一种盐酸氨溴索的检测方法技术

本发明专利技术提供了一种测定盐酸氨溴索及其制剂中有关物质反式－４－［６，８－二溴－１，４－二氢喹唑啉－３（Ｈ）］环己醇（杂质Ｂ）和２－氨基－３，５－二溴苯甲醛（杂质Ａ）的方法，其特征在于在测定反式－４－［６，８－二溴－１，４－二氢喹唑啉－３（Ｈ）］环己醇时，采用的检测波长为２５８ｎｍ，记录色谱图至主成份保留时间的３倍；在测定２－氨基－３，５－二溴苯甲醛的方法，其特征在于采用的检测波长为２３８ｎｍ，记录色谱图至主成份保留时间的３倍。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，特别涉及一种采用高效液相色谱法测定 盐酸氨溴索含量和有关物质的方法。
技术介绍
呼吸系统疾病是一种常见病、多发病，在世界范围内其发病率都较高，并有增加的 趋势，它是我国人口死亡的第二大因素。目前世界人口正步入老年化，而65岁以上老人因 呼吸系统疾病死亡占相当大的比例。喘、咳、痰、炎四症是呼吸系统疾病常见症状，同时互为 因果。痰是呼吸道炎症的产物，可刺激呼吸道黏膜，引起咳嗽及哮喘，并可加重感染。急慢 性支气管炎或慢性肺病患者呼吸衰竭时，如病人痰液黏稠度过高或形成痰栓，可阻塞呼吸 道而导致窒息。因此，使用黏痰调节剂，使患者黏痰溶解，变稀，黏度降低，加速呼吸道黏膜 纤毛运动，改善转运功能，具有十分重要的意义。氨溴索是目前临床广泛应用的祛痰剂，适用于急、慢性呼吸系统疾病(如急、慢性 支气管炎、支气管哮喘、支气管扩张、慢性阻塞性肺炎、肺结核、肺气肿、尘肺等)引起的痰 液黏稠、呼吸困难。同时氨溴索也可用于手术后肺部并发症的预防性治疗和婴儿呼吸窘迫 症的治疗。盐酸氨溴索(ambroxol)为溴己新在人体内的代谢产物，化学名称为反_4 环己醇盐酸盐，是一种新的黏痰溶解药，目前已是临床上疗效 肯定且应用最广泛的祛痰药物。20世纪80年代初盐酸氨溴索首次在德国上市。该药有较 广泛的药理作用，包括能刺激支气管黏液分泌，使痰液稀释，黏稠性降低；增加肺表面活 性物质的生成和分泌，降低黏液与纤毛的黏附力；能激活黏液纤毛功能；由于痰液的黏稠 度降低，使抗菌药物易于渗入，提高抗菌效果。本品半衰期为7. 5h。它主要与两种葡萄糖苷 酸结合生成代谢产物，经尿液排出。黏液高分泌是慢性气道炎症性疾病的重要病理生理特征一可加重呼吸道气流阻 塞，加速肺功能下降，气道贮留的黏液亦成为细菌生长的良好培养基，导致气道内感染的发 生及加重，而感染及后续炎性产物又进一步引起黏液高分泌，从而形成恶性循环，增加疾病 的住院率及死亡率。气道黏液的黏弹性主要由其中的黏蛋白(mucin，MUC)所决定，盐酸氨 溴索能分解其中的多糖部分，并增加呼吸道黏膜浆液腺体的分泌，减少黏液腺分泌，从而降 低痰液黏度，促进黏液排除的作用，对肺泡表面活性物质的合成与分泌，有显著促进作用， 增加支气管纤毛运动，起到显著排痰，改善呼吸状况的作用。另外，盐酸氨溴索能增加阿莫西林、头孢克肟、红霉素、强力霉素等许多抗生素对 肺组织的穿透性，提高该抗生素在感染部位的浓度。因此，当盐酸氨溴索与这些抗生素(阿 莫西林、头孢呋辛、红霉素、强力霉素)协同治疗时可升高抗生素在肺组织浓度、提高杀菌 效率。盐酸氨溴索的安全性很高。急性毒性试验中盐酸氨溴索的毒性指数非常低。盐酸氨 溴索无致突变(Ames和微核试验)。对于小鼠及大鼠的致癌性研究显示，盐酸氨溴索无致癌 性。目前尚无与其它药物合用的临床相关不良反应的报道。盐酸氨溴索的原研厂家是德国的勃林格殷格翰，该公司于1979年首次推出盐酸 氨溴索注射液，并于2000年进口中国，商品名为沐舒坦。盐酸氨溴索注射液(沐舒坦、伊诺 舒)目前已广泛用于各种急慢性肺部疾病、呼吸道窘迫综合征，具有降低痰液黏度、改善患 者排痰功能及肺功能的作用，疗效确切，适用年龄宽广，病人通常能很好耐受。目前，中国药典中对盐酸氨溴索有关物质的测定条件规定如下取供试品适量，加 流动相溶解并制成每1ml中含lmg的供试品溶液与每1ml中含10 y g的对照溶液。取对照 溶液20iU注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分峰高达满量程的20% -25%，精密 量取供试品溶液和对照溶液各20 yl注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的 2倍。供试品溶液色谱图中如有杂质峰，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积，即 杂质总量不得超过主成分的1%，其中采用的色谱条件为采用十八烷基硅烷键合硅胶为填 充剂；以O.Olmol/L磷酸氢二铵溶液(用磷酸调节pH值至7.0)-乙腈(50 50)为流动相； 检测波长为248nm。然而，这种方法对盐酸氨溴索有关物质的测定灵敏度不够，对杂质中的 最主要成分反式-4-环己醇(杂质B)和2-氨基-3， 5_ 二溴苯甲醛(杂质A)的含量测定不准确，测得的有关物质的含量比实际要小，使得氨溴 索的质量可控性受到影响。因此，现有技术仍然需要一种准确、有效的测定氨溴索中有关物质含量的方法。
技术实现思路
本专利技术的专利技术人经过大量创造性劳动，通过筛选，发现通过调整检测波长，并将现 技术中的保留时间延长至主成分保留时间的3倍或3倍以上，可以准确地定量测定出杂质 中的最主要成分反式-4-环己醇-(杂质B)和2-氨 基-3，5-二溴苯甲醛(杂质A)的含量，从而完成了本专利技术。本专利技术提供了一种测定盐酸氨溴索及其制剂中有关物质反式-4-环己醇(即有关物质B)的方法，其特征在于采用的检测波长为 258nm，记录色谱图至主成份保留时间的3倍。本专利技术还提供了一种测定盐酸氨溴索及其制剂中有关物质2-氨基-3，5-二溴苯 甲醛(即有关物质A)的方法，其特征在于采用的检测波长为238nm，记录色谱图至主成份保 留时间的3倍。本专利技术提供的测定盐酸氨溴索及其制剂中有关物质反式-4-环己醇(杂质B)的方法包括如下步骤1、取供试品适量，加流动相稀释至适当浓度，作为供试品溶液；2、量取以上供试品溶液适量，加流动相稀释100倍，作为对照溶液；3、精密量取对照溶液注入液相色谱仪，调节仪器灵敏度，使主成分色谱峰的峰高 约为记录仪满量程的20 %，色谱条件为检测波长248nm，十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂； 流动相为O.Olmol/L磷酸氢二铵溶液(用磷酸调节pH值至7.0)乙腈=(50 50)。4、取反式_4_环己醇对照品适量，精密称定， 用流动相溶解并稀释成一定浓度的溶液，作为反式-4_ 环己醇对照品溶液；5、精密量取供试品溶液与杂质反式-4-环己醇对照品溶液适量，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成份保留时间的3倍。其中，采用的色谱条件如下，检测波长258nm，十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂； 流动相为O.Olmol/L磷酸氢二铵溶液(用磷酸调节pH值至7.0)乙腈=(50 50)。本专利技术的方法中，供试品溶液的浓度为100-2000 ii g/ml ；优选500-1000 y g/ml ； 最优选750iig/ml。反式-4-环己醇对照品的浓度 为0. 3-6. 0 u g/ml ；优选1. 5-3. 0 u g/ml ；最优选2. 25 u g/ml。注入液相色谱仪的供试品 溶液与杂质反式-4_环己醇对照品溶液的体积为 5-200 u 1 ；优选 10-50 u 1 ；最优选 20 ill。本专利技术提供的测定盐酸氨溴索及其制剂中有关物质2-氨基-3，5_ 二溴苯甲醛 (杂质A)的方法包括如下步骤1、取供试品适量，加流动相稀释至适当浓度，作为供试品溶液；2、取以上供试品溶液适量，加流动相稀释100倍，作为对照溶液；3、精密量取对照溶液注入液相色谱仪，调节仪器灵敏度，使主成分色谱峰的峰高 约为记录仪满量程的20%，色谱条件为检测波长248nm，十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂； 流动相为O.Olmol/L磷酸氢二铵溶液(用磷酸调节pH值至7.0)乙腈=(50 50)。4、取2-氨基-3，5本文档来自技高网...

【技术保护点】
测定盐酸氨溴索及其制剂中有关物质反式－４－［６，８－二溴－１，４－二氢喹唑啉－３（Ｈ）］环己醇的方法包括如下步骤：１）取供试品适量，加流动相稀释至适当浓度，作为供试品溶液；２）量取以上供试品溶液，加流动相稀释１００倍，作为对照溶液；３）精密量取对照溶液注入液相色谱仪，调节仪器灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为记录仪满量程的２０％，色谱条件为检测波长２４８ｎｍ，十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为０．０１ｍｏｌ／Ｌ磷酸氢二铵溶液（用磷酸调节ｐＨ值至７．０）∶乙腈＝（５０∶５０）；４）取反式－４－［６，８－二溴－１，４－二氢喹唑啉－３（Ｈ）］环己醇对照品适量，精密称定，用流动相溶解并稀释成一定浓度的溶液，作为反式－４－［６，８－二溴－１，４－二氢喹唑啉－３（Ｈ）］环己醇对照品溶液；５）精密量取供试品溶液与杂质反式－４－［６，８－二溴－１，４－二氢喹唑啉－３（Ｈ）］环己醇对照品溶液适量，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成份保留时间的３倍；采用的色谱条件如下，检测波长２５８ｎｍ，十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为０．０１ｍｏｌ／Ｌ磷酸氢二铵溶液（用磷酸调节ｐＨ值至７．０）－乙腈（５０∶５０）。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：高春生，马璟琪，王玉丽，刘华，
申请(专利权)人：云南龙海天然植物药业有限公司，
类型：发明
国别省市：53[中国|云南]