【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于重组酿酒酵母，尤其涉及一种低产异丁醇和/或高产乙偶姻的重组酿酒酵母及其构建方法与应用。
技术介绍
1、高级醇，俗称杂醇油，是具有2个以上碳链骨架的一价醇类的统称。正丙醇、异丁醇、异戊醇、2-甲基-1-丁醇(活性戊醇)、2-苯乙醇是酿酒酵母产生的主要高级醇类物质，各高级醇类物质均具有自身独特的呈香呈味特征。适量的高级醇能够赋予酒丰满的口感，柔和协调酒体，但其含量过高时，极易给酒体带来异杂味，饮用后易产生口渴、头痛等症状，导致易醉酒难解酒，对人体产生明显副作用，有害于身体健康。
2、乙偶姻即3-羟基-2-丁酮，自然存在于草莓、苹果和香蕉等食品中，具有奶油香气，对酒类风味具有重要影响，广泛应用于食品行业；在医药行业中，不同构型的乙偶姻可以用来作为药物中间体合成稀有药物；在化学合成工业中，乙偶姻也是多种化学产品的合成前体。另外，乙偶姻在烟草行业、塑料工业、化学工业及涂料工业等行业也具有广泛的应用。并且作为一种重要的四碳平台化合物，乙偶姻已被美国能源部列为优先进行工艺开发利用的30种平台化合物之一。目前，乙偶姻有酶法转换法、化学合成法和生物发酵法3种主要的生产方法。其中，生物发酵法因原料获得途径较多，产品绿色天然、条件温和、环境友好等优势，应用较为广泛。酿酒酵母酒精发酵过程中，乙偶姻可以产生四甲基吡嗪(ttmp)，又名川芎嗪，其作为中药材川芎根茎的主要活性生物碱成分，具有治疗心脑血管疾病，抑制血小板集聚和保肝护肝的药理作用。ttmp在酒体中具有较低的风味阈值，能对其他香味物质起到明显的烘托叠加作用，丰满酒的香气。
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种低产异丁醇和/或高产乙偶姻的重组酿酒酵母，采用本专利技术重组酿酒酵母制备酒，能够使酒产品中异丁醇的含量降低11.12％，使酒产品中乙偶姻的含量提高近4倍左右。
2、为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供了以下技术方案：
3、本专利技术提供了一种低产异丁醇和/或高产乙偶姻的重组酿酒酵母，所述重组酿酒酵母通过敲除酿酒酵母菌中的thi3基因、adh5基因和bdh1基因，过表达bdh2基因，且插入alsd基因所得。
4、优选的，所述重组酿酒酵母为酿酒酵母saccharomyces cerevisiae ts002，酿酒酵母ts002的保藏编号为cgmcc no.28089。
5、本专利技术还提供了一种上述重组酿酒酵母的构建方法，包括如下步骤：
6、敲除酿酒酵母菌中的thi3基因、adh5基因后，过表达bdh2基因，然后敲除bdh1基因并插入alsd基因，得低产异丁醇和/或高产乙偶姻的重组酿酒酵母。
7、优选的，所述酿酒酵母菌包括酿酒酵母by4741。
8、本专利技术还提供了上述重组酿酒酵母或上述构建方法在酿酒中的应用。
9、本专利技术还提供了上述重组酿酒酵母或上述构建方法在生产低异丁醇和/或高乙偶姻酒产品中的应用。
10、本专利技术还提供了一种降低酒产品中异丁醇含量和/或提高酒产品中乙偶姻含量的方法，包括如下步骤：将上述重组酿酒酵母接种于发酵原料中进行发酵。
11、优选的，所述发酵原料包括葡萄。
12、优选的，所述发酵温度为25-30℃。
13、本专利技术还提供了一种含有低含量异丁醇和/或高含量乙偶姻的酒产品，所述酒产品是以上述重组酿酒酵母为发酵菌酿制而成。
14、本专利技术的有益效果：
15、本专利技术提供的重组酿酒酵母能够在厌氧和耗氧条件下生长繁殖，且在厌氧条件下酒精发酵能力更强，同时具有耐酸的特点，生长周期短，能够实现酒产品的快速发酵，产物合成效率高。将本专利技术提供的重组酿酒酵母应用于酿酒产业中时，能够大幅度降低酒产品中异丁醇含量、提高酒产品中乙偶姻含量，另外本专利技术重组酿酒酵母具有协调酒体、丰满酒气、呈现独特的呈香呈味特征，以及提高酒产品品质的作用。本专利技术重组酿酒酵母对于降低酿酒工业粮耗、缩短发酵周期、改善酒体品质具有重要意义。
16、采用本专利技术提供的重组酿酒酵生产葡萄酒时，可以使葡萄酒中异丁醇含量降低11.12％，乙偶姻含量提高近4倍左右。
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1.一种低产异丁醇和/或高产乙偶姻的重组酿酒酵母，其特征在于，所述重组酿酒酵母通过敲除酿酒酵母菌中的THI3基因、ADH5基因和BDH1基因，过表达BDH2基因，且插入ALSD基因所得。
2.根据权利要求1所述的重组酿酒酵母，其特征在于，所述重组酿酒酵母为酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae TS002，酿酒酵母TS002的保藏编号为CGMCC NO.28089。
3.一种权利要求1或2所述重组酿酒酵母的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于，所述酿酒酵母菌包括酿酒酵母By4741。
5.权利要求1或2所述重组酿酒酵母或权利要求3所述构建方法在酿酒中的应用。
6.权利要求1或2所述重组酿酒酵母或权利要求3所述构建方法在生产低异丁醇和/或高乙偶姻酒产品中的应用。
7.一种降低酒产品中异丁醇含量和/或提高酒产品中乙偶姻含量的方法，其特征在于，包括如下步骤：
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述发酵原料包括葡萄。
9.
10.一种含有低含量异丁醇和/或高含量乙偶姻的酒产品，其特征在于，所述酒产品是以权利要求1或2所述重组酿酒酵母为发酵菌酿制而成。
...【技术特征摘要】
1.一种低产异丁醇和/或高产乙偶姻的重组酿酒酵母，其特征在于，所述重组酿酒酵母通过敲除酿酒酵母菌中的thi3基因、adh5基因和bdh1基因，过表达bdh2基因，且插入alsd基因所得。
2.根据权利要求1所述的重组酿酒酵母，其特征在于，所述重组酿酒酵母为酿酒酵母saccharomyces cerevisiae ts002，酿酒酵母ts002的保藏编号为cgmcc no.28089。
3.一种权利要求1或2所述重组酿酒酵母的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于，所述酿酒酵母菌包括酿酒酵母by4741。
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