【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及野生血红栓菌的筛选，具体涉及一种具有抑菌活性的野生血红栓菌的筛选方法。
技术介绍
1、血红栓菌分布较广的一类药用真菌，色泽鲜红，具有多种药用价值，可用于痢疾、咽喉炎、伤口出血、痒疹、肿瘤等多种疾病的治疗。明末清初吴林所著《吴蕈谱》载：“橘皮蕈，红如橘皮，味亦带辣”，即指血红栓。
2、现有的野生血红栓菌的筛选工艺简单，定向性效率差，以及筛选效果低，限制了筛选效率，基于此，本专利技术对其进一步的改进处理。
技术实现思路
1、针对现有技术的缺陷，本专利技术的目的是提供一种具有抑菌活性的野生血红栓菌的筛选方法，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。
2、本专利技术解决技术问题采用如下技术方案：
3、本专利技术提供了一种具有抑菌活性的野生血红栓菌的筛选方法，包括以下步骤：
4、步骤一：将血红栓菌先活化培养，活化温度为28-30℃，活化1-2h，活化结束，将活化的血红栓菌中加入血红栓菌总量10-15％的纳米二氧化硅改性体，以100-150r/min的转速搅拌1-2h，备用；
5、步骤二：将步骤一的血红栓菌送入到培养基中培养处理，培养结束；
6、步骤三：采用琼脂平板涂布步骤二的菌液，于30℃下培养24h；
7、步骤四：将步骤三的菌株采用现有技术滴加指示菌，然后观察菌落，再通过分离纯化、提取菌株dna、再扩增、测序即可。
8、优选地，所述琼脂平板为添加
9、溴甲酚紫的mrs琼脂倾注在
10、优选地，所述步骤二的培养基为1-3重量份葡萄糖、1-2份硫酸锌、1-2份磷酸二氢钾、1-2份硫酸铜、1-2份去离子水和磷酸缓冲溶液0.25份。
11、优选地，所述磷酸缓冲溶液的ph值为5.0。
12、优选地，所述纳米二氧化硅改性体的制备方法为：
13、s01：纳米二氧化硅的预改性处理：
14、将纳米二氧化硅送入到纳米二氧化硅总量3-5倍的改性液中超声改性处理，处理结束，水洗、干燥，再热改进处理，即可；
15、s02：将4-7份蒙脱土、1-3份十二烷基硫酸钠、2-5份羟基乙酸和10-15份壳聚糖溶液，于1000-1500r/min的转速下球磨1-2h，球磨结束，得到球磨浆液；
16、s03：将s01的纳米二氧化硅、球磨浆液按照重量比2:5搅拌反应处理，搅拌结束，水洗、干燥，得到纳米二氧化硅改性体。
17、优选地，所述超声改性处理的超声功率为300-400w，超声时间为1-2h。
18、优选地，所述热改进处理的温度为135-145℃，处理5-10min，然后以1-3℃/min的速率冷却至50-55℃，保温，备用。
19、优选地，所述壳聚糖溶液的质量分数为4-7％。
20、优选地，所述搅拌反应处理的搅拌温度为48-52℃，搅拌时间为1-2h，搅拌转速为1000-1500r/min。
21、优选地，所述改性液包括以下重量份原料：
22、将2-3份硅烷偶联剂kh560、1-3份木质素磺酸钠、1-2份柠檬酸钠溶液、0.25-0.35份盐酸和5-8份去离子水。
23、与现有技术相比，本专利技术具有如下的有益效果：
24、本专利技术的野生血红栓菌的筛选工艺采用血红栓菌先活化培养，再通过纳米二氧化硅改性体协配处理，优化菌株的载体改进，从而更好的定向将抗菌株体筛选出，定向性效率以及筛选效果优异。
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1.一种具有抑菌活性的野生血红栓菌的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述一种具有抑菌活性的野生血红栓菌的筛选方法，其特征在于，所述琼脂平板为添加溴甲酚紫的MRS琼脂倾注在90mm的培养皿形成。
3.根据权利要求1所述一种具有抑菌活性的野生血红栓菌的筛选方法，其特征在于，所述步骤二的培养基为1-3重量份葡萄糖、1-2份硫酸锌、1-2份磷酸二氢钾、1-2份硫酸铜、1-2份去离子水和磷酸缓冲溶液0.25份。
4.根据权利要求3所述一种具有抑菌活性的野生血红栓菌的筛选方法，其特征在于，所述磷酸缓冲溶液的pH值为5.0。
5.根据权利要求1所述一种具有抑菌活性的野生血红栓菌的筛选方法，其特征在于，所述纳米二氧化硅改性体的制备方法为：
6.根据权利要求5所述一种具有抑菌活性的野生血红栓菌的筛选方法，其特征在于，所述超声改性处理的超声功率为300-400W，超声时间为1-2h。
7.根据权利要求5所述一种具有抑菌活性的野生血红栓菌的筛选方法，其特征在于，所述热改进处理的温度为135-145℃，处理5
8.根据权利要求5所述一种具有抑菌活性的野生血红栓菌的筛选方法，其特征在于，所述壳聚糖溶液的质量分数为4-7％。
9.根据权利要求5所述一种具有抑菌活性的野生血红栓菌的筛选方法，其特征在于，所述搅拌反应处理的搅拌温度为48-52℃，搅拌时间为1-2h，搅拌转速为1000-1500r/min。
10.根据权利要求5所述一种具有抑菌活性的野生血红栓菌的筛选方法，其特征在于，所述改性液包括以下重量份原料：
...【技术特征摘要】
1.一种具有抑菌活性的野生血红栓菌的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述一种具有抑菌活性的野生血红栓菌的筛选方法，其特征在于，所述琼脂平板为添加溴甲酚紫的mrs琼脂倾注在90mm的培养皿形成。
3.根据权利要求1所述一种具有抑菌活性的野生血红栓菌的筛选方法，其特征在于，所述步骤二的培养基为1-3重量份葡萄糖、1-2份硫酸锌、1-2份磷酸二氢钾、1-2份硫酸铜、1-2份去离子水和磷酸缓冲溶液0.25份。
4.根据权利要求3所述一种具有抑菌活性的野生血红栓菌的筛选方法，其特征在于，所述磷酸缓冲溶液的ph值为5.0。
5.根据权利要求1所述一种具有抑菌活性的野生血红栓菌的筛选方法，其特征在于，所述纳米二氧化硅改性体的制备方法为：
6.根据权利要求5所述一种具有抑菌活性...
【专利技术属性】
技术研发人员：王南南，
申请(专利权)人：济宁市农业科学研究院，
类型：发明
国别省市：
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