一种高立体选择性转氨酶突变体、编码基因及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种高立体选择性转氨酶突变体、编码基因及其应用，属于生物工程技术领域。所述转氨酶突变体是氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的紫色色杆菌来源转氨酶通过氨基酸突变所得的突变体，其中，所述氨基酸突变的位点为第118位、第225位、第418位中的至少一个，且第118位的天冬酰胺突变为甘氨酸，第225位的甘氨酸突变为丙氨酸，第418的半胱氨酸突变为苏氨酸。本发明专利技术提供的转氨酶突变体相对野生型转氨酶具有更高的酶活力和立体选择性，可以以4‑羟基‑2‑丁酮为底物制备(R)‑3‑氨基丁醇，产物的收率高，光学纯度高，无副产物产生。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物工程，具体涉及一种针对紫色色杆菌来源转氨酶改造的转氨酶突变体、编码基因及其在制备(r)-3-氨基丁醇中的应用。

技术介绍

1、度鲁特韦(dolutegravir，dtg)，化学名：(4r,12as)-n-[(2,4-二氟苯基)甲基]-3,4,6,8,12,12chemicalbooka-六氢-7-羟基-4-甲基-6,8-二氧代-2h-吡啶并[1',2':4,5]吡嗪并[2,1-b][1,3]噁嗪-9-甲酰胺，cas登录号:1051375-16-6。度鲁特韦是一种针对人类免疫缺陷病毒类型1(hiv-1)整合酶的抑制剂，主要用于治疗艾滋病病毒感染，对于遏制艾滋病传播具有至关重要的作用。

2、(r)-3-氨基丁醇是合成度鲁特韦的重要手性六元环构建块，在度鲁特韦的合成过程中，(r)-3-氨基丁醇的手性纯度决定了后续中间体的纯度，对合成高质量的度鲁特韦起到重要作用。光学纯度对于药物及其中间体的应用具有显著的影响。不同立体异构体在生物学上可能表现出各不相同的活性、代谢动力学和毒性。高光学纯度是确保药物能够以最佳方式与靶标分子相互作用，提高本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种高立体选择性转氨酶突变体，其特征在于，所述转氨酶突变体是氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的紫色色杆菌来源转氨酶通过氨基酸突变所得的突变体，其中，所述氨基酸突变的位点为第118位、第225位、第418位中的至少一个，且第118位的天冬酰胺突变为甘氨酸，第225位的甘氨酸突变为丙氨酸，第418的半胱氨酸突变为苏氨酸。

2.如权利要求1所述的高立体选择性转氨酶突变体，其特征在于，所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.3-SEQ ID NO.8所示。

3.一种转氨酶突变体基因，其特征在于，所述基因用于编码如权利要求1或2所述的高立体选择性转氨酶突变体。...

【技术特征摘要】

1.一种高立体选择性转氨酶突变体，其特征在于，所述转氨酶突变体是氨基酸序列如seq id no.1所示的紫色色杆菌来源转氨酶通过氨基酸突变所得的突变体，其中，所述氨基酸突变的位点为第118位、第225位、第418位中的至少一个，且第118位的天冬酰胺突变为甘氨酸，第225位的甘氨酸突变为丙氨酸，第418的半胱氨酸突变为苏氨酸。

2.如权利要求1所述的高立体选择性转氨酶突变体，其特征在于，所述突变体的氨基酸序列如seq id no.3-seq id no.8所示。

3.一种转氨酶突变体基因，其特征在于，所述基因用于编码如权利要求1或2所述的高立体选择性转氨酶突变体。

4.一种重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体包含编码如权利要求1或2所述高立体选择性转氨酶突变体氨基酸序列的编码基因。

5.如权利要求4所述的重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体以pet30a为载体质粒。

6.一种用于生产如权利要求1或2所述的高立体选择性转氨酶突变体的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌包含如权利要求4或5所述的重组表达载...

【专利技术属性】
技术研发人员：于洪巍，衣晓敏，叶丽丹，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：