【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种火龙果式比色微球探针的制备方法及在黄曲霉毒素b1超敏即时检测中的应用。
技术介绍
1、黄曲霉毒素是寄生曲霉和黄曲霉共同作用下产生的次级代谢产物，它广泛存在于谷物、食品和饲料中，可能导致癌症、dna突变和畸胎。黄曲霉毒素b1是黄曲霉毒素的一种，其分布最广、毒性最强、危害最大。鉴于黄曲霉毒素b1的低允许限量，亟需灵敏、简便的分析方法来评估食品和农产品中微量黄曲霉毒素b1。
2、目前，常用的黄曲霉毒素b1检测手段有高效液相色谱和液相色谱-质谱联用等。虽然这些方法准确度高，但通常需要大型仪器和专业人员，操作繁琐且耗时。基于农场、海关和超市等资源有限地区快速、现场筛查的需要，免疫分析法已被广泛用于饲料与谷物中黄曲霉毒素b1的检测。常见的黄曲霉毒素b1的免疫检测方法有酶联免疫吸附试验、电化学免疫分析和比色免疫分析等。其中，侧流免疫分析(lfia)以其简单、快速、用户友好等优势而得到广泛的认可。
3、商业化检测黄曲霉毒素b1的lfia主要是以胶体金和荧光材料作为标记物进行定性或半定量的比色检测。胶体金纳米颗粒...
【技术保护点】
1.一种火龙果式比色微球探针的制备方法，其特征在于以巯基化修饰的树枝状介孔二氧化硅为模板dSi-SH，以油相金银合金纳米颗粒Au-Ag NPs为比色信号，通过巯基和Au的配位作用，实现金银合金纳米颗粒Au-Ag NPs在dSi-SH上的高密度负载形成组装体，然后利用正辛基三甲氧基硅烷OTMS在组装体表面发生水解缩合反应，实现从有机相到水相的相转移过程，接着依次在组装体上生长包覆二氧化硅、通过3-氨丙基三甲氧基硅烷进行氨基修饰以及通过丁二酸酐进行羧基修饰，将羧基修饰的组装体与抗体进行偶联以及封闭，最终获得火龙果式比色微球探针。
2.如权利要求1所述的一种火龙...
【技术特征摘要】
1.一种火龙果式比色微球探针的制备方法，其特征在于以巯基化修饰的树枝状介孔二氧化硅为模板dsi-sh，以油相金银合金纳米颗粒au-ag nps为比色信号，通过巯基和au的配位作用，实现金银合金纳米颗粒au-ag nps在dsi-sh上的高密度负载形成组装体，然后利用正辛基三甲氧基硅烷otms在组装体表面发生水解缩合反应，实现从有机相到水相的相转移过程，接着依次在组装体上生长包覆二氧化硅、通过3-氨丙基三甲氧基硅烷进行氨基修饰以及通过丁二酸酐进行羧基修饰，将羧基修饰的组装体与抗体进行偶联以及封闭，最终获得火龙果式比色微球探针。
2.如权利要求1所述的一种火龙果式比色微球探针的制备方法，其特征在于所述油相金银合金纳米颗粒au-ag nps的制备方法为：将硝酸银溶解在油胺中，在氩气气氛下将溶液加热至95~105℃形成a溶液；将氯金酸、1-十八烯和油胺的混合溶液记为b溶液，b溶液注入a溶液中，并将反应液加热升温至115-125℃反应0.4-0.8h，然后冷却至室温；加入乙醇，摇晃至有沉淀产生，离心弃去上清，所得沉淀均匀分散于氯仿中，即得到油相au-ag nps分散液；其中，a溶液中硝酸银与b溶液中氯金酸的摩尔比是8~12:1，优选为10:1。
3.如权利要求2所述的一种火龙果式比色微球探针的制备方法，其特征在于所述a溶液中硝酸银的配制浓度是0.08~0.15mmol/ml，a溶液和b溶液混合后反应液中硝酸银、1-十八烯和油胺的投料比是1mmol：2~3ml：8~15ml。
4.如权利要求1所述的一种火龙果式比色微球探针的制备方法，其特征在于金银合金纳米颗粒au-ag nps在dsi-sh上的高密度负载过程为：将晾干的dsi-sh沉淀加入至浓度为1.5~3mg·ml-1的油相au-ag nps的氯仿分散液中，dsi-sh沉淀与油相au-ag nps的质量比是1:1.2~1.6，超声5~10min后，离心，待沉淀中残余的氯仿溶剂挥发后，即得金银合金纳米颗粒au-ag nps与dsi-sh...
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