一种针对食品中真菌毒素的非靶向筛查方法技术

本发明专利技术公开了一种针对食品中真菌毒素的非靶向筛查方法。针对食品样本，使用超高效液相色谱‑高分辨质谱联用平台采集非靶向数据，构建真菌毒素质谱特征提取及非靶向筛查方法，结合保留时间、质谱碎裂规律及多源数据库进行结构识别。该发明专利技术在复杂食品基质中真菌毒素的筛查方面具有明显优势，具有分析效率高，准确度高的优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术建立一种基于超高效液相色谱-高分辨质谱联用平台，提取真菌毒素质谱特征并在食品基质中进行非靶向筛查的分析方法，属于分析检测领域和食品安全领域。

技术介绍

1、真菌毒素是真菌的二级代谢产物，具有低分子量和高累积性，一旦摄入会对人体健康造成极大危害。目前已确定结构的真菌毒素有400多种，常见的真菌毒素包括黄曲霉素b1(afb1)、玉米赤霉烯酮(zen)、脱氧雪腐镰刀烯醇(don)、t-2毒素、赭曲霉素a(ota)、伏马毒素b1(fb1)、恩镰孢菌素a(enniatin a)等。一旦摄入，可能会导致急性或慢性疾病发作，如各种类型的癌症、消化道毒性白癜风、肝脏疾病、各种出血性综合征、人体免疫和神经紊乱等。由于气候、不恰当的生产方法和不良的作物储存条件，使得食品在生产链的各个阶段都容易受到真菌毒素污染，对人和动物健康造成极大威胁。

2、超高效液相色谱-高分辨率质谱联用(uhplc-hrms)技术因其灵敏度及分辨率高、动态线性范围宽、检测覆盖度广等优点，在食品基质的真菌毒素检测中得到广泛应用。然而目前研究多对某些特定的真菌毒素进行靶向分析，无法检测本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种针对食品中真菌毒素的非靶向筛查方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于：步骤(1)使用的预处理方法为：称取200mg食品样本于2mL离心管中，加入1mL乙腈-水-甲酸(79:20:1,v/v)提取剂，涡旋1min以混合均匀；采用恒温混匀仪于室温下提取，恒温混匀仪的参数设置为速度为800rpm的条件下震荡90分钟；随后将离心管置于离心机中在4℃，14000rpm的条件下离心10min，取600μL上清液至另一2mL离心管中，加入等体积量水-乙腈-甲酸(79:20:1,v/v)稀释剂，涡旋1min混匀，而后再次置于离心机中在4℃，14000...

【技术特征摘要】

1.一种针对食品中真菌毒素的非靶向筛查方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于：步骤(1)使用的预处理方法为：称取200mg食品样本于2ml离心管中，加入1ml乙腈-水-甲酸(79:20:1,v/v)提取剂，涡旋1min以混合均匀；采用恒温混匀仪于室温下提取，恒温混匀仪的参数设置为速度为800rpm的条件下震荡90分钟；随后将离心管置于离心机中在4℃，14000rpm的条件下离心10min，取600μl上清液至另一2ml离心管中，加入等体积量水-乙腈-甲酸(79:20:1,v/v)稀释剂，涡旋1min混匀，而后再次置于离心机中在4℃，14000rpm的条件下离心10min；取上清液转移至进样瓶进行下一步分析。

3.根据权利要求1所述方法，其特征在于：步骤(1)超高效液相色谱-高分辨质谱联用平台进行非靶向数据采集，具体参数为：采用超高效液相色谱-高分辨质谱联用的一级、二级质谱同时采集方法进行分析，二级采集模式为data dependent acquisition(dda)top 10，进样室温度为4℃，柱温为45℃，色谱柱为acquity beh c18 column，色谱流动相a、b分别为含有0.1％(v/v)甲酸的5mmol甲酸铵水和含有0.1％(v/v)甲酸的5mmol甲醇-水(95/5,v/v)溶液，流速为0.3ml/min，总分析时间为12min，洗脱梯度(v/v)为：0-1min保持5％b，1-8min线性升至100％b，8-10min为保持100％b，10-10.1min降至5％b，10.1-12min保持5％b平衡柱子；质谱碰撞能量为15、30、45ev混合能量。

4.根据权利要求1所述方法，其特征在于：步骤(2)的原始数据通过质谱仪器自带软件compound discoverer ...

【专利技术属性】
技术研发人员：许国旺，张宇杰，赵春霞，陈田田，梁雯莹，路鑫，
申请(专利权)人：中国科学院大连化学物理研究所，
类型：发明
国别省市：