【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分子生物学和植物基因工程，具体为一种通过农杆菌介导建立转基因丹参毛状根生产丹参素的方法。
技术介绍
1、丹参素分子式为c9h10o5，化学名称为d-(+)-β(3,4-二羟基苯基)乳酸，为酚类芳香酸化合物，含有邻苯二酚结构。丹参素具有广泛的药理学作用，包括心血管系统作用、神经系统作用、抗炎作用和抗肿瘤作用。但因为丹参素是酚酸类成分生物合成途径的中间产物，因此在丹参中的积累水平较低。
2、目前丹参素主要从中药材丹参中提取，但无论是传统水醇法、酶提法，还是微波萃取法，都存在丹参素酚性成分损失较大，含量不稳定等难题，而现有化学全合成丹参素方法，步骤复杂，选择性差，产率低，且环境污染严重。
3、采用生物学方法合成丹参素成为了主要方向，若能提高生物体中丹参素的积累水平，对丹参素的生产具有十分重要的意义。
4、细胞色素p450酶(cytochrome p450s,cyp450)分为p450单氧化酶(cytochromep450 monooxygenases，cyp)以及细胞色素p450还原酶(cytochrome p450 red，cpr)。cyp98a是细胞色素p450家族98a亚家族酶，参与植物绿原酸及迷迭香酸合成过程，目前已经从拟南芥、芸香、彩叶草和红三叶草等都克隆出cyp98a基因。一般认为该基因可能与迷迭香酸的合成有关。
5、cn115216479 a公开了一种重组基因工程菌，以大肠菌e.colibl21(de3)为宿主菌构建双酶共表达大肠杆菌体系，同时表达经过改造的c
6、该方案需要使用特定底物，还无法提高植物体内丹参素含量，不能实现从丹参中获取丹参素。
技术实现思路
1、本专利技术旨在提供丹参cyp98a75基因的应用。
2、本专利技术还提供了一种利用丹参毛状根生成丹参素的方法。
3、本专利技术技术方案为：
4、细胞色素p450酶或者丹参cyp98a75基因在提高丹参毛状根中的丹参素含量方面的应用。
5、所述的细胞色素p450酶为seq id no.1所示的蛋白或者其同源蛋白。
6、所述丹参cyp98a75基因编码如seq id no.1所示的蛋白或者其同源蛋白。优选的，丹参cyp98a75基因含有如seq id no.2所示的核苷酸序列：(genbank:kp337735.1)。
7、seq id no.1:maplallllslpvffllhnlyyrlrfrlppgprpwpiv gnlydvkplqfrcfadwahsygpiisvwfgstlnvvvsstelakevlkekdqqladryrsrtatrltkygqdliwadygphyvkvrkvctvalfsaksleslrpiredevsamvesiyndctapgnsskslllrkylgavsfnnitriafgkryvdtegrihkqgeemrsiadnrlrlgasraiaehipwlrwmfplneeefakhaarrdrltreimedhniarqksggakqhfcdalltlkekhdltddtiigllwdmihagmdttaisvewamaelirnprvlqkvqeeldrvignervmteldfanlpylrcvakeslrlhpptplmlphrastnvkiggydipkgstvhvnvwavardpevwknplefrperfleddvdikghdfrllpfgagrricpgaqlgldmvtsmlgrllhhfkwappsgvspeainiaerpgvvtfmgtpleavatprlpanlyervavdi
8、seq id no.2:atggcgcctctcgctctcctcctcctctccctccctgtcttcttcctcctccacaacc tctactaccgcctccgcttccgcctccccccgggcccccgcccctggccgatcgtcggcaacctctacgacgtcaagccgctccagttccgctgcttcgccgattgggcccactcctacggccccatcatatccgtctggttcggctccaccctcaacgtcgtcgtttccagcaccgagctcgccaaggaggttctcaaggagaaggatcagcagctcgccgaccgctaccgcagccgcaccgccaccaggctcaccaagtacggtcaggacctgatttgggccgactatggccctcactacgtcaaggtgcggaaggtctgcaccgtcgcgctcttctccgccaagagcctcgaatcgttgaggccaattagagaggatgaggtctccgccatggtcgagtccatctacaatgactgcaccgcccctggcaactcgagtaagagcctgctgctaaggaaatatctaggagcagtgtcattcaacaacattacaagaatt gcattcgggaagagatatgtggatactgaagggagaatacacaagcaaggagaggagatgaggtccattgctgacaacaggttaaggctcggtgcctcccgtgccattgctgagcacattccatggctccgatggatgtttccactgaacgaagaggagtttgctaaacatgcagctcgcagggaccgtctcacacgagaaattatggaagaccacaacatcgcccgccagaagagtggaggagccaagcagcacttctgtgatgcattgctgacactaaaagagaaacatgatctaactgatgacaccatcattggccttctttgggacatgatccatgctggaatggacaccactgcgatatctgtggaatgggccatggcagagctgatcaggaacccaagggtgctacagaaggttcaagaggagctcgaccgtgtcattgggaacgaacgtgtgatgacagaacttgactttgcaaatcttccctacctacggtgtgtggccaaggaatcactcagattgcaccctccgaccccgctcatgcttcctcaccgtgccagtaccaatgtgaagatcggaggctacgacatccccaagggctcaaccgtgcatgtcaacgtgtgggcagttgcacgtgatcccgaggtgtggaaaaatcccctggagtttcgcccggagaggttccttgaggacgacgttgatataaaaggacatgattttaggcttctaccgttcggtgctggaagaagaatatgcccgggggcgcaactcggcctcgacatggtga本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.丹参CYP98A75基因在提高丹参毛状根中丹参素含量方面的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述丹参CYP98A75基因编码如SEQ IDNo.1所示的蛋白或者其同源蛋白。
3.丹参CYP98A75基因的过表达载体在提高丹参毛状根中丹参素含量方面的应用。
4.含有丹参CYP98A75基因的过表达载体的农杆菌在提高丹参毛状根中丹参素含量方面的应用。
5.一种构建生产丹参素的丹参毛状根的方法，其特征在于，步骤包括：将携带丹参CYP98A75基因的过表达载体转化农杆菌，并用农杆菌诱导丹参，获得丹参毛状根。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的过表达载体为PHB-Flag表达载体。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的农杆菌为农杆菌C58C1。
8.一种生产丹参素的方法，其特征在于，从权利要求5-7任一项所述方法所获得丹参毛状根中提取丹参素。
【技术特征摘要】
1.丹参cyp98a75基因在提高丹参毛状根中丹参素含量方面的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述丹参cyp98a75基因编码如seq idno.1所示的蛋白或者其同源蛋白。
3.丹参cyp98a75基因的过表达载体在提高丹参毛状根中丹参素含量方面的应用。
4.含有丹参cyp98a75基因的过表达载体的农杆菌在提高丹参毛状根中丹参素含量方面的应用。
5.一种构建生产丹...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈万生，冯婧娴，周正，霍俊成，段永豪，肖莹，邱实，季倩，杨颖博，
申请(专利权)人：上海中医药大学，
类型：发明
国别省市：
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