一种诱导多能干细胞分化为成骨细胞和骨细胞的方法及应用技术

技术编号:40421143 阅读:40 留言:0更新日期:2024-02-20 22:40
本发明专利技术涉及细胞生物学和再生医学领域,具体涉及一种诱导多能干细胞分化为成骨细胞和骨细胞的方法及应用。所述方法包括以下步骤:S1:iPSC分化形成拟胚体;S2:拟胚体向肌腱祖细胞分化;S3:肌腱祖细胞向成骨细胞分化;S4:成骨细胞向骨细胞分化。本发明专利技术提供的分化方法,操作简单、分化周期短、分化效率高、成骨细胞易于扩增,而且无需进行基因改造,是未来骨组织工程的理想种子细胞来源。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于细胞生物学和再生医学领域,涉及一种诱导多能干细胞分化为成骨细胞和骨细胞的方法及应用


技术介绍

1、骨组织再生受限,治疗大面积颅骨缺损一直是临床的挑战。近年来,随着3d打印技术和生物材料的发展,骨组织工程技术以支架材料、种子细胞和生长因子为基础,研发出生物活性骨植入物,具备出色的生物相容性、骨传导性和骨诱导性,能精确填充颅骨缺损并促进新骨生长(bhushan et al.,2022.bioengineering)。这些生物活性骨植入物不仅规避了自体骨和异体骨的限制、免疫排斥和手术风险,还提供了个性化和高效的治疗方法,为颅骨缺损修复领域带来了突破性进展。

2、然而,如何获得大量的功能性成骨细胞仍然是骨组织工程和动物模型中骨再生效果的关键挑战。传统上,骨髓间充质干细胞(bmscs)是颅骨缺损修复中最常用的种子细胞,它们能够促进颅骨再生和修复(zhao et al.,2021.stem cells int)。然而,bmscs存在来源受限、批次不稳定、细胞老化以及分化异质性等问题(vizoso et al.,2019.int j mols本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种诱导多能干细胞分化为成骨细胞和骨细胞的方法,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在S1中,将iPSC消化后用添加了10μM Rock抑制剂的E8培养基悬浮培养,形成拟胚体。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在S2中,先将拟胚体在添加了250nMLDN193189的E8培养基中悬浮培养2天,再在添加了250nM LDN193189、5uM CHIR和100nMAGN193109的E8培养基中悬浮培养4天,形成肌腱祖细胞。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在S3中,将肌腱祖细胞接种于预先包被Matrigel...

【技术特征摘要】

1.一种诱导多能干细胞分化为成骨细胞和骨细胞的方法,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在s1中,将ipsc消化后用添加了10μm rock抑制剂的e8培养基悬浮培养,形成拟胚体。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在s2中,先将拟胚体在添加了250nmldn193189的e8培养基中悬浮培养2天,再在添加了250nm ldn193189、5um chir和100nmagn193109的e8培养基中悬浮培养4天,形成肌腱祖细胞。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在s3中,将肌腱祖细胞接种于预...

【专利技术属性】
技术研发人员:蒋宗敏刘子嶷任文文顾雨春吴理达
申请(专利权)人:呈诺再生医学科技北京有限公司
类型:发明
国别省市:

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