【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分子标记，具体涉及油菜开花关键基因bnaft.a2作为油菜开花时间改良的分子标记及应用。
技术介绍
1、植物开花是从营养生长到生殖生长非常重要的一个阶段，植物适时开花决定植物的繁衍能力以及适应性，作物开花的早晚深刻影响着作物的高产稳产、品质和区域分布，育种家们将适宜的开花时间作为关键农艺性状之一。甘蓝型油菜是我国最重要的经济作物之一，近几年大力开发冬闲田种植油菜，而开发冬闲田，进行稻油轮作必须严格控制油菜熟期，早熟油菜可以解决与水稻的茬口矛盾，培育优良的早熟油菜是充分利用冬闲田和油菜产能提升的关键。早熟与早花相互联系，因此解析油菜开花调控的分子机制，寻找优良等位基因型，利用生物技术培育适应不同环境下的优良品种极为重要。
2、植物开花由遗传和环境信号决定，在拟南芥中，floweringlocus(ft)是成花调控网络中成花整合因子，编码磷脂酰乙醇胺结合蛋白，在叶片的韧皮部被光周期途径的co特异性诱导，在春化途径中，flc结合在ft的第一个内含子上的carg盒来抑制ft的表达。ft蛋白产生后运输到顶端分生组织与14-3-3蛋白和fd转录因子结合形成成花素激活复合物fac，激活下游soc1、ap1和lfy的表达，进而调控植物开花。由于芸苔属作物经历了一系列的全基因复制，在甘蓝型油菜中出现了多个基因拷贝。明确bnaft的各个拷贝的功能，对于解析甘蓝型开花调控网络的分子机制，扩大油菜的种植范围，具有重要意义。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供了油菜开花关键
2、本专利技术提供了甘蓝型油菜bnaft基因不同拷贝突变在调控油菜开花时间中的应用。
3、优选的，所述甘蓝型油菜bnaft.a2基因不同单倍型包括分离自冬性甘蓝型油菜中部分序列如seq id no.1所示的bnaft.a2基因和分离自春性甘蓝型油菜中的部分序列如seq id no.2所示的bnaft.a2基因。
4、本专利技术提供了一条编辑甘蓝型油菜bnaft基因所有拷贝型的sgrna，所述sgrna的核苷酸序列如seq id no.7所示。
5、本专利技术提供一条分离自冬性甘蓝型油菜中的部分序列如seq id no.1所示的bnaft.a2基因。
6、本专利技术提供了一组用于甘蓝型油菜花期推迟的检测用分子标记引物对，所述检测用分子标记引物对以上述bnaft.a2基因为目标基因。
7、优选的，包括核苷酸序列如seq id no.5所述的上游引物和seq id no.6所示的下游引物。
8、本专利技术提供了一条分离自春性甘蓝型油菜中的部分序列如seq id no.2所示的bnaft.a2基因。
9、本专利技术提供了一组用于甘蓝型油菜花期提前和早熟育种的分子标记引物对，所述分子标记引物对以上述bnaft.a2基因为目标基因。
10、优选的，包括核苷酸序列如seq id no.3所示的上游引物和seq id no.4所示的下游引物。
11、本专利技术还提供了上述sgrna、上述bnaft.a2基因、上述检测用分子标记引物对、上述bnaft.a2基因或上述分子标记引物对在油菜开花时间改良中的应用。
12、有益效果：本专利技术提供了甘蓝型油菜bnaft基因不同拷贝突变在调控油菜开花时间中的应用，通过考察bnaft不同拷贝发生突变的材料，发现bnaft.a2编辑后推迟开花效应最明显，且不同bnaft拷贝发生编辑的突变体在不同环境条件下具有差异。本专利技术还比对了从春性甘蓝型油菜和冬性甘蓝型油菜中分离的bnaft.a2的基因序列，并设计了两种单倍型的特异性分子标记。
13、本专利技术还设计了一条敲除bnaft四个拷贝的sgrna，通过crispr方法转化春性甘蓝型油菜xiaoyun中，获得编辑苗，t1代通过hi-tom高通量测序得到了bnaft不同拷贝发生编辑的突变体。本专利技术还验证了在温室观察bnaft不同拷贝发生编辑后对成花转换和下游开花调控基因的影响，只有bnaft.a2突变后成花转换推迟以及下游开花调控基因的表达显著下降。本专利技术可用于常规油菜和杂交油菜开花期和生育期的辅助选择育种。
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1.甘蓝型油菜BnaFT.A2基因不同单倍型在调控油菜开花时间中的应用。
2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述甘蓝型油菜BnaFT.A2基因不同单倍型包括分离自冬性甘蓝型油菜中部分序列如SEQ ID No.1所示的BnaFT.A2基因和分离自春性甘蓝型油菜中的部分序列如SEQ ID No.2所示的BnaFT.A2基因。
3.一条编辑甘蓝型油菜BnaFT基因所有拷贝型的sgRNA，其特征在于，所述sgRNA的核苷酸序列如SEQ ID No.7所示。
4.一条分离自冬性甘蓝型油菜中的部分序列如SEQ ID No.1所示的BnaFT.A2基因。
5.一组用于甘蓝型油菜花期推迟的检测用分子标记引物对，其特征在于，所述检测用分子标记引物对以权利要求4所述BnaFT.A2基因为目标基因。
6.根据权利要求5所述检测用分子标记引物对，其特征在于，包括核苷酸序列如SEQ IDNo.5所述的上游引物和SEQ ID No.6所示的下游引物。
7.一条分离自春性甘蓝型油菜中的部分序列如SEQ ID No.2所示的BnaFT
8.一组用于甘蓝型油菜花期提前和早熟育种的分子标记引物对，其特征在于，所述分子标记引物对以权利要求7所述BnaFT.A2基因为目标基因。
9.根据权利要求8所述分子标记引物对，其特征在于，包括核苷酸序列如SEQ ID No.3所示的上游引物和SEQ ID No.4所示的下游引物。
10.权利要求3所述sgRNA、权利要求4所述BnaFT.A2基因、权利要求5或6所述检测用分子标记引物对、权利要求7所述BnaFT.A2基因或权利要求8或9所述分子标记引物对在油菜开花时间改良中的应用。
...【技术特征摘要】
1.甘蓝型油菜bnaft.a2基因不同单倍型在调控油菜开花时间中的应用。
2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述甘蓝型油菜bnaft.a2基因不同单倍型包括分离自冬性甘蓝型油菜中部分序列如seq id no.1所示的bnaft.a2基因和分离自春性甘蓝型油菜中的部分序列如seq id no.2所示的bnaft.a2基因。
3.一条编辑甘蓝型油菜bnaft基因所有拷贝型的sgrna，其特征在于，所述sgrna的核苷酸序列如seq id no.7所示。
4.一条分离自冬性甘蓝型油菜中的部分序列如seq id no.1所示的bnaft.a2基因。
5.一组用于甘蓝型油菜花期推迟的检测用分子标记引物对，其特征在于，所述检测用分子标记引物对以权利要求4所述bnaft.a2基因为目标基因。
6.根据权利...
【专利技术属性】
技术研发人员：洪登峰，万明，赵大伟，宋易先，林圣哲，杨光圣，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：
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