也属于本专利技术的保护范围。

9、所述糖基转移酶为催化芹菜素生成芹菜素-7-o-葡萄糖苷的糖基转移酶或催化木犀草素生成木犀草素-7-o-葡萄糖苷的糖基转移酶。

10、所述蛋白在催化芹菜素生成芹菜素-7-o-葡萄糖苷中的应用也属于本专利技术的保护范围。

11、所述蛋白在催化木犀草素生成木犀草素-7-o-葡萄糖苷中的应用也属于本专利技术的保护范围。

12、所述编码基因在催化芹菜素生成芹菜素-7-o-葡萄糖苷中的应用也属于本专利技术的保护范围。

13、所述编码基因在催化木犀草素生成木犀草素-7-o-葡萄糖苷中的应用也属于本专利技术的保护范围。

14、本专利技术旨在揭示黑龙骨中参与黄酮糖苷类成分生物合成的糖基转移酶，经本专利技术实验证明，糖基转移酶pfugt74e7能够催化芹菜素生成芹菜素-7-o-葡萄糖苷，以及催化木犀草素生成木犀草素-7-o-葡萄糖苷，为芹菜素-7-o-葡萄糖苷和木犀草素-7-o-葡萄糖苷的生物合成提供基因元件，同时为芹菜素-7-o-葡萄糖苷和木犀草素-7-o-葡萄糖苷等黄酮苷类成分的绿色高效合成和大规模应用奠定基础。

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【技术保护点】

1.一种蛋白，所述蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。

2.权利要求1所述蛋白的编码基因，其特征在于：所述编码基因的核苷酸序列如SEQ IDNO:1所示。

3.含有权利要求2所述编码基因的表达盒、重组表达载体或重组菌。

4.扩增权利要求2所述编码基因全长的引物对，所述引物对中，一条引物序列如SEQ IDNO:3所示，另一条引物序列如SEQ ID NO:4所示。

5.权利要求1所述的蛋白在作为糖基转移酶中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述糖基转移酶为催化芹菜素生成芹菜素-7-O-葡萄糖苷的糖基转移酶或催化木犀草素生成木犀草素-7-O-葡萄糖苷的糖基转移酶。

7.权利要求1所述的蛋白在催化芹菜素生成芹菜素-7-O-葡萄糖苷中的应用。

8.权利要求1所述的蛋白在催化木犀草素生成木犀草素-7-O-葡萄糖苷中的应用。

9.权利要求2所述的编码基因在催化芹菜素生成芹菜素-7-O-葡萄糖苷中的应用。

10.权利要求2所述的编码基因在催化木犀草素生成木犀草素-7-O-葡萄糖苷中的应用。

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【技术特征摘要】

1.一种蛋白，所述蛋白的氨基酸序列如seq id no:2所示。

2.权利要求1所述蛋白的编码基因，其特征在于：所述编码基因的核苷酸序列如seq idno:1所示。

3.含有权利要求2所述编码基因的表达盒、重组表达载体或重组菌。

4.扩增权利要求2所述编码基因全长的引物对，所述引物对中，一条引物序列如seq idno:3所示，另一条引物序列如seq id no:4所示。

5.权利要求1所述的蛋白在作为糖基转移酶中的应用。

6.根据权利要求5所述的应...

【专利技术属性】
技术研发人员：向丽，高冉冉，王晓童，师玉华，邬兰，王梦月，尹青岗，万会花，
申请(专利权)人：中国中医科学院中药研究所，
类型：发明
国别省市：

全部详细技术资料下载我是这个专利的主人