【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物，尤其是涉及一种快速无损测定血小板功能的新方法。
技术介绍
1、血小板是小的无核细胞，对血栓形成和止血至关重要。已有研究表明平均血小板体积(mpv)可作为血小板反应性的指标，经常被用于快速诊断疾病、监测疾病严重程度、监测治疗效果以及筛选抗血小板药物。
2、由于血小板很容易被激活，从而导致血小板形态的定量研究非常困难。相关技术中，光透射聚集法(lta)一直是诊断血小板疾病的金标准，但其在严重的血小板减少症中很难准确地确定血小板功能；verifynow系统、血小板功能分析仪(pfa-100或pfa-200)和系统具有仪器昂贵、耗时、劳动和技术密集的缺点；还有学者提出了一种通过荧光标记血小板，从而测量血小板尺寸的微流体装置，以及进一步利用具有特定通道几何形状的胶原涂层微流控装置检测血小板聚集行为，但是其具有样品前处理复杂，且需要使用昂贵的高速相机的缺点。
3、因此，需要提供一种能够简便、快速分离血小板，便于分析血小板尺寸和功能的装置。
技术实现思路
1、本专利技术旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本专利技术提出一种微流控芯片，可用于简单、快速、灵敏、无损且无标记地测定血小板表观尺寸(dapp)，测量血小板尺寸分布的变化，用于血小板功能的评价。
2、本专利技术还提供一种血小板功能或尺寸的检测系统。
3、本专利技术还提供上述微流控芯片或检测系统在制备血小板功能或尺寸分析检测装置中的应用。
4、本专利技
5、本专利技术还提供一种测定血小板功能或尺寸的方法。
6、根据本专利技术的第一方面实施例的一种微流控芯片，包括依次连通的入口储液槽、分离区、出口储液槽；
7、所述分离区具有纵向分布的若干组微柱阵列；所述微柱阵列由若干行微柱行构成；所述微柱行由多个水平分布的s形微柱组成；所述s形微柱包括首尾相连的第一竖柱、第一横柱和第二竖柱；
8、所述微柱阵列的临界截止尺寸为dc，其由公式dc＝1.4×g×(tanθ)0.48决定，g为两个相邻s形微柱之间的间隔，θ为同列两个相邻s形微柱的梯度角度；所述dc值为2.0μm～4.2μm；
9、按照待测样品流动方向，所述每一组微柱阵列的dc值逐渐增大。
10、根据本专利技术实施例的微流控芯片，至少具有如下有益效果：
11、实施例的微流控芯片可用于简单、快速、灵敏、无损且无标记地测定血小板表观尺寸(dapp)，可通过测量血小板尺寸分布的变化来分析血小板的功能，以用于血小板功能的评价，在血小板活化相关疾病监测和个体化治疗方面具有潜在的应用前景。
12、相对于已有的c形微柱构成的微柱阵列，实施例的微流控芯片通过采用s形微柱实现了对血小板的分离和灵敏测量。且实施例的微流控芯片与相关技术中结合荧光标记和胶原涂层的微流控装置测得的血小板聚集状态具有非常高的相关性，能够准确检测血小板的激活状态。
13、该微流控芯片的样品需求量少，检测速度快；只需使用一滴全血(10μl)，在模拟生理条件的剪切速率下，即可以在2分钟内快速无标记地测定全血血小板dapp，且不会使血小板功能发生改变。该微流控芯片测定的血小板dapp不仅与凝血酶诱导的血小板聚集和粘附结果高度吻合，而且与抗血小板药物治疗前后心肌缺血大鼠的心肌损伤情况一致，其测得的血小板dapp可用于评估血小板活化状态，反映体内心肌损伤结果。
14、根据本专利技术的一些实施例，所述入口储液槽的数量为多个。所述入口储液槽用于存储待测样品和等渗稀释液。本领域技术人员可以合理调控入口储液槽的数量，以满足实际需求。
15、根据本专利技术的一些实施例，所述入口储液槽的数量为三个，包括第一入口储液槽、第二入口储液槽和第三入口储液槽。第一入口储液槽用于存储待测样品；第二入口储液槽和第三入口储液槽位于第一入口储液槽两侧，用于存储等渗稀释液。第二入口储液槽和第三入口储液槽的具体分布情况(左右任一侧)不影响其本身的作用与使用效果。
16、根据本专利技术的一些实施例，所述入口储液槽的容积为10μl～30μl。例如：可以为10μl。
17、根据本专利技术的一些实施例，所述入口储液槽上具有孔，所述孔的直径为1.5mm～3mm。该孔用于放置待测样品和等渗稀释液，本领域技术人员可以按需进行调整。例如：可以为1.5、2.0或3.0mm。
18、根据本专利技术的一些实施例，所述等渗稀释液包括生理盐水、细胞培养基、含血清的细胞培养基中的至少一种。
19、根据本专利技术的一些实施例，所述等渗稀释液优选含血清的细胞培养基。相比于其他等渗稀释液，含血清的细胞培养基可以更好地减少对红细胞等的影响，提高分离效率。例如：可以为含10％～20％ fbs的细胞培养基；具体可以为含20％ fbs的rpmi-1640培养基。
20、根据本专利技术的一些实施例，所述分离区还设置有子通道。所述子通道可用于连通入口储液槽与所述分离区，或连通相邻微柱阵列，或连通所述分离区与所述出口储液槽。
21、根据本专利技术的一些实施例，所述子通道用于连通入口储液槽与所述分离区，所述子通道由下邻所述微柱阵列的左右相邻s形微柱之间形成的通道向竖直方向延伸形成。所述子通道的长度为50μm～100μm。
22、根据本专利技术的一些实施例，所述子通道用于连通相邻微柱阵列，所述子通道由上邻所述微柱阵列的左右相邻s形微柱之间形成的通道向竖直方向延伸形成。所述子通道的长度为50μm～100μm。
23、根据本专利技术的一些实施例，所述子通道用于连通所述分离区与所述出口储液槽，所述子通道由上邻所述微柱阵列的左右相邻s形微柱之间形成的通道向竖直方向延伸形成。所述子通道的长度为300μm～500μm。
24、子通道可以用于区分出不同dc值的分段，也可以用于分析分离过程中以及分离后，细胞的分布情况。由此，能够更准确有效地分析血小板的尺寸。子通道过长会导致整个通道长度增加，可能影响回抽力，从而干扰血小板的分离。
25、根据本专利技术的一些实施例，所述梯度角度为同列相邻s形微柱的第二竖柱的底端连线与竖直方向的夹角。
26、根据本专利技术的一些实施例，所述s形微柱的尺寸具体可以为：第一竖柱长7.5μm，第一横柱长15μm，第二竖柱长7.5μm。
27、根据本专利技术的一些实施例，所述dc值为2.0μm～4.0μm。由此，能够很好地分离红细胞、血小板和白细胞；如果dc值小于该范围，所有细胞都会偏移至最右边的位置，各细胞无法有效分离。
28、根据本专利技术的一些实施例，所述每一微柱阵列的长度为360μm～1460μm。
29、根据本专利技术的一些实施例，所述微柱阵列的组数为15～30。例如：可以为21组。
30、根据本专利技术的一些实施例，所述微柱阵列的同一列中，s形微柱相较于上方s形微柱在水平方向上向右本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种微流控芯片，其特征在于，包括依次连通的入口储液槽、分离区、出口储液槽；
2.根据权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于，所述Dc值为2.0μm～4.0μm。
3.根据权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于，所述微柱阵列的组数为15～30。
4.根据权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于，所述入口储液槽的数量为多个。
5.一种血小板功能或尺寸的检测系统，其特征在于，包括权利要求1至4任一项所述的微流控芯片、流体驱动装置和成像装置。
6.权利要求1至4任一项所述的微流控芯片或权利要求5所述的检测系统在制备血小板功能或尺寸分析检测装置中的应用。
7.权利要求1至4任一项所述的微流控芯片或权利要求5所述的检测系统在检测血小板尺寸或血小板功能评价中的应用。
8.一种快速无损测定血小板功能或尺寸的方法，其特征在于，采用权利要求1至4任一项所述的微流控芯片或权利要求5所述的检测系统对待测样品中的血小板功能或尺寸进行检测，包括以下步骤：
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述方法还包括
10.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述待测样品流经所述微流控芯片的速度为0.1μL/min～0.3μL/min。
...【技术特征摘要】
1.一种微流控芯片，其特征在于，包括依次连通的入口储液槽、分离区、出口储液槽；
2.根据权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于，所述dc值为2.0μm～4.0μm。
3.根据权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于，所述微柱阵列的组数为15～30。
4.根据权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于，所述入口储液槽的数量为多个。
5.一种血小板功能或尺寸的检测系统，其特征在于，包括权利要求1至4任一项所述的微流控芯片、流体驱动装置和成像装置。
6.权利要求1至4任一项所述的微流控芯片或权利要求5所述的检测系统在制备血小板功能或尺寸分析...
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