【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及白茅根酸性多糖提取，更具体地说是涉及一种从白茅根中提取的酸性多糖、制备方法及应用。
技术介绍
1、白茅根是禾本科植物白茅的干燥根茎，又称为甜根草、茅草根、丝茅草等，春秋两季均可采收，是我国传统中药材之一，在全国各地均有野生分布。《本草纲目》记载白茅根可治疗劳伤虚羸、补中益气、除瘀血、利小便、下五淋、除肠胃热邪、止渴坚筋、妇人崩中等。白茅根中含有多种具有药用价值的天然化合物，主要包括多糖类、三萜类、黄酮类、木脂素、内酯、类固醇、有机酸等。
2、我国ii型糖尿病(t2dm)患者占总糖尿病患的90％以上，研究证明t2dm的发展主要受胰腺β细胞功能障碍和胰岛素抵抗的影响。通常用于治疗这种疾病的药物往往具有副作用大、选择有限和成本高等缺陷。植物多糖因其低毒性、安全性高，具有良好的生物调节能力和生物活性受到广大学者的关注，其可以作为理想的天然药物。
3、白茅根多糖通常用于调节免疫、利尿降压、抑菌、抗炎镇痛、抗肿瘤、抗氧化、改善肾功能等作用。白茅根多糖为白茅根中一种重要的的活性成分，但目前对白茅根多糖的研究集中在其粗多糖的提取工艺方面，而对其均一多糖的结构表征与降糖活性的研究却未见报道。
4、因此，如何提供一种从白茅根中提取的酸性多糖是本领域技术人员亟需解决的问题。
技术实现思路
1、本专利技术的目的之一是提供一种从白茅根中提取的酸性多糖，所述酸性多糖为多糖rps-ds0.1，总糖和蛋白质质量分数分别为91.22％和0.02％，重均分子量为29.
2、
3、优选地，所述酸性多糖的主要骨架为→6)-β-d-glcp-(1→,→3,6-α-d-gal p-(1→,β-l-araf-(1→,and→4)-β-l-xylp-(1→。
4、本专利技术的另一目的是提供所述的酸性多糖的提取方法，过程包括：
5、1)白茅根药材粉末为原料，按液料比为10:1～30:1ml/g加入蒸馏水，高温提取，超声提取、收集滤液并浓缩、醇沉，超纯水复溶，过滤后冻干，得到浅棕色的粗多糖prs；
6、2)以sevage试剂去除蛋白质，然后透析24～48h，透析后将多糖溶液进行浓缩、冻干，得到精制白茅根多糖；
7、3)将精制的白茅根多糖配置成质量浓度为10mg/ml的多糖溶液，用de ae-52纤维素层析柱进行初步纯化，依次用0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mol/l的nacl溶液进行洗脱，收集洗脱液，然后流水透析24～48h后冻干；
8、4)采用sephadexg-100凝胶层析柱对得到的多糖成分进一步分离纯化，洗脱，收集洗脱液，浓缩冻干，得到酸性多糖rps-ds0.1。
9、优选地，步骤1)中，高温提取为在100～120℃高压灭菌锅中提取5～30min，得到提取液。
10、优选地，步骤1)中，超声提取、收集滤液并浓缩、醇沉的过程为：在超声功率为300～500w的条件下提取15～35min，收集滤液，在50～60℃下浓缩，再加入4倍体积的无水乙醇，4℃条件静置12～24h，离心，收集沉淀物。
11、优选地，步骤2)中，以sevage试剂去除蛋白质为将rps溶液与sevage试剂混合搅拌20～50min，去除析出蛋白质，重复操作3～5次。
12、优选地，步骤2)中，所述透析为用1000da透析袋流水透析24～48h。
13、优选地，步骤3)中，所述洗脱流速为1ml/min，然后收集洗脱液4ml/管，采用苯酚-硫酸法对多糖含量进行检测，以收集管数为横坐标，490nm处吸光值为纵坐标，绘制洗脱曲线，收集第38管～65管洗脱液，减压浓缩，用1000da透析袋流水透析24～48h后冻干。
14、优选地，步骤4)中，所述洗脱为使用去离子水在0.5ml/min的流速下洗脱，收集洗脱液4ml/管，采用苯酚-硫酸法测定洗脱液在490nm处吸光值，并绘制洗脱曲线，根据峰值段收集洗脱液，将收集洗脱液浓缩后冻干。
15、本专利技术的目的还在于提供所述的酸性多糖或所述方法制备到的酸性多糖在制备降血糖药物中的应用。经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本专利技术达到的技术效果为：
16、(1)按照本专利技术提取分离工艺可以制备得到一种分子量均一的白茅根酸性多糖rps-ds0.1，其分子量为29.79kda。
17、(2)本专利技术所得白茅根酸性多糖rps-ds0.1，具有优异的降血糖作用，弥补现有技术无降血糖活性的空白。
18、(3)本专利技术进一步解析了具有降血糖活性白茅根多糖的结构，为为白茅根以及多糖的开发和应用提供参考和数据支撑。
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1.一种从白茅根中提取的酸性多糖，其特征在于，所述酸性多糖为多糖RPS-DS0.1，总糖和蛋白质质量分数分别为91.22％和0.02％，重均分子量为29.79kDa，由鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖和葡萄糖醛酸组成，摩尔比分别为2.48:11.76:20.08:50.92:10.25:2.08:2.12，所述多糖RPS-DS0.1的结构式如式I所示：
2.根据权利要求1所述的一种从白茅根中提取的酸性多糖，其特征在于，其主要骨架为→6)-β-D-Glcp-(1→,→3,6-α-D-Galp-(1→,β-L-Araf-(1→,and→4)-β-L-Xylp-(1→。
3.权利要求1或2所述的酸性多糖的提取方法，其特征在于，过程包括：
4.根据权利要求3所述的酸性多糖的提取方法，其特征在于，步骤1)中，高温提取为在100～120℃高压灭菌锅中提取5～30min，得到提取液。
5.根据权利要求4所述的酸性多糖的提取方法，其特征在于，步骤1)中，超声提取、收集滤液并浓缩、醇沉的过程为：在超声功率为300～500W的条件下提取1
6.根据权利要求5所述的酸性多糖的提取方法，其特征在于，步骤2)中，以Sevage试剂去除蛋白质为将RPS溶液与Sevage试剂混合搅拌20～50min，去除析出蛋白质，重复操作3～5次。
7.根据权利要求6所述的酸性多糖的提取方法，其特征在于，步骤2)中，所述透析为用1000Da透析袋流水透析24～48h。
8.根据权利要求7所述的酸性多糖的提取方法，其特征在于，步骤3)中，所述洗脱流速为1mL/min，然后收集洗脱液4mL/管，采用苯酚-硫酸法对多糖含量进行检测，以收集管数为横坐标，490nm处吸光值为纵坐标，绘制洗脱曲线，收集第38管～65管洗脱液，减压浓缩，用1000Da透析袋流水透析24～48h后冻干。
9.根据权利要求8所述的酸性多糖的提取方法，其特征在于，步骤4)中，所述洗脱为使用去离子水在0.5mL/min的流速下洗脱，收集洗脱液4mL/管，采用苯酚-硫酸法测定洗脱液在490nm处吸光值，并绘制洗脱曲线，根据峰值段收集洗脱液，将收集洗脱液浓缩后冻干。
10.权利要求2所述的酸性多糖或权利要求9的方法制备到的酸性多糖在制备降血糖药物中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种从白茅根中提取的酸性多糖，其特征在于，所述酸性多糖为多糖rps-ds0.1，总糖和蛋白质质量分数分别为91.22％和0.02％，重均分子量为29.79kda，由鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖和葡萄糖醛酸组成，摩尔比分别为2.48:11.76:20.08:50.92:10.25:2.08:2.12，所述多糖rps-ds0.1的结构式如式i所示：
2.根据权利要求1所述的一种从白茅根中提取的酸性多糖，其特征在于，其主要骨架为→6)-β-d-glcp-(1→,→3,6-α-d-galp-(1→,β-l-araf-(1→,and→4)-β-l-xylp-(1→。
3.权利要求1或2所述的酸性多糖的提取方法，其特征在于，过程包括：
4.根据权利要求3所述的酸性多糖的提取方法，其特征在于，步骤1)中，高温提取为在100～120℃高压灭菌锅中提取5～30min，得到提取液。
5.根据权利要求4所述的酸性多糖的提取方法，其特征在于，步骤1)中，超声提取、收集滤液并浓缩、醇沉的过程为：在超声功率为300～500w的条件下提取15～35min，收集滤液，在50～60℃下浓缩，再加入4倍体积的无水乙醇，4℃...
【专利技术属性】
技术研发人员：路祺，朱明华，刘梦然，王春海，包怡红，陈春霞，祖元刚，
申请(专利权)人：东北林业大学，
类型：发明
国别省市：
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